王巍
- 作品数：27 被引量：127H指数：7
- 供职机构：北京市水产科学研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 西伯利亚鲟热休克蛋白HSP70cDNA的克隆、序列分析和组织分布被引量：15
- 2012年
- 采用普通PCR和RACE技术克隆了西伯利亚鲟Acipenser baerii热休克蛋白HSP70 cDNA的全序列,该序列全长为2 343 bp,其中5'非编码区为140 bp,3'非编码区为256 bp,可读编码框(ORF)为1 947bp,编码为648个氨基酸。该氨基酸序列中含有HSP70家族的3个特征序列——IDLGTTYS、IFDLGGGTFD-VSIL和IVLVGGSTRIPKIQK,细胞质特征性保守序列为EEVD,C端重复序列为GGMP。该cDNA序列与其它生物的HSP70 cDNA序列一样具有很高的相似性。系统发育树显示,西伯利亚鲟与非洲爪蛙蟾Xenopus laevis、密西西比短吻鳄Alligator mississippiensis、美西螈Ambystoma mexicanum的亲缘关系较近。实时定量分析结果表明,水温为17.5℃时,西伯利亚鲟肝脏、鳃、脾脏、心脏、肌肉、中肠、性腺、脑8种组织中均有HSP70表达,其中HSP70在脾脏中的表达量最高,鳃中的次之,肝脏中最低(P<0.05)。
- 田照辉徐绍刚王巍胡红霞董颖宋超
- 关键词：HSP70CDNA
- 急性热应激对西伯利亚鲟HSP70 mRNA表达、血清皮质醇和非特异性免疫的影响被引量：31
- 2013年
- 为研究西伯利亚鲟(Acipenser baerii)对急性热应激的抗逆机理,将体质量为(155.47±19.50)g的鱼从17.5℃迅速转至27.5℃水中,在1h和3h取样测定HSP70 mRNA表达变化、血清皮质醇和非特异性免疫指标。结果显示:急性热应激时鳃、脾和脑的HSP70 mRNA表达量升高,具有组织特异性,热应激1h时鳃的表达量升高最快(P<0.05),3h时保持1h时的表达水平;脾和脑热应激1h时表达量变化不显著,在1h至3h时升高较快,并且脑组织的表达量升高最快(P<0.05)。热应激1h时血清皮质醇(Cortisol)含量迅速升高(P<0.05),之后快速回落。脾脏巨噬细胞呼吸暴发在热应激1h时显著升高(P<0.05),3h时降低。血清补体C3在1h时略有升高,3h时显著性降低(P<0.05)。血清溶菌酶活性(LZM activity)先升高后降低差异不显著。血清超氧化物歧化酶(SOD)活力随热应激时间延长逐渐降低,3h时显著降低(P<0.05)。血清丙二醛(MDA)含量随热应激时间延长逐渐降低,差异不显著。以上结果表明:1h的短暂急性应激增强了西伯利亚鲟的非特异性免疫,3h的应激使免疫力和抗氧化能力显著下降;在热应激过程中,HSP70表达升高,其中鳃组织最快,起到应激保护作用,提高了机体热耐受力。
- 田照辉徐绍刚王巍胡红霞马国庆
- 关键词：急性热应激HSP70MRNA表达皮质醇非特异性免疫
- 利用Tol2转座子构建转基因草金鱼初探
- 2014年
- 青鳉Tol2转座子是脊椎动物中发现的第一例天然具有活性的转座子,目前已经被成功应用于多种模式动物的转基因研究中。采用PCR的方法以质粒pCAgcGH为模板亚克隆出一段含有草鱼生长激素(GH)5个外显子、鲤鱼β-actin启动子及多个酶切位点的序列,并将这段序列与经双酶切处理的质粒pTol2-MCS-EGFP进行重组连接,得到重组质粒pTol2-GH-EGFP。采用显微注射的方法将重组质粒pTol2-GH-EGFP与体外合成的Tol2转座酶mRNA一起注入草金鱼受精卵中。通过观察绿色荧光和PCR检验绿色荧光蛋白和GH基因的表达,筛选出成功转入外源基因的草金鱼。阳性表达检出率为17.3%。利用Tol2转座子构建转基因草金鱼,不仅丰富了Tol2转座子的应用范围,而且为进一步利用Tol2转座元件进行观赏鱼转基因及基因表达研究奠定了基础。
- 董颖胡红霞王巍田照辉
- 关键词：转基因草金鱼
- 六种杂交鲟肌肉营养成分和氨基酸组分比较研究被引量：9
- 2016年
- 鲟鱼肉是一种高蛋白、低脂肪且含有丰富氨基酸和脂肪酸及微量元素的优质肉类，是补充人体营养物质的理想食物来源。但由于具有高染色体数和多倍性的特点，鲟形目鱼类中产生可活的种间或属问杂交的可能性远远高于其他鱼类，
- 董颖胡红霞马国庆王巍朱华
- 关键词：杂交鲟肌肉矿物质元素氨基酸营养评价
- 西伯利亚鲟MHCⅡβ基因克隆、组织分布及细菌感染后的表达变化被引量：5
- 2019年
