殷安国 作品数:19 被引量:33 H指数:4 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 云南省应用基础研究计划面上项目 云南省科技厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
树鼩呼肠孤病毒RT-nPCR检测方法的建立及初步应用 目的 建立树鼩呼肠孤病毒(TRV)RT-nPCR检测方法,为树鼩的质量控制提供检测方法.方法 从三批野外来源的具有感染临床症状的树鼩粪便中分离得到三株病毒,经电镜观察和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)... 李晓飞 殷安国 张媛 罗军 孙晓梅 代解杰关键词:树鼩 树鼩IL-2全长编码序列的克隆及分子特征分析 被引量:2 2013年 树鼩作为多种人类疾病模型已受到广泛关注,而免疫因子对于树鼩模型评价至关重要,但目前对其白细胞介素-2(IL-2)的研究鲜有报道。该实验以经ConA(concanavalin)诱导培养的树鼩淋巴细胞总RNA为模板,RT-PCR克隆出465bp的树鼩IL-2全长编码序列,并采用ClustalW软件分析其序列和分子特征。结果表明树鼩IL-2cDNA编码一个由154个氨基酸组成的蛋白质,其cDNA及氨基酸序列与人的同源性分别为93%及80%,且其整体结构与人IL-2相似。MEGA5.0软件构建的进化树表明,树鼩与人及恒河猴的亲缘关系较近。Pymol软件对树鼩和人IL-2氨基酸序列进行的三维结构模建表明,两者的IL-2分子三维空间结构基本相似,表面大部分区域所带电荷相同,但在某些区域差异较大,且树鼩多出一个糖基化位点,这些差异对抗体的结合可能存在影响。该研究为今后树鼩IL-2单克隆抗体的制备及功能研究奠定了基础。 黄晓燕 李明利 徐娟 高跃东 王文广 殷安国 李晓飞 孙晓梅 夏雪山 代解杰关键词:树鼩 IL-2 克隆 HCV感染树鼩模型中腹部横切手术及肝门静脉注射新方法的建立 目的 采用腹部横切手术及肝门静脉注射法将HCV迅速足量注射接种到树鼩体内肝脏,提高HCV对树鼩的感染率。方法 采用横切打开树鼩腹腔,找到肝门静脉,进行肝门静脉注射接种HCV,手术后1W进行采血、ALT检测、HCV病毒载量... 匡德宣 殷安国 孙晓梅 王文广 李晓飞 仝品芬 陆彩霞 代解杰HCV感染树鼩模型中腹部横切手术及肝门静脉注射新方法的建立 被引量:2 2013年 目的采用腹部横切手术及肝门静脉注射法将丙型肝炎病毒(hepatitis c virus,HCV)迅速足量注射接种到树鼩体内肝脏,提高HCV对树鼩的感染率。方法采用横切打开树鼩腹腔,找到肝门静脉,进行肝门静脉注射接种HCV,手术后1周进行采血、ALT检测、HCV病毒载量检测、肝脏病理检测及HCV-RNA抗原检测。结果横切手术及肝门静脉注射20只树鼩,手术后经护理恢复,树鼩伤口恢复良好,手术成功率及肝门静脉注射准确率均达100%,保证HCV完全快速进入树鼩肝脏。有60%(12/20)树鼩出现一过性的病毒血症或间歇性病毒血症,感染树鼩的病毒载量最高可达到1x105拷贝/mL,肝功能中ALT指标最高可达到192μ/L,肝脏活体组织病理检查发现不同程度的肝炎症状,肝组织能检测到HCV-RNA抗原。结论腹部横切具有充分暴露肝门静脉、操作方便、符合解剖生理、组织创伤较小、伤口易于愈合等优点,适用于肝门静脉注射,同时提高了感染率,该技术方法为进一步深入研究HCV感染树鼩奠定基础,对于其它相关实验动物和动物实验具有一定借鉴经验和参考价值。 