王菲
- 作品数：5 被引量：23H指数：2
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究被引量：3
- 2005年
- 目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体。以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达。采用3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用。结果:构建了OX40基因的真核表达载体。经PCR、酶切和测序证实,插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40cDNA序列完全一致。用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞。3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用。OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用。结论:成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用。
- 原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳任杰苗乃法
- 关键词：OX40增殖
- OX40L基因修饰肿瘤细胞疫苗的构建及其生物学活性初步研究
- ＜正＞目的用RT-PCR法获取小鼠OX40L基因,构建OX40L真核表达载体,转染H22肝癌细胞获得表达OX40L的肿瘤细胞疫苗,并初步研究其生物学活性。方法（1）用TRIzol抽提活化脾细胞的总RNA,用RT-PCR法...
- 冯永堂王菲原江水邸大琳梁淑娟牟东珍苗乃法吴国庆魏兵
- 关键词：OX40L协同刺激信号肿瘤免疫细胞瘤苗
- 文献传递
- 利用乳糖化羧甲基壳聚糖构建小鼠OX40转基因细胞株被引量：2
- 2006年
- 目的利用乳糖化羧甲基壳聚糖(Lac-CMCS)构建小鼠OX40转基因细胞株,探讨Lac-CMCS在HepG2细胞定向转染中的可行性。方法从Con A活化的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR方法,扩增获得编码小鼠OX40分子的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体,测序证实后构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体,利用Lac-CMCS与载体偶联靶向性转染HepG2细胞,G418筛选,RT-PCR法鉴定获得表达OX40分子的阳性细胞株。结果pUCm-T-OX40和pIRES2-EGFP-OX40经PCR、酶切和测序分析,证实插入的目的片段与GenBank记载的小鼠OX40 cDNA序列完全一致。利用Lac-CMCS能将小鼠OX40靶向转染HepG2细胞并获得表达;经G418筛选后获得稳定表达小鼠OX40的细胞株。结论利用Lac-CMCS能够成功将OX40靶向转染入HepG2细胞中。
- 原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳任杰苗乃法
- 关键词：OX40
- TLR家族分子信号转导新进展被引量：18
- 2005年
- TLR(Toll-like recepter)家族成员以胞内区高度进化保守的TIR结构域(Toll/IL-1R domain)为特征,可通过胞外区的亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)功能区识别各种病原体相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP)引发机体免疫应答。TLR识别配体后由MyD88、Mal、TRIF、TRAM等含TIR的接头蛋白介导,通过MyD88依赖途径或MyD88非依赖途径进行信号转导,不同的接头蛋白决定了不同TLR的信号转导途径,本文针对各含TIR的接头蛋白对TLR信号转导通路研究进展作一综述。
- 王菲冯永堂
- 关键词：TLRTIR接头蛋白信号转导
- 小鼠OX40真核表达载体的构建及表达
- 2006年
- 目的构建小鼠OX40的真核表达载体。方法从ConA活化的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR方法,扩增获得编码小鼠OX40分子的cDNA,并将其克隆到PUCm-T载体,经PCR、酶切和测序分析证实,进而脂质体法转染HUVECS,G418筛选,RT-PCR法鉴定获得表达OX40分子的阳性细胞株。结果构建的pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体经PCR、酶切和测序分析,证实该片段与GeneBank记载的小鼠OX40cDNA序列完全一致。筛选获得能表达小鼠OX40蛋白的HUVECs转基因细胞。结论成功构建小鼠OX40转基因细胞,该克隆细胞为进一步研究OX40分子的功能奠定了基础。
- 原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳苗乃法
- 关键词：OX40
