王隆飞 作品数:6 被引量:15 H指数:3 供职机构: 南开大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 农业科学 更多>>
产人胰岛素毕赤酵母工程菌的构建 被引量:3 2006年 根据人胰岛素的氨基酸序列和酵母偏爱的密码子,采用基因半合成技术合成人胰岛素基因.将合成的胰岛素基因克隆到pP IK 9质粒,构建了毕赤(P ich ia)酵母重组表达载体pP IN S319,用B g lⅡ线性化后用电转化法导入毕赤酵母G S ll5菌株,经过营养筛选和PCR复筛,得到含人胰岛素基因的毕赤酵母工程菌株.经SDS-PAGR和密度扫描分析表明,合成的人胰岛素基因能够在毕赤酵母中高效分泌性表达,表达量可达0.563 m g/mL,表达产物无需转肽过程,只经过胰蛋白酶和羧肽酶B简单处理即得到优质重组人胰岛素,其体内活力约为30 IU/m g. 王隆飞 方园园 陈功 博涛 侯健华 杨少辉 李桂兰 李欣 李明刚关键词:人胰岛素基因 毕赤酵母 分泌性表达 缺磷条件下番茄和羽扇豆分泌应答机制与磷需求的比较(英文) 被引量:2 2001年 对番茄和羽扇豆在不同磷浓度水培中的应答机制作了系统分析 .结果表明 ,在低磷条件下羽扇豆和番茄根系有机酸、酸性磷酸酶和植酸酶分泌量均有所增加 .但下列表现差异明显 :①羽扇豆根系酸性磷酸酶分泌量明显高于番茄 ,而植酸酶分泌量则趋势相反 .②羽扇豆根系有机酸的分泌增高量显著高于番茄 .③番茄诱发应答反应的介质磷浓度显著比羽扇豆高 (前者约为 30 0 μmol/L ,而后者为 10 μmol/L)④番茄诱导应答反应时的内部磷含量(PTPC)亦比羽扇豆高 (前者为 4.2mgP·g-1,后者为 1.5mgP·g-1) .以上结果显示 ,在正常生长过程中番茄对磷的需求量明显高于羽扇豆 ,可能是导致其对磷缺乏适应能力低下的重要因素 .同时缺磷条件下根系诱导分泌酸性磷酸酶、植酸酶和有机酸可能是植物获取磷酸盐 。 李明刚 祝建洪 孙健 李桂兰 王隆飞 陈功 但野利秋关键词:磷缺乏 酸性磷酸酶 分泌 番茄 羽扇豆 植酸酶分泌型酵母工程菌的构建(英文) 被引量:4 2002年 通过逆转录 PCR从无花果曲霉总 RNA中扩增出 1 .4 -kb带信号肽的植酸酶基因 ,将其克隆到穿梭表达载体 p YES2 ,构建了含有目的基因的重组质粒 p YPA1 .用 p YPA1转化酿酒酵母 INVSc1菌株 ,成功地构建了能分泌活性植酸酶的工程菌株 .该菌株的成功构建为饲料和食品添加剂以及解磷工程菌肥的开发奠定了基础 . 祝建洪 孙建 陈珈 李桂兰 吴卓伟 王隆飞 陈功 Marc G Fortin 李明刚关键词:工程菌 植酸酶 酿酒酵母 基因克隆 基因表达 重组质粒 重组人胰岛素在甲醇中表达的初步研究 开发生产胰岛素的新途径、优化现有生产胰岛素基因并通过转基因技术构建具有高效分泌胰岛素能力的甲醇酵母工程菌株,并为人胰岛素在植物中表达的研究奠定基础. 王隆飞关键词:人胰岛素 毕赤酵母 基因 转基因技术 文献传递 冬虫夏草蛋白质组学的初步研究 姜洪洲 李桂兰 靳朝霞 祝建宏 孙健 王隆飞 陈功 李明刚 针对冬虫夏草和其无性菌丝体的总蛋白质组进行提取、分离和比较,建立其蛋白质组指纹图谱,确定在天然虫草中存在而人工培养的虫草菌丝体中不具有的蛋白质,为今后药理研究和药效分析奠定基础。本研究以野生藏草和虫草菌中国被毛孢菌丝体为...关键词:关键词:冬虫夏草 蛋白质 指纹图谱