匡德宣 殷安国 孙晓梅 王文广 李晓飞 仝品芬 陆彩霞 代解杰树鼩IL-6构建的质粒为标准品的TAQMAN探针实时荧光定量PCR方法 一种以树鼩IL-6质粒为标准品的TAQMAN探针荧光定量PCR方法,包括对树鼩IL-6基因片段的克隆并测序,以克隆的树鼩IL-6基因为目标,设计TAQMANPCR引物和探针,设计实验找到最优条件下引物的退火温度、引物浓度... 代解杰 黄晓燕 孙晓梅 罕园园 陆彩霞 匡德宣 王文广 仝品芬 徐娟 殷安国 李晓飞文献传递 树鼩IL-2构建的质粒为标准品的TAQMAN探针实时荧光定量PCR方法 一种以树鼩IL-2质粒为标准品的TAQMAN探针荧光定量PCR方法,包括以树鼩IL-2基因为目标,设计TAQMANPCR引物和探针,设计实验找到最优条件下引物的退火温度、引物浓度、探针浓度,提纯树鼩IL-2质粒计算IL-... 代解杰 黄晓燕 孙晓梅 罕园园 陆彩霞 匡德宣 王文广 仝品芬 徐娟 殷安国 李晓飞文献传递 树鼩呼肠孤病毒的分离鉴定 性病毒严重危害树鼩的生存和健康,有关树鼩自然感染病毒情况鲜见报道.采集6 份因腹泻死亡的野生树鼩粪便,用Vero 细胞进行病毒分离,72h 后细胞发生病变,特征为颗粒增多,破碎,变圆固缩,拉网,脱落;电镜观察显示该病毒为... 徐娟 黄晓燕 李晓飞 王文广 殷安国 夏雪山 孙晓梅 代解杰关键词:树鼩 呼肠孤病毒 树鼩IL-6构建的质粒为标准品的TAQMAN探针实时荧光定量PCR方法 一种以树鼩IL-6质粒为标准品的TAQMAN探针荧光定量PCR方法,包括对树鼩IL-6基因片段的克隆并测序,以克隆的树鼩IL-6基因为目标,设计TAQMANPCR引物和探针,设计实验找到最优条件下引物的退火温度、引物浓度... 代解杰 黄晓燕 孙晓梅 罕园园 陆彩霞 匡德宣 王文广 仝品芬 徐娟 殷安国 李晓飞文献传递 实验树鼩主要内分泌器官的组织学观察 目的:了解树鼩主要内分泌器官的组织学结构特征,建立树鼩正常的内分泌器官组织学图谱.
方法:选取人工饲养的健康树鼩10只,麻醉后放血处死和病理解剖,对甲状腺、甲状旁腺、肾上腺及脑垂体进行病理大体检查和取材,常规病... 匡德宣 孙晓梅 陆彩霞 王文广 仝品芬 殷安国 李晓飞 代解杰关键词:内分泌器官 组织学 文献传递 兔抗肠道病毒71型血清制备中免疫剂量对抗体效价的影响 被引量:1 2021年 目的研究兔抗肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)血清制备中不同免疫剂量对抗体效价的影响。方法将9只实验兔简单随机分为3组,每组3只。5、50和100μg 3个剂量EV71灭活疫苗和弗氏佐剂均匀混合后,通过肌内注射途径分别免疫3组动物,于第0、7、14及28天各免疫1次,每7天采血,分离血清,检测抗EV71中和抗体效价。结果100μg剂量组兔血清抗体效价显著高于5和50μg剂量组(第42天t值分别为-3.282和-2.486,P值均<0.05)。第42天时,兔血清抗体效价和免疫剂量(5~100μg范围内)呈线性关系,回归方程y=478.229x-2041.820。结论在本实验选择的3个免疫剂量中,随着免疫剂量升高,产生的血清抗体效价也升高,且呈线性关系。 张玉平 胡云光 殷安国 李亚东 杜宋婷 王雯慧 李晓颖 常亚军 段男 宋杰关键词:免疫血清 肠道病毒71型 抗体效价