谢天宏
- 作品数：83 被引量：161H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省重点新产品开发计划云南省自然科学基金云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- EV-A71灭活疫苗长期稳定性考察及结果分析被引量：4
- 2017年
- 目的考察肠道病毒A组71型(EV-A71)灭活疫苗的长期稳定性。方法对中国医学科学院医学生物学研究所生产的,在2~8℃条件下保存54个月的Ⅲ期临床样品,进行全面检定以分析各质量指标的变化;用原倍疫苗样品以0、28d两剂腹腔免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行疫苗效力单位(EU)测定;用2倍系列稀释法稀释疫苗,取不同稀释度样品免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行半数有效量ED50测定。结果该样品在2~8℃保存54个月,所有指标均在质量标准的合格要求范围内,仅pH值7.4接近标准上限;抗原含量为180 U/ml,与原检测值相比,下降仅9.1%;半数有效量(ED50)为6.29U,与原检测结果4.90U保持了良好一致;疫苗初次免疫小鼠后28d抗体阳转率为100%,中和抗体效价为1∶16~1∶256,GMT值为1∶52,EU值为6.5;加强免疫后第7天,中和抗体效价为1∶1 024~1∶4 096,几何平均滴度GMT大幅度上升至1∶1 552.1,其EU值为194.0;疫苗样品稀释至45 U/ml的抗原量,仍能使免疫小鼠产生100%的抗体阳转,且GMT值达1∶27.9。结论 EV-A71灭活疫苗于2~8℃条件下保存54个月,其质量指标无明显变化。
- 何鑫谢天宏洪超李华宋霞罗芳宇王微岳磊杨婷熊增平谢忠平
- 关键词：疫苗免疫原性手足口病
- 一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用
- 本发明提供了一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用，本发明使用慢病毒技术，在非洲绿猴肾细胞（Vero）中过表达人KREMEN1基因，构建了稳定表达人源KREMEN1（hKREMEN1）受体的新型Vero...
- 岳磊谢忠平李华谢天宏杨婷向虹王杰高微捷严敏
- 重组人IL- 18的高效表达、纯化及诱导KG—1细胞产生高水平IFN-γ
- 2002年
- 目的 研究IL－18在大肠杆菌中高效表达及纯化工艺，并诱导KG－1 细胞产生IFN－γ。 方法利用RT－nPCR从正常人胎肝组织中扩增获得人IL－18基因，克隆于pThiohisA载体，转化宿主菌BL－21，1mmol/LIPTG；诱导，表达产物以包涵体形式存在，经2％Triton X－100洗涤，在 8mol/L尿素下变性阴离子柱层析，透析复性后再经凝胶过滤纯化，通过纯化产物诱导入骨髓瘤单核细胞 KG－l（ATCC CCL－246）产生 IFN－γ，并检测其生物学活性。结果 获得了在大肠杆菌中的稳定高效表达，表达的目的蛋白占菌体总蛋白的25％左右，纯化后纯度可达95％以上，具有显著的刺激细胞产生IFN－γ的活性。结论 制备具有生物学活性高纯度的rhIL－18方法的建立，为基础研究与临床应用开发奠定了基础。
- 冮宏映马雁冰谢天宏刘勇杜瑞娟戴长柏孙茂盛
- 关键词：IFN-Γ纯化
- 表达戊型肝炎病毒ORF2蛋白的重组腺病毒构建及其经粘膜途径免疫小鼠被引量：4
- 2003年
- 目的构建可表达戊型肝炎病毒(hepatitisEvirus,HEV)ORF2蛋白(112-660aa)的重组腺病毒Adasy-EORF2,探讨其经鼻腔和腹腔免疫小鼠后,诱导机体产生特异性体液免疫和粘膜免疫应答的能力,为研制戊型肝炎疫苗探索新的途径。方法经PCR扩增编码ORF2蛋白(112-660aa)的基因片段,将其连接于重组腺病毒Adasy系统的穿梭质粒pTrack-CMV上,与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化宿主菌BJ5183,经细菌内同源重组获得重组腺病毒基因组质粒,转染293细胞以产生、扩增重组腺病毒。将重组腺病毒以107pfu的剂量经鼻腔和腹腔免疫小鼠,通过ELISA检测血液IgG和粘膜IgA的应答情况。结果重组腺病毒经鼻腔免疫小鼠后可刺激机体产生特异性IgA、IgG免疫应答,IgG最高滴度达1∶1000。经腹腔免疫可刺激小鼠产生IgG免疫应答,最高滴度可达1∶10000,未检测到明显的IgA应答。结论表达HEVORF2蛋白的重组腺病毒能刺激机体产生有效的免疫应答,具有成为新型戊型肝炎疫苗的潜力。
- 董雪胡金勇谢天宏孙茂盛戴长柏马雁冰
- 关键词：重组腺病毒戊型肝炎病毒疫苗
- 人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素－6融合蛋白及构建方法
- 本发明是人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-6融合蛋白及构建方法。融合蛋白为：GM-CSF(9-127)-IL-6(29-184)，GM-CSF(9-127)-IL-6(1-184)GM-CSF(1-127)-I...