- 为研究鲟鱼主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)基因的分子特征和表达,利用RACE技术克隆获得了西伯利亚鲟Acipernser baerii MHCⅡβ cDNA序列1443 bp,包括开放阅读框(OFR)801 bp,编码184个氨基酸。Blast分析显示,由MHCⅡβcDNA基因推导的氨基酸序列同其他物种的一致性为46%～83%,通过Smart站点分析,该序列具有SMART MHC_Ⅱ_beta结构域、SMART IGc1结构域和跨膜螺旋结构域;实时定量分析表明,正常情况下MHCⅡβ mRNA在西伯利亚鲟10种组织中均有表达,其中脾、头肾和血液中表达量较高,皮肤和肉中表达量极低(P<0.05);感染维氏气单胞菌Aeromonas veronii 40 h后,脾脏中MHCⅡβ mRNA的表达量显著低于未感染的对照组(P<0.05),直至93 h时恢复至对照组水平且有显著性变化(P<0.05)。研究表明,MHCⅡβ基因参与了西伯利亚鲟的免疫反应。
- 田照辉徐绍刚胡红霞王巍董颖东天孙爱
- 关键词：细菌感染
- 基因编辑技术在鱼类中的研究及在水产养殖中的应用展望被引量：3
- 2019年
- 基因编辑技术是在D N A水平,通过删除、插入等方式对DNA特定序列进行改造的技术。目前人们主要通过锌指蛋白核酸酶技术(Zincfinger nuclease,ZFNs)、类转录激活因子效应物核酸酶技术(transcription activator-like effector,TALENs)和CRISPR/Cas9(Clusteredregularly interspaced short palindromic repeats-associated protein-9 nuclease)等技术来实现编辑基因的功能。
- 王巍胡红霞
- 关键词：罗非鱼半滑舌鳎水产生物CRISPR水产养殖
- 不同催产剂对俄罗斯鲟人工繁殖效果的影响被引量：6
- 2014年
- 分别给性腺发育成熟的俄罗斯鲟亲鱼注射鲤鱼脑垂体、促黄体素释放激素类似物以及促黄体素释放激素类似物+马来酸地欧酮进行人工繁殖。试验结果表明,3种激素均能在水温15～16℃下诱导人工养殖雌鱼卵成熟与排出,其中注射促黄体素释放激素类似物+马来酸地欧酮组的效果最好:效应时间22～38h,产卵率80%,受精率(83.2±3.46)%,孵化率(82.1±3.85)%。不同催产剂对雄鱼精液的排出和质量影响无明显差异。试验组不同雄鱼个体的精子快速移动时间为58～115s,寿命为130～235s,精子密度为0.1×109～2.21×109个/mL。
- 朱华胡红霞董颖田照辉王巍袁丁马国庆
- 关键词：人工繁殖催产剂
- 6株芽孢杆菌的分离鉴定和生物学特性被引量：9
- 2021年
- 为了筛选适合渔用微生态制剂的益生菌,从池塘边发酵鱼肉汤中分离芽孢杆菌,结合形态学、生理生化特征、16S rRNA及gyrA、gyrB、rpoB和purH基因序列比对分析对其进行鉴定,并对其产淀粉酶、产蛋白酶能力及生长情况进行研究。结果表明,分离筛选的6株芽孢杆菌分属于4个种,1株为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),1株为阿氏芽孢杆菌(B.aryabhattai),2株为贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis),2株为解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens),6株菌在LB液体培养基中生长良好,均具有产蛋白酶能力,其中4株具有产淀粉酶能力。
- 田照辉徐绍刚董颖胡红霞王巍东天孙爱
- 关键词：芽孢杆菌生物学特性
- 西伯利亚鲟与杂交鲟苗种培育对比试验被引量：4
- 2014年
- 西伯利亚鲟是引自欧洲的鲟鱼种类，是目前世界上养殖最广泛的鲟鱼种类，施氏鲟是原产于黑龙江的鲟鱼类，是目前国内养殖范围仅次于西伯利亚鲟的种类，在长期的养殖实践中发现这两种鲟鱼都有自身的劣势，如西伯利亚鲟不耐高温而施氏鲟不耐运输，同时，国内的杂交鲟种类不断增加，一些是从国外直接引进的，一些是国内生产的，这些杂交种的养殖效果差距较大，因此本文进行了西伯利亚鲟和杂交鲟（西伯利亚鲟♀×施氏鲟♂）苗种培育的比较。
- 朱华胡红霞王巍董颖姚志刚李立成
- 关键词：苗种培育杂交鲟养殖效果鱼种类施氏鲟鲟鱼类
- 鲟鱼外周血淋巴细胞的分离及最佳体外增殖性反应条件被引量：4
- 2018年
- 以小体鲟(Acipenser ruthenus)为研究对象,应用不同浓度的淋巴细胞分离液对鲟鱼外周血淋巴细胞进行分离并探讨其增殖性反应的最佳条件。分别以植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(Con A)和脂多糖(LPS)作为淋巴细胞增殖丝裂原,采用L25(56)五因素五水平正交试验设计,用Enhanced Cell Counting Kit-8法(增强型CCK-8或WST-8)对培养时间、培养温度、细胞密度、胎牛血清浓度及丝裂原浓度等因素进行探索性研究。结果表明:70%的Percoll液(比重为1.092 g/m L)作为淋巴细胞分离液的分离效果最佳。鲟鱼最佳外周血淋巴细胞体外增殖反应条件为:3.625×10~6初始细胞量、20μg/m L的PHA或50μg/m L的Con A或10μg/m L的LPS作为丝裂原、10%-20%胎牛血清(FBS)、20-25℃培养2 d。
- 董颖胡红霞田照辉王巍东天
- 关键词：鲟鱼外周血淋巴细胞植物血凝素刀豆蛋白ACCK-8
