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羊驼皮肤中可溶性鸟苷酸环化酶的表达差异: 2013年; 采用免疫组织化学、实时荧光定量PCR和Western blotting对可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)在棕色和白色羊驼皮肤中的表达差异进行了研究,以探讨sGC在羊驼皮肤中的作用。实时荧光定量PCR结果显示,sGC在棕色羊驼皮肤中的相对表达量较低,是其在白色羊驼皮肤中的表达量的0.16倍,且差异极显著(P<0.01);Western blot-ting结果显示,在羊驼皮肤总蛋白中含有与兔多克隆抗体发生免疫阳性反应的条带,在棕色皮肤中的反应阳性弱于白色皮肤,且差异极显著(P<0.01);免疫组织化学结果表明,sGC免疫阳性主要分布在白色羊驼皮肤毛囊的毛球上方细胞及细胞间质,而在棕色羊驼皮肤毛囊中,sGC免疫阳性主要分布在毛球底部和外根鞘细胞及细胞间质。结果提示sGC参与羊驼毛色形成。; 张俊珍范瑞文杨姗姗石占全姬凯元董常生; 关键词：可溶性鸟苷酸环化酶皮肤 CAMP 羊驼

TGFβ3对体外培养的羊驼黑色素细胞表型的影响: 为了研究转化生长因子β3 (transforming growth factor beta3,TGFβ3)对体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞表型的影响.本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中添加不同浓度TGFβ3 (50ng...; 刘彧姬凯元石占全杨姗姗范瑞文董常生; 关键词：TGFΒ3 细胞表型黑色素黑色素细胞羊驼

lpa-miR-nov-66调控羊驼黑色素细胞CDK5磷酸化作用的研究: 2016年; 旨在研究lpa-miR-nov-66在调控羊驼黑色素细胞产生黑色素颗粒过程中对细胞周期依赖性激酶5(CDK5)磷酸化作用的影响。在体外培养的黑色素细胞中转染lpa-miR-nov-66后,采用实时定量PCR、免疫细胞化学、Western blotting、免疫共沉淀等方法检测功能性CDK5作用。结果显示:与阴性对照相比,黑色素细胞被转染lpa-miR-nov-66后,CDK5基因和蛋白表达量均下降,差异极显著(P<0.01);CDK5激活子是P35,CDK5磷酸化水平及其磷酸化底物——酪氨酸羟化酶(TH)的表达量均被上调,分别呈差异极显著(P<0.01)和差异显著(P<0.05)。结果表明:lpa-miR-nov-66过量表达可通过CDK5的激活子P35上调黑色素细胞CDK5发生磷酸化。该功能性CDK5激酶对底物TH发生磷酸化,是lpa-miR-nov-66调控黑色素生成分子机制的中间环节。; 张俊珍姬凯元石占全刘彧胡帅鹏范瑞文; 关键词：黑色素细胞

绵羊皮肤鸟苷酸环化酶完整CDS区结构域分析: 2015年; 用RT-PCR法获得了绵羊皮肤的鸟苷酸环化酶完整CDS区,其长度为1 860 bp,与其他哺乳动物相比,高度保守。通过对其结构域分析,发现绵羊鸟氨酸环化酶(GC)编码区存在环化酶同源性结构域(CHD)、血红素一氧化氮结合位点(HNOB)和相关血红素一氧化氮结合位点(HNOBA),这些结构域分别发挥其催化功能以及在细胞内转导下游信号的功能。; 杨姗姗姬凯元石占全焦丁兴白俊明范瑞文董常生; 关键词：鸟苷酸环化酶皮肤结构域绵羊

lpa-miR-nov-66通过调控cAMP路径抑制α-MSH介导的羊驼黑色素生成: α-MSH和lpa-miR-nov-66在羊驼黑色素细胞产生黑色素过程中均起重要的调控作用,但二者之间的关系尚未报道.本研究在体外培养的羊驼黑色素细胞中通过转染lpa-miR-nov-66和添加α-MSH处理,用实时定量...; 姬凯元石占全刘彧杨姗姗胡帅鹏张俊珍范瑞文; 关键词：Α-MSH 黑色素细胞; 文献传递

干扰羊驼黑色素细胞CDK5基因表达的siRNA及其表达质粒和应用: 本发明公开了一种干扰羊驼黑色素细胞CDK5基因表达的siRNA，具有Seq ID No.1和Seq ID No.2所示的正义链和反义链序列，以及构建了干扰羊驼黑色素细胞CDK5基因表达的pENTR/U6 shRNA表达质...; 张俊珍董常生范瑞文杨珊珊姬凯元石占全刘彧胡帅鹏刘学贤; 文献传递

