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转录因子HP1BP3对近江牡蛎ChHSP70的负调控研究: Hsp70s(Heat shock proteins 70)是热休克蛋白家族中的重要成员,其分子大小为70 kDa左右。它们作为高度保守的分子伴侣广泛存在于所有细胞生物中,能够促进新生多肽链的正确折叠与装配,还有助于变性...; 杨琴; 关键词：近江牡蛎转录因子负调控; 文献传递

深圳住院患儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行病学和分子特征研究: 研究背景及目的：　　耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus ， MRSA)致病性强、病死率高，且呈多重耐药，给临床治疗带来极大的挑战。现阶段我国对...; 杨琴; 关键词：儿童患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行病学分子特性耐药性

bFGF与VEGF抗原表位筛选及复合肽的表达鉴定被引量：7: 2010年; 目的筛选bFGF与VEGF抗原表位,构建复合肽进行原核表达,并对复合肽免疫原性及抑瘤效果进行研究。方法生物信息学方法分别预测bFGF和VEGF抗原表位,筛选优势表位,通过柔性Linker连接各表位构建复合肽,合成引物,重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE PCR)方法合成复合肽cDNA序列,克隆入原核表达载体pET32a进行表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western-Blot鉴定,Ni-NTA柱纯化复合肽并免疫小鼠,间接ELISA法测定抗bFGF抗体和抗VEGF抗体滴度。构建黑色素移植瘤C57BL/6小鼠模型,研究复合肽免疫后肿瘤生长情况。结果生物信息学方法筛选获得3个bFGF表位和2个VEGF表位连同一个噬菌体多肽库筛选表位构建成复合肽,SOEPCR方法成功合成复合肽cDNA序列,构建原核表达载体表达bFGF与VEGF复合肽,纯化的复合肽免疫小鼠产生抗bFGF抗体和抗VEGF抗体;并且体内能有效抑制黑色素瘤生长。结论生物信息学方法筛选bFGF和VEGF获得的抗原表位构建的复合肽在体内同时激发抗bFGF抗体和抗VEGF抗体,并且能抑制肿瘤的生长,为研究bFGF与VEGF表位的抗肿瘤作用奠定基础。; 王宏朱中松杨琴向军俭杨红宇邓宁; 关键词：生物信息学 BFGF VEGF 原核表达重叠延伸PCR 肿瘤

清末岭南籍作家白话小说创作和理论研究 ——以地域文化为主要视角的考察: 清末,梁启超、吴趼人、黄世仲等小说家和理论家的出现,使岭南籍作家一跃而成为中国小说改革的前锋。他们的小说作品与小说理论,吸收了西方文化与文艺思想以及创作方法,也继承了前代岭南小说的优秀传统,呈现出具有强烈时代气息与浓厚地...; 杨琴; 关键词：白话小说小说理论清末; 文献传递

VEGF189基因合成、原核表达及鉴定被引量：4: 2009年; 目的获得编码VEGF189蛋白的基因,并通过原核表达系统表达VEGF189融合蛋白。方法应用SOE PCR技术合成VEGF189基因,克隆入pET-32a(+)原核表达载体,转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot检测,表达产物经HisTrapTMHP亲和柱层析纯化,测定蛋白浓度。结果DNA测序分析表明,合成的VEGF189基因与文献报道相一致。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的Trx-VEGF189融合蛋白,以包涵体和可溶2种形式存在。表达产物可被兔抗鼠VEGF多抗特异识别。经HisTrapTMHP亲和柱纯化,获得纯度达85%的融合蛋白。结论成功合成VEGF189基因,并在原核表达系统中获得高表达,为研制高效抗肿瘤的VEGF抗体和疫苗奠定了前期基础。; 陈丹王宏朱中松向军俭杨琴赵鑫邓宁; 关键词：原核表达

重组VEGF-A_(189)发酵、纯化及鉴定: 2009年; 为了获得大量重组血管内皮生长因子(VEGF-A189)蛋白的可溶性表达,对重组VEGF-A189工程菌进行发酵条件的优化并开展发酵研究.通过摇瓶培养进行可溶性发酵条件优化,在5L发酵罐中发酵重组VEGF-A189工程菌,将发酵产物经镍离子柱亲和层析纯化,并对发酵产物进行SDS-PAGE,WesternBlot和ELISA等分析鉴定.结果表明,重组VEGF-A189工程菌可溶性发酵条件为:37℃培养重组VEGF-A189工程菌4h,加入0.3mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)于28℃诱导表达4h.在5L发酵罐中按比例放大发酵,在补料发酵3.5h后菌体密度(A600nm)达到8.0,调整发酵温度到28℃,IPTG诱导4h后的菌体密度为13.72,菌体产量为40g/L.镍离子柱亲合层析纯化后重组VEGF-A189纯度达到90%以上,回收率大于80%,WesternBlot、ELISA分析结果显示,重组VEGF-A189蛋白和抗VEGF抗体有良好的结合活性.结果表明经过发酵条件优化后发酵可获得有免疫结合活性的可溶性重组VEGF-A189蛋白.; 朱中松王宏杨琴向军俭赵鑫杨红宇邓宁; 关键词：发酵可溶表达

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杨琴