王晓伟
- 作品数:23 被引量:40H指数:4
- 供职机构:山东农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 实时荧光定量RT-PCR检测禽白血病病毒J亚群被引量:4
- 2010年
- 将禽白血病病毒J亚群(ALV-J)NX0101毒株接种1日龄和7日龄SPF雏鸡并设阴性对照组,采用实时荧光定量RT-PCR方法,定期检测病毒在体内的复制情况。根据GenBank发表的ALV-Jenv基因保守序列(AY897227)设计1对特异性引物扩增目的基因;根据鸡的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因序列(K01458),在保守区内设计1对引物扩增内参照基因,分别克隆入质粒作为标准品制作标准曲线,采用SYBR GreenⅠ染料建立荧光定量PCR法,并对方法的特异性、敏感性和重复性进行评价。结果显示,标准曲线的Ct值与标准品浓度的对数值之间存在线性关系;最低每个反应可检测到60个拷贝的病毒数,比常规PCR灵敏度高1 000倍。检测结果分别采用绝对定量法和相对定量法进行分析,都达到了良好的效果。通过对病毒含量变化的检测发现,在雏鸡4周龄时,2个接毒组ALV-J病毒突然呈对数式增长。据此分析ALV-J病毒在体内经过3~4周潜伏后,突然呈暴发式增长,这种情况可能和临床表现的免疫抑制直接相关。结果表明,本试验建立了一种特异性强、敏感性高、可定量分析ALV-J病毒增殖的方法,为进一步相关研究奠定了基础。
- 王峰刘青王晓伟陈洪博于琳琳王玥姜艳萍成子强
- 关键词:实时荧光定量RT-PCRALV-J
- 跨膜蛋白免疫抑制域在ALV感染中的作用研究
- 禽白血病(avian leukosis,AL)是指由反转录病毒科甲型反转录病毒属禽白血病病毒(ALV)引起的以禽类造血组织中某些细胞成分过度增生为主的一类可传染的肿瘤性疾病,可划分为A-J 10个亚群。其中J亚群禽白血病...
- 王晓伟
- 关键词:家禽养殖禽白血病跨膜蛋白免疫抑制
- 蛋鸡中出现ALV-J和ALV-B混合感染
- 2009年3月,山东某养殖户饲养160日龄海兰白商品蛋鸡发病,鸡群整体消瘦,精神沉郁,鸡冠苍白无血色,粪便稀薄。经病理学、免疫组织化学和分子生物学检测诊断为禽白血病J型和B型的混合感染。剖检观察3只鸡肝脏均弥散性肿大、呈...
- 刘功振成子强张洪海刘青邱波王峰王晓伟陈洪博
- 关键词:免疫组织化学蛋鸡分子生物学禽白血病病毒
- 文献传递
- 抗J亚群禽白血病的多克隆抗体及其制备方法
- 本发明涉及一种抗J亚群禽白血病的多克隆抗体及其制备方法,该多克隆抗体能够有效抑制J亚群禽白血病病毒的感染。所述多克隆抗体是基于禽J亚群白血病病毒gp 37基因编码的跨膜蛋白内27个氨基酸组成的高度保守序列合成小肽,通过偶...
- 成子强王晓伟张利王峰
- 文献传递
- 禽网状内皮组织增生症病毒囊膜蛋白的单克隆抗体及其制备方法
- 本发明属于分子免疫学和病毒学交叉技术领域,具体选取了禽网状内皮组织增生症病毒(REV)env基因相对保守区域共1200bp的基因片段,该片段表达的400个氨基酸包涵了REV病毒90%以上的抗原位点,这样既保留了病毒绝大部...
- 成子强王峰张利王桂花王玥于琳琳姜艳萍王晓伟陈洪博
- 文献传递
- ALV-J引起的鸡成红细胞性白血病
- 2009-2010年期间接收三批送检病例,两批麻鸡,一批蛋鸡雏鸡。病鸡均表现消瘦、精神萎靡、嗜睡、鸡冠稍苍白或发绀等。大体剖检可见肝脏、脾脏及肾脏严重肿大,表面有明显的白色肿瘤结节。血液涂片与骨髓涂片观察发现,大量细胞体...
- 姜艳萍王玥于琳琳陈洪博王峰王晓伟王桂花成子强
- 关键词:J亚群禽白血病病毒PCR检测
- 禽白血病病毒J亚群诱导蛋鸡群多种肿瘤被引量:3
- 2011年
- 2009年8月,山东泰安某海兰褐商品蛋鸡场,开产后产蛋率只有60%~70%,31周龄时,死亡率突然增加,最高达20%。患病鸡经大体剖检、病理组织学、PCR和免疫组织化学检测确诊为J亚群禽白血病。病理组织学检测发现送检鸡除了髓细胞瘤外,还存在明显的纤维肉瘤、组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤等肿瘤。纤维肉瘤单独存在,组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤分别和髓细胞瘤混合存在,本文详细描述了各肿瘤的组织学特点。ALV-J从肉种鸡传向商品蛋鸡后引起肿瘤谱扩展的原因和机制值得进一步研究。
- 陈洪博于琳琳姜艳萍王玥王峰王晓伟王桂花成子强
- 关键词:商品蛋鸡肿瘤组织病理学
- 蛋种鸡ALV-J与REV共感染病变新特点被引量:3
- 2011年
- 2009年8月,山西榆次某鸡场蛋种鸡群产蛋量急剧下降,部分鸡产蛋停止。病理组织学观察发现,病鸡肝脏、肾脏、肺脏、心肌等组织中出现小灶状淋巴细胞瘤,肿瘤细胞为成熟的淋巴细胞;聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)检测显示,被检鸡ALV-J感染率为8/8,而且7/8为病毒血症,与REV共感染率为2/8,未出现REV单感染;从发病情况看,淋巴细胞瘤均出现于共感染病例,特别是ALV-J病毒血症的共感染鸡病变最为严重,但未见ALV-J的特征性髓细胞瘤。囊膜蛋白氨基酸同源性分析显示,ALV-J毒株与英国HPRS-103原型株同源性最高(96.9%以上),共感染的REV毒株与suv-env株同源性最高(93.8%)。本病例揭示,先天传播的ALV-J引起的病毒血症状态可能为REV的致瘤创造了环境,使临床罕见的REV淋巴瘤早于髓细胞瘤出现,因此,严格种鸡群的ALV-J净化是防控此病的重中之重。对于ALV-J与REV协同的机制还需进一步研究。
- 王玥姜艳萍于琳琳王峰陈洪博王晓伟成子强
- 关键词:J亚群禽白血病病毒共感染蛋种鸡病毒血症
- 实时荧光定量逆转录PCR检测禽白血病病毒J亚群(ALV-J)
- 本文将ALV-J NX0101毒株接种1日龄和7日龄SPF雏鸡并设阴性对照组,采用实时荧光定量逆转录PCR方法,定期检测病毒在体内的复制情况。根据Genebank发表的ALV-J env基因保守序列(AY897227)设...
- 王峰刘青王晓伟陈洪博于琳琳王明姜艳萍成子强
- 关键词:ALV-J
- 文献传递
- 用于检测J亚群禽白血病病毒的斑点杂交方法
- 本发明涉及一种用于检测J亚群禽白血病病毒的斑点杂交方法。所述的核酸探针是基于J亚群禽白血病病毒囊膜env特异性基因序列,长度为248bp,位置在hprs-103原型毒株的第6736bp-6983bp之间,通过合成该目的基...
- 成子强刘功振张利王晓伟