沈南
- 作品数:234 被引量:522H指数:12
- 供职机构:上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术发展基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 系统性红斑狼疮患者脱氧核糖核酸酶1基因表达研究被引量:2
- 2003年
- 目的 研究脱氧核糖核酸酶 1(deoxyribonuclease ,DNASE1)基因表达及 m RNA剪接形式与系统性红斑狼疮 (systemic lupus erythematosus,SL E)的关联性。 方法 以实时荧光定量聚合酶链反应 (real- time PCR)方法检测 DNASE1的 m RNA表达水平 ,以毛细管电泳技术分析 m RNA编码区替代剪接体 ,结合单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphisms,SNPs)单倍型了解基因结构对表达的影响。 结果 SL E患者 DNASE1基因表达水平显著高于正常对照 (P<0 .0 0 1) ,未发现 SL E疾病活动性指数积分与基因表达水平存在相关性 ,但性别分析显示女性患者 DNASE1基因表达水平高于男性患者 (P<0 .0 1)。 8名正常人与 18例患者的毛细管电泳结果显示 ,患者与正常人替代剪接谱系不同 ,且 380 bp处存在明显条带 ,具有不同单倍型的 SL E患者替代剪接谱系亦有差异。 结论 SL E患者 DNASE1基因表达异常 ,并存在与正常人不同的 m RNA剪接体。 DNASE1基因与 SL
- 冯学兵沈南陈顺乐华晶孙莉钱捷
- 关键词:系统性红斑狼疮基因表达
- 系统性红斑狼疮患者及其家庭成员外周血基因表达谱的研究被引量:4
- 2004年
- 目的研究家族性SLE患者、一级亲属和正常人外周血基因表达谱的改变,探讨家族性SLE发病机制。方法首先从外周血提取总RNA,逆转录合成单链、双链cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与基因芯片进行杂交,再通过抗原抗体反应机制标记上荧光染料Cy3后,使用基因芯片扫描仪进行图像扫描。使用分析软件进行表达差异和聚类分析。结果在3000多个基因中,鉴定出59个基因存在表达差异,其中有34个基因表达上调,25个基因表达下调,这与散发性SLE患者的表达差异基因基本相同。在34个表达上调基因中,有22个基因在SLE患者和其未患病的姐妹中都表达上调;在25个表达下调的基因中,有17个基因在SLE患者和其未患病的姐妹中都表达下调。聚类分析显示根据外周血基因表达谱可明确地将SLE患者、未患病亲属及正常人对照区分开。结论该基因芯片技术有较高的重复性和稳定性,能有效地进行家族性SLE疾病相关基因的初步筛选。
- 韩光明陈顺乐沈南华晶王元鲍春德
- 关键词:系统性红斑狼疮家庭成员外周血基因表达谱寡核苷酸序列分析
- 狼疮遗传研究进展
- 系统性红斑狼疮(SLE)是典型的非器官特异性自身免疫病.其免疫学异常表现极为复杂多样,几乎覆盖了整个免疫系统功能的紊乱,所以被公认为自身免疫病的原型.SLE发病为多因性,可能病因包括遗传、感染、性激素等,但是近来国内外的...
- 沈南
- 关键词:系统性红斑狼疮免疫学人类基因组计划
- 文献传递
- 自身核抗原U1SnRNP70kD多肽分子中U1RNA结合功能区的cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 1995年
- 本研究采用逆转录-PCR技术克隆自身核抗原U1SnRNP70kD多肽分子中U1RNA结合功能区(U1RNAbindingdomain,U1BD)的cDNA,经DNA测序证实以后定向插入原核表达载体PGEX-2T,进而导入大肠杆菌中表达重组蛋白。免疫印迹法研究表明:96%(48/50)的抗U1SnRNP70kD抗体阳性血清能够识别该重组蛋白,证实U1BD重组蛋白具有U1SnRNP70kD抗原性,而且U1BD是U1SnRNP70kD多肽上主要抗原表位区域,能够被大多数抗U1SnRNP70kD抗体阳性血清识别。这为今后对U1BD抗原表位精确定位,分析特定抗原表位与疾病的相关性以及制备重组抗原用于临床检测等研究奠定基础。
- 陆瑜沈南薛峰陈顺乐
- 关键词:重组抗原
- 重组自身抗原U1RNP多肽的制备及在风湿病诊断中的意义被引量:2
- 1997年