- 孙强明戴长柏徐维明孙茂盛李亮助李鸿钊刘红岩谢天宏
- 文献传递
- 轮状病毒灭活疫苗的稳定性评价被引量：2
- 2013年
- 目的:评价轮状病毒灭活疫苗的稳定性。方法:将4批轮状病毒灭活疫苗在4℃保存12个月或37℃保存4周,在保存的不同时间分别进行外观检查、鉴别试验、pH值和轮状病毒抗原含量测定;同时,免疫Balb/c小鼠,检测保存不同时间轮状病毒灭活疫苗诱发血清中和抗体的水平。结果:轮状病毒灭活疫苗在4℃保存12个月或37℃保存4周,外观检查和鉴别试验未见异常,pH值和轮状病毒抗原含量保持相对稳定,保存不同时间轮状病毒灭活疫苗免疫小鼠血清中和抗体水平与保存前无明显差异。结论:轮状病毒灭活疫苗在4℃保存12个月或37℃保存4周稳定性良好。
- 张标佟琳易山谢天宏张光明李鸿钧孙茂盛陈东
- 关键词：轮状病毒灭活疫苗稳定性中和抗体
- 甲/戊型肝炎重组抗原的表达、纯化及与传统甲肝疫苗免疫原性的比较被引量：1
- 2010年
- 目的比较基因工程重组抗原与传统疫苗的免疫原性;探讨同一载体表达不同抗原的能力和抗原间的相互作用。方法将编码甲型肝炎病毒Vp1aa24-171和戊型肝炎病毒ORF2aa431-615的重组表达质粒pBV220-EAAg342及pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL-21,筛选出高效表达的菌种进行目的蛋白的表达。用DEAE-sepharose FF和CM-sepharoseFF离子层析交换柱纯化表达重组蛋白,采用SDS-PAGE、Western blotting方法进行分析鉴定。用纯化的重组蛋白及传统甲肝疫苗灭活疫苗与减毒活疫苗免疫小鼠,比较特异性抗体的产生水平。结果表达的重组蛋白相对分子质量约为36000,表达量约占菌体总量的25%;且重组嵌合抗原EAAg342可以形成直径10～20nm的类病毒(virus-like particles,VLP)颗粒。Western blotting证实2种重组蛋白均能分别与甲型肝炎和戊型肝炎患者阳性血清发生特异性反应。免疫小鼠后可诱导产生高滴度的抗戊肝特异性抗体;而抗甲肝特异性抗体水平与传统甲肝疫苗相比较低。结论使用原核系统表达的甲/戊肝重组抗原能够高效表达,2种不同的融合蛋白均分别具有良好的抗原性和免疫原性,具有开发双价疫苗及同时诊断甲型戊型肝炎试剂盒的前景。
- 庞媛玉李鸿钧奎翔谢天宏张光明孙茂盛
- 关键词：甲型肝炎病毒戊型肝炎病毒免疫原性
- CA16疫苗候选株特异性免疫血清保护性的初步评价被引量：1
- 2016年
- 目的评价CA16 K168/8疫苗候选株免疫血清对不同CA16毒株的交叉中和能力及对致乳鼠麻痹CA16临床分离株的体内中和保护能力。方法将CA16 K168/8疫苗候选株病毒纯化液辅以弗氏佐剂经背部及侧腹部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,制备高效价免疫血清。采用微量细胞病变法检测中和抗体效价;用中和抗体效价终浓度为32 U的特异性免疫血清对18株不同CA16临床分离毒株及15株EV71毒株进行交叉中和指数检测;选取中和抗体效价为16、32、64、128、256 U的特异性免疫血清对可致乳鼠产生明显麻痹作用的CA16 FY-18株进行体内中和保护水平检测。结果获得的兔抗CA16 K168/8血清对14株CA16毒株的中和效价为1∶1 024~1∶6 144,GMT值为1∶3 153;可于体外完全中和18株不同CA16毒株,中和指数为100~5 623.4,平均值为794.1,而对15株EV71临床分离株中和指数仅为0.32~5.62,平均值为2.2;体内中和保护水平随抗体效价升高而增加,呈量-效关系,当中和抗体效价达128 U时,可完全保护乳鼠不发生临床麻痹反应。结论 CA16 K168/8疫苗候选株特异性免疫血清体内、外试验结果表明其具有良好的免疫保护性。
- 谢忠平李华杨水芝谢天宏杨婷刘正玲岳磊宋霞
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型免疫血清
- 抗猴SV40病毒感染灭活疫苗及制备方法
- 抗猴SV40病毒感染灭活疫苗及制备方法，属于动物疫苗。本发明目的是对SV40病毒进行增殖、灭活、纯化，并制备抗猴SV40病毒感染灭活疫苗。本发明疫苗为β-丙内脂灭活的SV40病毒及佐剂，两者体积比为2∶1～3∶2，缓冲液...
- 孙茂盛李鸿钧和占龙张光明谢天宏曹增孙雯佳孙强明唐永明蒋鸿超
- 文献传递
- 一株可适用于人用疫苗细胞基质培养的柯萨奇病毒A组10型疫苗株及其应用
- 本发明提供了一株可适用于人用疫苗细胞基质培养的柯萨奇病毒A组10型疫苗株及其应用，属于生物制品技术领域。本发明基于全病毒疫苗的开发策略，获得一株YNKG1‑7病毒株可适应到人用疫苗细胞基质Vero上，并且具备良好的遗传稳...
- 谢忠平杨婷高微捷赵红岳磊李华谢天宏
