邵敏锋
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响的研究
- 目的：研究RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力下成骨细胞增殖和分化的影响.方法：对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后,进行流体剪切力加载或不加载.分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增...
- 徐亚娟邵敏锋向映辉李友瑞张艺平付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- siRNA沉默小鼠原代成骨细胞LIMK2基因的实验研究
- 2010年
- 目的探讨采用RNA干扰抑制原代成骨细胞中LIMK2的表达及其抑制效率,为进一步研究LIMK2基因的作用奠定基础。方法针对小鼠LIMK2基因,化学合成3条siRNA,分别编号为R1、R2、R3,用脂质体分别介导转染到小鼠原代成骨细胞中,转染后24、48h提取细胞的总RNA和总蛋白,分别进行RT-PCR和Western blot检测,研究3条siRNA在不同时间点对LIMK2基因的抑制效率。结果RT-PCR结果显示编号为R3的siRNA对LIMK2mRNA表达的抑制效率最高,两组应用R3siRNA后的LIMK2 mRNA表达量分别为对照组的19.30%(转染后24h)、18.63%(转染后48h);Westernblot检测显示编码为R3的siRNA对LIMK2蛋白表达的抑制效果最明显,两组应用R3siRNA的LIMK2蛋白表达量分别仅为空白对照组的1.32%(转染后24h)、1.19%(转染后48h)。结论编号为R3的siRNA可以很好地抑制小鼠原代成骨细胞的LIMK2表达。
- 李友瑞覃峰张艺平邵敏锋陈睿沈韵付强
- 关键词：RNA干扰成骨细胞
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响研究被引量：5
- 2011年
- 目的探讨RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力(FSS)下成骨细胞增殖和分化的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰两种处理后,进行FSS加载或不加载。分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增殖、检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、采用流式细胞仪检测细胞周期,并进行统计分析。结果在无FSS加载条件下,单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建,并不能促进成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(3.600±0.447)%与(3.420±0.217)%,t=-0.810,P>0.05]、成骨细胞增殖性能(0.208±0.724与0.211±0.044,t=0.251,P>0.05)及ALP活性(0.095±0.001与0.090±0.020,t=-1.857,P>0.05)增高;FSS能使成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(11.110±3.840)%>(3.420±0.217)%,t=-4.460,P<0.05]、成骨细胞的增殖性能(0.336±0.029>0.211±0.044,t=-13.878,P<0.05)及ALP的活性(0.110±0.010>0.090±0.012,t=-7.937,P<0.05)增高;RNA干扰处理可显著提高FSS下的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(25.140±3.329)%>(3.600±0.447)%,t=-14.339,P<0.05]、成骨细胞增殖性能(0.480±0.953>0.208±0.724,t=-13.454,P<0.05)及ALP活性(0.140±0.006>0.095±0.001,t=-7.384,P<0.05)。抑制细胞骨架改建与FSS作用两因素对提高成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比(F=240.125,P<0.05)、成骨细胞增殖性能(F=44.550,P<0.05)及ALP活性(F=13.798,P<0.05)存在正交互作用。结论采用RNA干扰抑制细胞骨架改建,可以促进FSS作用下成骨细胞的增殖和分化。
- 邵敏锋徐亚娟向映辉李友瑞张艺平陈睿付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响的研究
- 付强张艺平徐亚娟李友瑞邵敏锋
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 丝切蛋白在成骨细胞细胞骨架改建中的作用探讨
- 2010年
- 目的 采用流体剪切力加载成骨细胞,通过观察细胞骨架改建和测定丝切蛋白及磷酸化丝切蛋白的含量,探讨丝切蛋白在流体剪切力引起成骨细胞细胞骨架改建中的作用.方法 采用1.2 Pa的流体剪切力作用于成骨细胞0（空白对照组）、15、30、45、60、120 min后,蛋白质印迹法测定细胞内丝切蛋白及磷酸化丝切蛋白的含量,采用异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽染色观察纤维型肌动蛋白的变化.结果 成骨细胞受流体剪切力刺激后,随加载时间延长,细胞内磷酸化丝切蛋白含量持续升高.流体剪切力作用60 min内丝切蛋白随加载时间延长有所下降,但加载120 min时细胞内丝切蛋白含量（0.254±0.026）为加载60 min（0.162±0.004）的1.5倍.随流体剪切力作用时间延长,各组细胞纤维型肌动蛋白染色逐渐增强,纤维增粗;加载120 min时的平均荧光强度（42.93±6.41）为空白对照组（15.41±3.60）的2.8倍（P＜0.05）.结论 流体剪切力刺激可通过丝切蛋白磷酸化,使成骨细胞细胞骨架发生改建.
- 刘艳辉李友瑞邵敏锋张晓娟付强
- 关键词：成骨细胞细胞骨架流体剪切力
