王先炜
- 作品数:157 被引量:469H指数:13
- 供职机构:南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生电气工程更多>>
- 一株猪源脑心肌炎病毒的分离与鉴定被引量:1
- 2010年
- 将江苏省某规模化猪场疑似脑心肌炎仔猪病料接种BHK-21细胞,并采用间接免疫荧光试验(IFA)、基因序列测定和动物人工感染试验进行鉴定,结果显示,BHK-21细胞接种病料样品后盲传3代出现细胞病变,病毒TCID50为10-9.2/mL;用脑心肌炎病毒(EMCV)单克隆抗体-IFA检测,在感染细胞的胞浆中可见特异性荧光;分离物的PCR扩增产物的基因序列与GenBank中的EMCV VP1基因的同源性为85.7%~99.8%;BALB/c小鼠人工感染该分离株后出现明显的临床症状和EMCV的典型病理变化,免疫组织化学试验证明,试验鼠脑组织中含有EMCV抗原,商品仔猪人工感染后未出现明显的临床症状及病理变化,证明该分离病毒为EMCV(NJ08株),且对BALB/c小鼠具有较强的致病作用。
- 白娟蒋康富王先炜李玉峰姜平
- 关键词:脑心肌炎病毒
- 育肥猪呼吸道疾病综合征病理学观察和病原学检测
- 猪呼吸道疾病综合征是一种由病毒、细菌、环境应激和猪体免疫力低下等多因素相互作用引起的呼吸道疾病。2009年2-4月,上海农场某猪场一批育肥猪出现疑似病例,表现为食欲下降,咳嗽,呼吸困难,生长缓慢和料肉比降低。本研究在流行...
- 刘捷李玉峰王先炜李文良姜平
- 关键词:猪呼吸道疾病综合征病理学分析细菌学检测
- 糖酵解抑制剂在制备防治猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物中的应用
- 本发明公开了糖酵解抑制剂在制备防治猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物中的应用。本发明研究发现糖酵解抑制剂可用于防治猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,尤其是通过口服乳酸脱氢酶抑制剂草氨酸钠或培黄素可显著抑制PRRSV在猪体内复制,...
- 姜平刘雪威白娟王先炜
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型灭活疫苗
- 本发明猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗(SH株),属于生物技术领域。猪圆环病毒2型毒株SH属于圆环病毒科圆环病毒属,已在中国科学院武汉病毒研究所进行保藏,保藏日期:,保藏号为。2002年从上海地区发生严重的断奶仔猪多系...
- 姜平王先炜李玉峰
- 文献传递
- 中国东南部地区副猪嗜血杆菌分离株ERIC-PCR指纹图谱分析被引量:17
- 2009年
- 采用肠杆菌基因间重复一致序列PCR方法,在对15种副猪嗜血杆菌血清型参考株鉴定获得15种不同ERIC-PCR指纹的基础上,对分离自中国东南部发生Glasser's病的不同猪场的111株副猪嗜血杆菌进行了指纹鉴定。结果显示:111株分离株显示出23种指纹图谱,前3种最流行的指纹图谱为ERIC-PCRⅩⅩ(20/111),ⅩⅩⅢI(9/111)和Ⅳ(8/111)。且在111株分离株中,来自不同地区的分离株分别表现出不同种类的指纹图谱。该试验表明,ERIC-PCR方法可适用于对某一地区的副猪嗜血杆菌进行分子流行病学的研究和基因型的鉴定;试验结果还揭示了副猪嗜血杆菌在中国东南部地区已广泛存在并具有多样的基因型。
- 李鹏李军星李玉峰李文良王先炜姜平
- 关键词:副猪嗜血杆菌ERIC-PCR指纹图谱
- 猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白重组腺病毒的构建与鉴定被引量:16
- 2006年
- 猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合症的必需病原,含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap),其中Cap含有病毒主要抗原表位,是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因。本研究利用PCR技术将Cap蛋白基因克隆入人5型腺病毒穿梭载体(pShuttle-CMV),与腺病毒骨架载体(pAdEasyTM)共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞,经多次亚克隆获得了重组腺病毒rAd-Cap,测定其TCID50为1013.7/mL。用RT-PCR、间接ELISA、Westernblot和IPMA等方法证明了Cap蛋白在腺病毒中获得表达。该研究为发展PCV2的重组腺病毒基因工程疫苗奠定了基础。
- 王先炜姜平李玉峰蒋文明汤景元
- 关键词:CAP蛋白腺病毒
- 鉴别检测PCV2a与PCV2b的PCR的建立与应用
- 快速鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)的2个基因型PCV2a与PCV2b,根据PCV2a和PCV2b基因序列特征,设计PCR引物,成功建立了鉴别检测PCV2a与PCV2b的PCR,并进行了敏感性试验和特异性试验.结果显示,该...
- 朱雪蛟白娟王先炜姜平
- 关键词:猪圆环病毒病病毒检测聚合酶链式反应特异性敏感性
- 猪呼肠孤病毒的分离鉴定与仔猪致病性研究
- 2011年底以来,我国很多省市初生仔猪出现腹泻性疾病。病猪以腹泻、脱水、厌食、迅速消瘦为主要特征。一些研究结果显示,其主要病原包括猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒和博卡病毒等。为了进一步研究该类疾病的病原流...
- 陈兴慧何庆东白娟王先炜姜平
- 关键词:呼肠孤病毒
- 文献传递
- 规模化猪场猪圆环病毒病防控技术规范
- 本标准适用于规模化猪场猪圆环病毒病的诊断、疫情报告和确认、疫情处置、预防与控制。
- 姜平白娟王先炜李玉峰陈闻曹瑞兵周斌许家荣
- 猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量:4
- 2022年
- 为实现对猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速鉴别诊断,根据PEDV的N基因和TGEV的S基因序列设计引物,并以猪β-肌动蛋白(ACTB)作为内参对照,建立了PEDV和TGEV的TaqMan探针双重荧光定量PCR检测方法。结果显示:该方法对PEDV、TGEV和ACTB的检测灵敏度分别为1、10和10 copies/μL;PEDV和TGEV敏感度为10^(0.02)TCID_(50)和10_(0.05)TCID_(50),高于常规RT-PCR,批内和批间变异系数均小于1%。与猪德尔塔冠状病毒、猪急性腹泻综合征冠状病毒、猪轮状病毒、乙型脑炎病毒、塞内卡谷病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、脑心肌炎病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型均无交叉反应。采集124份临床病料样品进行检测,PEDV阳性率为42.74%,TGEV阳性率为8.87%,检测结果与该病毒单一荧光RT-PCR方法的检测结果均一致,证明该方法具有较高特异性和敏感性,可用于PEDV和TGEV临床病料检测。
- 梁霄孙萌王鹏程白娟王先炜刘星姜平
- 关键词:猪流行性腹泻病毒猪传染性胃肠炎病毒荧光定量PCR