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温和气单胞菌毒力基因的检测及其对鲫鱼致病性试验被引量：6: 2015年; 为探究温和气单胞菌菌株A.S1的致病性,采用PCR方法扩增溶血素基因(hly)、细胞兴奋性肠毒素基因(alt)、黏附素基因(aha1)和气溶素基因(aerA)4种毒力基因,并运用动物回归试验探究菌株A.S1对鲫鱼的致病性。结果表明,菌株A.S1可扩增出hly、aha1和alt 3种毒力基因,未扩增出aerA基因。动物回归试验显示,试验组鲫鱼在腹腔注射温和气单胞菌0.3mL(浓度为1.5×108 CFU/mL)后,5d内死亡率达100%。表明毒力基因型为hly+、aha1+、alt+和aerA-的菌株A.S1为高毒力菌株,且菌株的毒力基因型与致病性呈正相关。; 王海娟王利; 关键词：温和气单胞菌毒力基因

鳗弧菌flaE基因的克隆及蛋白结构分析: 2014年; [目的]:克隆鳗弧菌flaE基因并分析其蛋白结构,为研究该蛋白的生物学功能及免疫原性奠定基础。[方法]通过PCR方法对鳗弧菌flaE基因进行扩增,利用生物学软件对其序列及蛋白质结构进行分析。[结果]所得flaE基因的大小为841bp,其开放阅读框长度为798 bp,编码262个氨基酸。蛋白分子质量为28 411.4,理论等电点p I为5.70,脂肪系数为81.60,不稳定系数为31.81;为疏水性蛋白;没有信号肽和跨膜螺旋结构;保守区结构域属于flagellin家族;二级结构中以α螺旋为主,其次是无规则卷曲和β片层,少量β转角;三级结构与3k8v.1.A的结构模型相似率为90%。[结论]成功克隆了鳗弧菌flaE基因,Gen Bank登录号为KM091934。; 王海娟王利; 关键词：鳗弧菌克隆

鲤鱼杀鲑气单胞菌病的诊断和防治被引量：2: 2014年; 2013年12月成都某养殖场的鲤鱼出现病症并有少数死亡,本文从患病鱼的临床症状、病原菌的诊断及治疗过程等方面进行小结,以期为鲤鱼细菌性疾病的诊断和临床疾病的防治提供科学的参考。一、临床症状患病的鲤鱼采自成都市某养殖场,体长26厘米、体重370克。于12月上旬发病。体表严重出血,; 王海娟王利肖云; 关键词：气单胞菌病鲤鱼细菌性疾病临床疾病养殖场

一例鲈鱼感染豚鼠气单胞菌的诊治: 2014年; 鲈鱼属鲈形目，鲈亚目、河鲈科，是我国最重要的经济鱼类之一。随着养殖规模的扩大和水体污染日益严重，水产动物的细菌性疾病频繁暴发，为养殖业带来巨大的经济损失。迄今为止，对鲈鱼疾病的研究报道甚少。2013年9月成都某养殖场的鲈鱼出现病症并伴有零星死亡。本文从发病鲈鱼的症状、病原诊断和治疗措施三个方面进行总结，为鲈鱼的健康养殖提供科学的参考资料。; 王海娟王利; 关键词：豚鼠气单胞菌鲈鱼诊治经济鱼类

鱼源维氏气单胞菌的耐药性研究被引量：12: 2013年; 为检测7株鱼源维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的耐药基因和耐药表型的分布情况,试验采用PCR法检测分离株中氨基糖苷类耐药基因(aac(3)-Ⅱa、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰa和aph(3′)-Ⅱa),磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2和Sul3)和四环素类耐药基因(tetA、tetC和tetM),运用Kirby-Bauer纸片扩散法检测7株鱼源维氏气单胞菌分离株对22种常用抗生素的敏感性。结果表明,可检出耐药基因aac(3)-Ⅱa(71.4%)、aac(6′)-Ⅰb(85.7%)、Sul2(85.7%)和tet A(28.5%);未检出ant(3″)-Ⅰa、aph(3′)-Ⅱa、Sul1、Sul3、tetC和tetM基因。7株维氏气单胞菌对磷霉素(100%)、多黏霉素B(100%)、痢特灵(85.7%)、奥复星(71.4%)较敏感;对氨苄西林(100%)、乙酰螺旋霉素(100%)、复方新诺明(85.7%)、磺胺异恶唑(85.7%)、四环素(85.7%)等耐药。这说明耐药基因和耐药表型之间存在一定的相关性。; 王海娟王利苟小兰龙钟明赵静; 关键词：维氏气单胞菌耐药基因耐药表型

