李宏伟
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 非对称PCR-FP技术同步检测HSV-1/-2、CMV和EBV被引量：2
- 2009年
- 目的应用非对称PCR-荧光偏振（FP）技术建立一种同步检测全血中4种主要疱疹病毒（单纯疱疹病毒1／2型，巨细胞病毒、EB病毒）的新方法。方法以人疱疹病毒属通用引物行非对称PCR，扩增从179例样本中抽提的DNA。PCR扩增产物与特异性单纯疱疹病毒1／2型（HSV-1／-2）、巨细胞病毒（CMV）和EB病毒（EBV）寡核苷酸探针混合物温育杂交，荧光偏振检测技术检测杂交液荧光偏振值，据荧光偏振值判断病毒感染类型，并以DNA序列测定结果为参照。结果与DNA序列测定的阳性检测符合率为100％，但DNA序列测定检测均未检出多重混合感染。非对称PCR-FP方法对HSV-1／-2检测的灵敏度达到1．0×10^3拷贝／ml．对EBV和CMV检测的灵敏度达到2．0×10^3拷贝／ml。结论本法对于4种主要疱疹病毒感染的筛查及预防、预后判断具重要价值。
- 张菊吴中亮李丁王香玲梁平郭宴海李宏伟颜真
- 关键词：人疱疹病毒荧光偏振同步检测
- 经直肠超声造影定量分析对前列腺良恶性疾病的诊断价值被引量：3
- 2009年
- 目的探讨经直肠超声造影对前列腺良恶性疾病鉴别诊断的价值。方法对78例前列腺病变患者行经直肠前列腺超声造影检查,应用时间-强度曲线(TIC)测得感兴趣区(ROI)各灌注参数,即始增时间(AT)、达峰时间(TTP)、上升支斜率(β)及强度减半时间(T1/2);并对活检组织行免疫组织化学分析,并分析前列腺组织微血管密度(MVD)与病理类型的关系。结果78例前列腺病变患者经病理检查诊断为良性病变52例,其中良性前列腺增生34例,前列腺上皮内瘤18例;恶性病变26例,均为前列腺癌。21例前列腺癌病灶的TIC曲线形态呈速升速降型,39例良性病变呈速升缓降或经过一个平台期后速升缓降型。前列腺癌病灶的灌注参数β平均为0.23±0.10大于良性病变0.14±0.05(P<0.01),T1/2为(19.13±5.98)s小于良性病变(28.22±6.29)s,P<0.01。前列腺癌病灶的的MVD值平均为40.5±11.3大于良性病变30.0±9.8(P<0.05),且前列腺癌病灶的灌注参数β及T1/2与MVD呈显著正相关(r=0.51、r=0.57,P均<0.05)。结论经直肠超声造影灌注TIC曲线定量分析可用来评估前列腺恶性病变的微血管生成情况,对前列腺良恶性病变的鉴别诊断具有一定价值。
- 尹星周晓东韩增辉于铭王红霞李宏伟李运明
- 关键词：超声检查造影剂前列腺肿瘤前列腺增生
- 荧光偏振技术分析全血XPD基因单核苷酸多态性的研究被引量：3
- 2010年
- 将荧光偏振与非对称基因扩增技术联用,建立了可用于检测全血XPD基因单核苷酸多态性的新方法。用不等量(1∶5)的XPD基因上、下游引物对含单核苷酸多态性位点的目的片段进行非对称扩增,再用两种单核苷酸多态性序列特异的荧光标记探针对扩增产物进行检测。由于扩增得到的单链片段能够与各自不同的荧光标记探针特异结合,使荧光标记分子的分子量增加,偏振值(FP)增高。通过检测增高的FP值,可确定目的片段单核苷酸多态性。采用本方法对98例全血的XPD基因第751位密码子进行了单核苷酸多态性分析,并与传统的荧光偏振检测方法进行了比较,取得满意结果。
- 李丁张菊颜真张贺龙郭宴海刘文超李小惠李宏伟
- 关键词：单核苷酸多态性XPD基因
- 医学研究生药物基因组学教学探讨被引量：3
- 2009年
- 该文主要分析了药物基因组学在研究生医学教育中的重要性和特点,从教学内容、手段和教学考核方式,提高教学质量和水平,开展教学科研实践活动等方面,对医学研究生的药物基因组学教学进行了初步探讨。
- 张菊李丁李宏伟梁平黄启超郭宴海颜真
- 关键词：药物基因组学研究生教育教学改革
- 应用焦磷酸测序法检测肝癌中4种基因甲基化的研究被引量：3
- 2015年