- 制备重组核抗原U1RNP多肽,为探讨自身免疫性疾病的机理及提高临床自身抗体检测敏感特异性奠定基础。方法对120例经对流免疫电泳证实的RNP抗体阳性血清,以重组抗原为基质进行了印迹法测定。结果重组抗原具有分子量70000多肽抗原性,115例抗RNP70000抗体阳性血清中有112例可识别重组抗原,分子量为70000(r70000),阳性率为97.4%,而5例RNP阴性血清及5例正常人血清均不识别r70000。结论r70000具有良好的核抗原RNP70000多肽的特异性,可进一步作为抗原表位研究的手段。
- 薛峰沈南陆瑜陈顺乐
- 关键词:多肽风湿病
- 干扰素诱导蛋白3基因在系统性红斑狼疮发病中的意义及其真核表达载体的构建被引量:1
- 2005年
- 目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中干扰素诱导蛋白3(IFIT3)基因mRNA的实时定量表达水平与SLE疾病特异性和病情活动度的相关性,同时构建IFIT3基因的真核表达载体pGFP-IFIT3以备研究其免疫学功能。方法收集144例SLE患者、27例非SLE患者与59名正常对照人群的临床资料,取外周血抽提总RNA并逆转录成cDNA,运用SYBRgreen实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测患者组和对照组的IFIT3mRNA表达水平的差异,并与病情活动度进行分组比较,分析其意义。用gateway基因克隆技术,将含有IFIT3开放阅读框(ORF)序列的穿梭质粒与GFP融合蛋白表达载体pGFP-DEST53连接为重组子,构建IFIT3基因的真核表达载体pGFP-IFIT3,并进行酶切电泳和测序鉴定。结果①SLE患者组的IFIT3mRNA-ΔΔCT值显著高于非SLE对照组(P=0.012)和正常对照组(P=0.000)。②SLE活动组的IFIT3mRNA-ΔΔCT值显著高于SLE非活动组(P=0.036),SLE患者组的IFIT3mRNA-ΔΔCT值与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分有非常显著的正相关性(P=0.005)。③构建的重组真核表达pGFP-DEST53质粒经酶切电泳和测序鉴定,分子大小与序列均正确。结论作为干扰素诱导表达的基因,IFIT3mRNA定量表达水平的升高对SLE患者的诊断有一定的意义,同时对SLE患者的病情活动度和病情严重度的判断有一定价值。成功构建了IFIT3基因的真核表达载体pGFP-IFIT3,为以后研究其免疫学功能提供了基础。
- 汤建平黄向阳陈晓翔李挺陆瑜钱捷吕良敬李春明沈南顾越英
- 关键词:实时定量聚合酶链反应真核表达载体
- 系统性红斑狼疮患者干扰素表达水平新的检测和人源化IFN-α单抗的中和作用
- 为了解探索新的检测系统性红斑狼(SLE)患者血清中的干扰素(1FN)-α的表达水平,检测人源化IFN-α抗体对SLE患者血浆中IFN-α的活性的中和作用。收集161例SLE、19例类风湿关节炎(RA)、178名健康对照的...
- 黄新芳沈南旷苗李立新
- miR-146在免疫系统中的研究进展
- 2009年
- 近年来的研究表明,微小RNA(miRNA)在发育、分化、凋亡、病毒感染和癌症等多种生物学过程中有着重要的生理、病理生物学意义。揭示miRNA在细胞中的作用,将会给基因功能和基因治疗的研究带来新的机遇,已成为科学家们的研究热点。文章以miR-146为例,综述了miR-146在遗传、免疫、病毒感染、肿瘤等多方面的生物学意义,并重点概述miR-146在免疫系统的最新研究进展,揭示同一miRNA在不同组织、疾病中作用的多样性和复杂性,并在生物体内的多样化调控途径中扮演着关键性角色。
- 赵遐沈南唐元家
- 关键词:自身免疫生物学作用多样性
- 过表达单一MicroRNA成熟体序列的新方法
- 本发明涉及过表达单一MicroRNA成熟体序列的新方法。本发明首次提供了一种全新的单一microRNA成熟体表达策略,通过对表达构建物的“茎”部位的碱基互补、配对的巧妙设计,使得表达构建物能够形成茎环结构但不表达另一mi...
- 沈南曲波
- 文献传递
- 调节RANTES表达的miR-125a、其组合物及其用途
- 本发明涉及调节RANTES表达的miR-125a、其组合物及其用途。具体而言,本发明涉及miR-125a、其在制备调节RANTES表达用的药物中的用途、以及含有miR-125a的药物组合物。本发明还涉及体外调节组织或细胞...
- 沈南唐元家赵遐曲波崔慧娟王树军
- 文献传递