干扰羊驼黑色素细胞CDK5基因表达的siRNA及其表达质粒和应用: 本发明公开了一种干扰羊驼黑色素细胞CDK5基因表达的siRNA，具有Seq ID No.1和Seq ID No.2所示的正义链和反义链序列，以及构建了干扰羊驼黑色素细胞CDK5基因表达的pENTR/U6 shRNA表达质...; 范瑞文董常生张俊珍杨珊珊姬凯元石占全刘彧胡帅鹏刘学贤; 文献传递

小鼠黑色素细胞体外分离培养及生物学特性研究: 黑色素细胞所合成色素的种类、数量及分布与被毛颜色密切相关,本试验对小鼠黑色素细胞进行体外分离培养并研究其生物学特性,筛选出研究基因功能的理想材料。试验及结果如下：1.用0.25%Dispase酶Ⅱ和0.25%胰酶/0.0...; 石占全; 关键词：小鼠黑色素细胞黑色素 MITF; 文献传递

lpa-miR-nov-66通过调控cAMP路径抑制α-MSH介导的羊驼黑色素生成被引量：4: 2015年; α-黑素细胞刺激素(α-MSH)和lpa-miR-nov-66在羊驼黑色素细胞产生黑色素过程中均起重要的调控作用,但二者之间的关系尚未报道.本研究在体外培养的羊驼黑色素细胞中通过转染lpamiR-nov-66和添加α-MSH处理,用实时定量PCR和Western印迹检测黑色素细胞内基因表达水平,ELISA法检测c AMP和cGMP的产量,RTCA实时无标记细胞功能分析黑色素细胞增殖以及紫外分光光度法检测黑色素产量,证实二者在调控羊驼黑色素细胞产生黑色素颗粒过程中的关系.结果显示,与单纯α-MSH处理相比,lpa-miR-nov-66转染结合α-MSH处理组中,小眼转录因子(MITF)和酪氨酸酶(TYR)在转录水平和翻译水平的表达均降低,而酪氨酸酶相关蛋白2(TYRP2)在转录和翻译水平的表达均升高;cGMP的产量升高,cAMP的产量下降;黑色素细胞增殖没有显著变化;黑色素细胞内黑色素产量下降.与单纯转染lpa-miR-nov-66相比,lpa-miR-nov-66转染结合α-MSH处理组中,MITF、TYR和TYRP2在转录水平和翻译水平的表达均升高;cGMP的产量下降,cAMP的产量升高;黑色素细胞增殖没有显著变化;黑色素细胞内黑色素产量升高.上述结果证明,lpa-miR-nov-66通过调控羊驼黑色素细胞中毛色形成的c AMP路径,抑制α-MSH对黑色素细胞产生黑色素的促进作用.; 姬凯元石占全刘彧杨姗姗胡帅鹏张俊珍范瑞文; 关键词：黑色素细胞

TGF-β3对体外培养的羊驼黑色素细胞的影响被引量：3: 2015年; 为了研究转化生长因子β3(Transforming growth factor beta3,TGF-β3)对体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞表型的影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中添加不同浓度TGF-β3(6.25、12.5、25、50ng·mL-1),通过实时监测和检测细胞增殖、毛色相关基因小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia—associtated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)和酪氨酸酶相关蛋白2(Tyrosinase related protein 2,TYRP2)表达以及黑色素产量的变化。结果表明:(1)在羊驼皮肤黑色素细胞中添加50ng·mL-1浓度的TGF-β3后,在前30h内对细胞增殖有抑制效果,30h后对细胞增殖有明显的长时程维持细胞数量作用,但对TGF-β3添加的剂量没有依赖性;(2)添加TGF-β3后,黑色素细胞内MITF、TYR和TYRP2的表达量均被下调,而且黑色素细胞产生黑色素的量也被下调,主要以添加50ng·mL-1时下调最为显著。结果揭示,TGF-β3通过对羊驼黑色素细胞内MITF、TYR和TYRP2的表达的影响,并调控黑色素的产生,对黑色素细胞的生物学功能具有重要的影响。; 刘彧石占全姬凯元杨姗姗范瑞文; 关键词：转化生长因子Β3 黑色素黑色素细胞羊驼

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石占全

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