- 目的使用焦磷酸测序技术检测GSTP1、E-cadherin、RARβ、P16基因启动子区域在肝癌组织中的甲基化状态,为临床早期诊断肝癌奠定基础。方法取肝癌组织及肝硬化组织石蜡切片标本,使用焦磷酸测序仪检测GSTP1、E-cadherin、RARβ、P16基因启动子甲基化状态。结果肝癌与肝硬化组织相比较GSTP1基因超甲基化率为20%(4/20),E-cadherin基因超甲基化率为40%(8/20),RARβ基因超甲基化率为55%(11/20),P16基因超甲基化率为75%(15/20)。其中E-cadherin、RARβ、P16基因有统计学差异(P<0.05)。结论 E-cadherin、RARβ、P16基因在肝细胞癌患者血清中的异常甲基化表达程度,可作为肝癌早期辅助诊断的分子标志物,焦磷酸测序技术检测技术为实现临床早期诊断、早期肝癌治疗奠定了试验基础。
- 牟瑛宋添添宫雪李宏伟欧阳晶
- 关键词：焦磷酸测序启动子甲基化肝癌
- Aurora-A过表达与宫颈癌进展及预后的关系被引量：5
- 2012年
- 目的研究Aurora-A在宫颈癌中的表达情况,以及其表达水平与宫颈癌预后的关系。方法选择2007年1月至2009年1月第四军医大学西京医院妇产科宫颈鳞状细胞癌与宫颈腺癌患者组织标本共74例,对照组选取同期保存的该患者癌旁正常组织(经病理检查证实无肿瘤细胞扩散),通过半定量RT-PCR、蛋白印迹实验在细胞学水平对Aurora-A的表达进行检测;通过免疫组化、实时定量PCR的手段明确Aurora-A在宫颈癌及正常癌旁组织中的表达情况;在此基础上将其表达水平与患者临床病理特征进行统计学分析。结果半定量RT-PCR与Western-blotting实验结果均提示肿瘤细胞系中Aurora-A的表达明显高于正常细胞;实时定量PCR提示51.35%(38/74)的组织标本中Aurora-AmRNA由0.088±0.102升高至0.623±0.410(P<0.001),并且与患者的FIGO分期、肿瘤细胞分化水平、是否存在宫旁浸润、是否存在远处转移等因素呈正相关关系。结论 Aurora-A在宫颈癌组织中存在高表达状态,并且与宫颈癌预后之间存在密切关系。
- 张潍王建辛晓燕王双李宏伟
- 关键词：宫颈癌聚合酶链反应蛋白印迹
- 人源免疫重建PDX模型构建及其在肿瘤免疫治疗中的应用进展被引量：2
- 2022年
- 免疫治疗已成为肿瘤治疗领域最具潜力的手段之一。由于肿瘤存在高度异质性等特点,导致免疫治疗响应率偏低,疗效有限。因此,迫切需要具有预测性的临床前模型,用于推动合理、安全的免疫治疗策略开发。传统体内、外肿瘤研究模型受限于人源免疫系统的缺失。因此,构建同时具有人源免疫系统和肿瘤的研究模型成为热点。将患者来源肿瘤移植入人源免疫系统重建小鼠体内肿瘤、免疫双人源化模型,具有可重现人体内免疫细胞与肿瘤间相互作用的优势,成为生理和病理条件下模拟人体肿瘤免疫治疗疗效的新模型。本文主要对多种类型人源化免疫重建PDX模型构建、优缺点及其在肿瘤免疫治疗研究中的最新应用进展进行综述。
- 李宏伟高先春窦建华闫君雅聂勇战
- 关键词：造血干细胞肿瘤免疫学免疫治疗
- 焦磷酸测序检测RARβ2基因启动子甲基化方法的建立被引量：4
- 2009年
- 目的:建立基因启动子甲基化的焦磷酸测序检测方法,为基因启动子甲基化标志物的检测奠定基础.方法:从正常人全血中提取基因组DNA.采用复合巢式PCR的方法扩增目的基因,克隆构建对照标准品质粒.使用甲基化特异性焦磷酸测序检测RARβ2基因启动子CpG岛的5个甲基化位点,双脱氧测序验证.将阳性和阴性对照标准品质粒PCR扩增产物按不同比例混合后进行焦磷酸测序,检测每个点的甲基化程度,制作校正曲线.结果:构建了甲基化特异性焦磷酸测序阴性对照和阳性对照标准品.经焦磷酸测序检测后,阴性对照标准品甲基化程度为0%,阳性对照标准品甲基化程度为100%,与双脱氧测序结果一致.经对混合样品检测,甲基化频率符合线性关系,线性相关性大于0.99,斜率约为1,并且所有位点的标准偏差约为1%.结论:成功构建了甲基化特异性焦磷酸测序检测RARβ2启动子区域甲基化阳性对照和阴性对照标准品质粒.建立了甲基化特异性焦磷酸测序检测基因启动子甲基化的方法.
- 李宏伟李慎梁平赵锦荣黄启超郭晏海雷小英刘永兰隋文君张菊颜真
- 关键词：甲基化焦磷酸测序