丁鲑鱼鳗弧菌16S rDNA基因及耐药性分析被引量：7: 2014年; 从发病丁鲑鱼体内分离出菌株SK-1,对其进行形态观察、生理生化试验、16SrDNA基因序列分析,并采用KribyBauer纸片扩散法进行耐药性分析。结果表明,菌株SK-1为革兰氏阴性菌,呈短杆状,氧化酶阳性,生理生化特性与鳗弧菌一致。获得16SrDNA序列长度为1447bp,GenBank数据库中登录号为KF978124。该菌株16SrDNA基因序列与GenBank数据库中鳗弧菌的16SrDNA基因序列相似性高达99%,系统进化树显示其与鳗弧菌亲缘关系最近,从而判定菌株SK-1为鳗弧菌。该菌株对杆菌肽与洁霉素耐药,但是对强力霉素、四环素、美满霉素等13种药物高度敏感,对链霉素、头孢曲松、甲氧苄啶等9种药物中度敏感。这为鳗弧菌的鉴定及细菌病防治提供科学依据。; 李雪峰王利王海娟赵静; 关键词：鳗弧菌耐药性

小肠结肠炎耶尔森菌对磺胺类和 β -内酰胺类抗生素的耐药性研究被引量：8: 2014年; 为了探讨12株小肠结肠炎耶尔森菌对磺胺类和β-内酰胺类抗生素的耐药性,试验采用标准K-B纸片扩散法检测该菌对磺胺类和β-内酰胺类抗生素的耐药表型,并采用PCR法检测磺胺类耐药基因(sul1、sul2、sul3基因)和β-内酰胺类耐药基因(TEM基因)。结果表明:头孢噻吩、复方新诺明和磺胺异唑治疗效果较差,耐药率分别高达58.3%、66.7%、58.3%,但先锋霉素Ⅴ抑菌效果较好,头孢菌素次之;在菌株中检测出磺胺类耐药基因sul1、sul2和β-内酰胺类耐药基因TEM,其检出率分别为91.7%、100%、75.0%,而sul3基因未检出。; 赵静王利邱翔苟小兰王海娟; 关键词：小肠结肠炎耶尔森菌磺胺类抗生素 Β-内酰胺类抗生素

江黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌的主要生物学特性研究被引量：4: 2013年; 从发病江黄颡鱼中分离出菌株YER6022,通过细菌培养、生理生化试、16SrDNA基因扩增等方法对其生物学特性进行研究.结果表明:该菌株为革兰氏阴性球杆菌,具有动力性,不发酵山梨醇,赖氨酸、苯丙氨酸阴性,尿素、鸟氨酸阳性.16SrDNA片段测序为1408bp,与小肠结肠炎耶尔森氏菌相似性达99%,GenBank登录号为JX434637.系统进化树显示菌株YER6022与耶尔森菌属的小肠结肠炎耶尔森菌亲缘关系最近.; 赵静王利邱翔苟小兰龙钟明王海娟; 关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌生物学特性江黄颡鱼

麦洼牦牛G蛋白信号转导调节因子5克隆及蛋白结构分析被引量：2: 2015年; 采用RT-PCR方法扩增并克隆麦洼牦牛G蛋白信号转导调节因子5(regulator of G protein signaling 5,RGS5)基因序列,利用ClustalX 1.83和Mega 5.0软件构建系统进化树,并选用多种生物信息学软件进行序列分析和蛋白结构预测。结果表明,所得麦洼牦牛RGS5基因长度为863bp,包含1个546bp的完整开放阅读框,编码181个氨基酸,GenBank登录号为KJ867514。系统进化树分析发现,麦洼牦牛RGS5氨基酸序列与普通牛亲缘关系最近,其次是山羊和绵羊。RGS5基因编码的蛋白质分子质量为20.94ku,理论等电点(PI)为6.35,它是一种以α-螺旋为主,不含信号肽的非跨膜、不稳定性蛋白。三级结构预测显示,麦洼牦牛与人RGS5蛋白三级结构相似性高达90.51%。以上结果为深入研究RGS蛋白功能积累科学资料。; 赵静王利李键字向东钟金城江明锋王海娟李雪峰; 关键词：麦洼牦牛克隆蛋白分析

中药复方对小肠结肠炎耶尔森菌的抑制作用及对其毒力基因ail的影响被引量：5: 2014年; 采用二倍稀释-平板法测定7种中药复方对小肠结肠炎耶尔森菌的体外抗菌活性,筛选出抑菌效果较好的复方,应用PCR方法检测复方D作用3个时间段后小肠结肠炎耶尔森菌的黏附侵袭位点基因（ail）,并用生物信息学方法对该基因的序列进行分析.结果表明,复方D（黄连、黄芩、五倍子、炙甘草）的抑菌效果最明显,最小抑菌浓度（MIC）为0.062 5 g/mL,最小杀菌浓度（MBC）为0.125 g/mL;复方B（黄芩、黄连、五倍子、厚朴）抑菌效果次之,MIC值为0.125 g/mL,MBC值为0.25 g/mL;复方F（黄连、黄芩、大黄、地榆）的抑菌作用最不明显,MIC和MBC值均大于1 g/mL.中药复方D作用小肠结肠炎耶尔森菌不同时间后其ail基因发生突变的位点相似,且都集中在10～69碱基区域,该区域相对应的氨基酸序列也相应的发生变化.; 王海娟王利苟小兰赵静; 关键词：中药复方小肠结肠炎耶尔森菌最小抑菌浓度最小杀菌浓度

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王海娟

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