肖桂凤 作品数:17 被引量:42 H指数:4 供职机构: 浙江大学医学院 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 浙江省教育厅科研计划 浙江省科技厅公益性技术应用研究(分析测试)计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
倒置激光共聚焦显微镜的共享使用与维护 被引量:5 2015年 为给科研人员和仪器管理者提供系统、直观的激光共聚焦显微镜的使用与维护方法,介绍了Olympus倒置激光共聚焦显微镜与活细胞工作站(IX81-FV1000)的配置、软硬件组成和技术参数,样品制备要求,单光子、活细胞图像采集常用操作规程,共享成效、日常维护和管理等方面。浙江大学医学院公共技术平台的倒置激光共聚焦显微镜实行开放共享,近三年来使用率高,共享效果好。根据仪器使用经验总结出了一些获得高分辨率图像的方法,供大家探讨。 尹伟 肖桂凤 刘双双 吴航军 孙启才关键词:共聚焦显微镜 研究生大型仪器操作能力培养的探索和实践 2022年 文章以浙江大学医学院公共技术平台为例,从制度建设和组织保障、综合培养体系建设等方面阐述如何推动和实施研究生的大型仪器操作能力培养,如何实现共享平台大型仪器的高效利用和研究生培养的有机结合。实践表明,提升研究生的大型仪器操作能力,不仅显著提高大型仪器的使用效率和开放共享水平,而且助推研究生高水平科研产出,促进科研高水平和高质量发展。 方三华 杨丹 刘丽 黄莹莹 刘双双 肖桂凤细胞大型内吞囊泡快速标记方法的改进和应用 2018年 为了研究细胞内大型内吞囊泡的快速动态变化,本文借鉴了诱导神经元轴突诱导转向的方法,通过脉冲压力从微电极释放诱导因子,在细胞周围形成稳定的浓度梯度,诱导细胞产生胞饮泡,并通过局部染料释放进行快速标记和洗脱。同时利用活细胞成像技术,对胞饮泡标记过程以及标记后胞饮泡动态变化进行实时记录。该方法大大缩短了标记和洗脱的时间,从而实现了对细胞囊泡的快速标记和同步观察记录,可用于胞饮泡、溶酶体等细胞囊泡的动态标记和观察,是研究细胞大型内吞囊泡动态变化的一种实用且高效的手段。 戎叶 杜仲燕 肖桂凤 娄绘芳 吴航军关键词:溶酶体 活细胞成像 利用多模式培训提高大型仪器使用效益的探索 被引量:21 2020年 大型仪器在高校实验教学以及科研测试服务中发挥着重要的作用。强化培训与服务是提高仪器使用效率的有效方法。针对目前医学院公共技术平台中大型仪器培训中存在的问题,对培训工作进行了多模式的探索,建立了分类培训、传统现场培训与线上视频培训相结合及统一开放培训与定制专场培训相结合等方法,优化了相关培训管理制度。实践表明,这些措施使仪器培训高效可行,培训成效显著,有利于充分挖掘大型仪器的最大使用潜能,发挥最大使用效益,促进科研发展。 黄莹莹 杨晨 丁巧灵 马骋 黄琼 肖桂凤关键词:大型仪器 构建一流公共仪器平台的关键与对策 被引量:8 2015年 构建大型仪器设备共享平台是当前各高校提高仪器设备使用率的主流趋势,也是确保教学和科研工作的重要物质保障。医学院结合公共技术平台近3年来仪器共享管理工作的探索与实践,就有效管理组织和机构、信息化开放预约管理系统、开展培训工作、实验队伍建设等,对构建一流大型公共仪器平台的关键环节进行了分析和探讨。并针对存在的问题,从争取稳定的投入资金及项目支持、完善效益评价体系、加强高层次人才队伍建设、加强大型仪器设备维修管理等方面提出了发展建议,对全国公共技术平台的建设可供参考。 尹伟 肖桂凤 刘双双 周小峰 赵月琴关键词:共享平台 利用双光子显微镜检测活体动物脑内Ca^(2+)动态变化 被引量:3 2014年 利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,观察脑内Ca2+分布,建立测量活体动物脑内Ca2+动态变化的实验方法。制作活体动物颅骨开窗样本,脑内负载Ca2+标记物Oregon Green 488 BAPTA-1和星型胶质细胞标记物Sulforhodamine 101,利用双光子显微镜分别检测神经元和星型胶质细胞内Ca2+分布和动作电位引起的Ca2+瞬变。结果显示双光子显微镜可探测到脑内250μm处荧光信号,图像清晰且信噪比高,并能实时检测神经元和星型胶质细胞内Ca2+信号的动态变化。活体脑内Ca2+检测技术平台的建立为基础研究和医药应用提供了在体实验依据。 刘双双 廖美华 尹伟 林赵肖楠 肖桂凤关键词:星型胶质细胞 双光子显微镜检测活体小鼠脑内微循环技术的建立 被引量:4 2015年 目的:利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,观察活体小鼠脑内血管的三维立体分布,建立测量单根毛细血管血流速度的新方法。方法:麻醉小鼠,制作活体小鼠颅骨开窗样本,尾静脉注射血浆标记物Texas-Red dextran,利用双光子显微镜z序列扫描检测脑内微循环系统的三维分布;利用线扫描测量毛细血管的血流速度。结果:通过双光子显微镜可以探测到脑内500μm处的血管分布和走向,图像清晰且信噪比高;通过计算单位时间内红细胞的运动距离测得毛细血管(直径≤6μm)的血流速度为(0.59±0.12)mm/s。结论:利用双光子显微镜观察脑内微循环系统技术平台初步建立,为基础研究和医药应用提供了在体实验依据。 刘双双 黄继云 肖桂凤 尹伟 林赵肖楠 卢应梅关键词:大脑皮层 微循环 血流速度 基于双光子显微镜技术的脑微血栓动物模型的建立与评价 被引量:5 2018年 利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,构建脑深部微血管血栓动物模型。麻醉小鼠,制作活体小鼠颅骨开窗样本,尾静脉注射血浆标记物fluorescein isothiocyanate-dextran(FITC-dextran),通过z序列扫描检测脑内血管系统的三维分布;通过飞秒激光定点照射脑内目标血管建立微血栓动物模型;利用线扫描测量目标血管形成血栓后的血流速度,评价微血栓形成的效果。通过双光子显微镜可以探测到脑内500μm处的血管分布和走向,图像清晰且信噪比高;通过光刺激能够在脑内形成稳定的微血栓;微血栓形成后血流速度明显变慢。利用双光子显微镜诱导微血栓技术初步建立,为基础研究和医药应用提供了微血栓动物模型。 刘双双 尹伟 肖桂凤 宣君丽关键词:微血管 血栓 血流速度 基于LSCM的线扫描方向识别方法的建立与应用 2021年 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)具有高分辨率和高光学切片的成像能力,是生命科学研究不可或缺的工具。通常采用的XY或者XYZ扫描方式成像速度慢,限制了生物研究中快速现象的追踪。本文介绍了实时快速成像的XT线扫描模式,并建立线扫描方向的识别方法。制作荧光小球样本,经过荧光小球划出不同方向的线段,使线段的一端接近荧光小球的中心而另一端远离,对线段进行XT线扫描,根据荧光信号与两端距离的远近判断扫描方向。阐述了XT线扫描在Zeiss、Nikon和Olympus共聚焦显微镜中的具体操作方法,并比较了其线扫描方向的差异。本研究建立了一套确定线扫描方向的实用方法,该方法简便易操作,具有普遍适用性,可为显微成像从业者和研究者提供借鉴。 刘双双 肖桂凤 洪晓黎 沈逸关键词:激光扫描共聚焦显微镜 线扫描 全内反射荧光显微术在G蛋白偶联受体研究中的应用 2023年 G蛋白偶联受体是最大的细胞膜受体超家族,是许多临床治疗药物的靶点。放射性配体结合、酶联免疫吸附和免疫共沉淀是研究它们结构和功能的主要技术,但这些属于群体平均(ensemble average)研究,无法得到单个分子图像和动态变化。全内反射荧光显微镜利用隐逝波激发临界面下200 nm范围内荧光物质成像,具有信噪比高、Z轴分辨率高、速度快和对生物样本损伤小等优点,是常用的单分子荧光成像技术。本文在介绍全内反射荧光显微镜发展历史、原理、组成和成像优势的基础上,详细阐述全内反射荧光显微镜在研究G蛋白偶联受体构象变化、寡聚化、内吞和再循环以及信号转导等方面的应用,并提出未来展望。 方三华 杨丹 刘丽 肖桂凤关键词:荧光显微镜 G蛋白偶联受体