金涛
- 作品数：5 被引量：23H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属梨园医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 缺氧诱导因子-2α对肝癌干细胞标记物EpCAM和CD133表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:研究缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)对肝癌干细胞标记物EpGAM和CD133表达的影响。方法:分别上调和下调肝癌细胞系HepG2细胞和Hep3B细胞中HIF-2α的表达,Real-time PCR检测EpGAM和CD133 mRNA表达的变化;Western Blot检测EpGAM和CD133蛋白水平的变化。结果:转染HIF-2α表达质粒后HepG2细胞和Hep3B细胞中EpGAM和CD133表达水平升高(P<0.05),干扰HIF-2α表达后肝癌细胞中EpGAM和CD133表达水平降低(P<0.05)。结论:HIF-2α可能在肝癌细胞"干性"维持方面发挥着积极的作用。
- 刘慧敏马薇刘平金涛
- 关键词：肝癌EPCAMCD133
- 甲胎蛋白对耐药基因MDR1表达及肝癌细胞化疗敏感性的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探讨甲胎蛋白（AFP）对耐药基因MDR1表达和肝癌细胞化疗敏感性的影响。方法建立稳定表达AFP的肝癌细胞系SMMC-7721／AFP，分别通过Real-timePCR和蛋白印迹检测转染前后AFP和MDR1的表达。MTF法测定SMMC-7721／AFP和SMMC-7721／EGFP细胞对阿霉素的化疗敏感性。siRNA沉默SMMC-7721／AFP细胞中MDR1的表达，观察细胞对阿霉素化疗敏感性的变化。采用免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织中MDR1编码蛋白PgP的表达，分析PgP表达与血清AFP水平的相关性。结果在SMMC-7721／AFP细胞能检测到AFPmRNA和蛋白表达，而对照细胞则未检测到AFP表达，表明AFP稳转细胞系构建成功。SMMC-7721／AFP细胞中MDR1mRNA和蛋白水平明显高于对照细胞，SMMC-7721／EGFP和SMMC-7721／AFP细胞MDR1mRNA水平为对照组的（52．7±1．5）倍（P〈0．05）。SMMC-7721／AFP细胞对阿霉素的耐药性增加了（12．8±1．1）倍（P〈0．05）。siRNA沉默SMMC-7721／AFP细胞中MDR1的表达后细胞对阿霉素的化疗敏感性明显增强。肝癌组织中Pgp的表达和血清AFP水平呈正相关。结论AFP可通过上调MDR1的表达引起肝癌细胞对阿霉素耐药。
- 吴超杨健张金玲金涛何前进李常海
- 关键词：甲胎蛋白肝癌耐药基因化疗耐药
- 缺氧诱导因子2α对肝细胞癌化疗耐药性的影响被引量：5
- 2019年
- 目的:研究缺氧诱导因子2α(HIF-2α)对肝细胞癌化疗耐药性的影响及其机制。方法:选取6种肝细胞癌细胞株,Western blot方法检测HIF-2α的表达;制备过表达HIF-2α慢病毒颗粒并感染人肝细胞癌细胞株HepG2和PLC/PRF/5细胞,制备稳定表达HIF-2α的细胞株HepG2-HIF-2α和PLC/PRF/5-HIF-2α,Western blot法验证其表达;配置6种常规化疗药物氟尿嘧啶、环磷酰胺、盐酸表柔比星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、索拉菲尼的5个浓度,并加入HepG2-HIF-2α及对照细胞中,MTT法检测细胞抑制率;Western blot检测两种过表达HIF-2α的肝细胞癌细胞株及相应对照细胞中耐药基因MDR1、LRP及MRP1的水平。结果:Western blot结果显示HIF-2α在6种肝细胞癌细胞株中均有表达;HIF-2α慢病毒颗粒感染肝细胞癌细胞株后能够在肝细胞癌细胞中稳定过表达HIF-2α;MTT结果显示,与对照组相比,环磷酰胺、甲氨蝶呤和索拉菲尼对HepG2-HIF-2α抑制率明显较低(P<0.05),提示HIF-2α的表达引起耐药性的增加;而氟尿嘧啶、盐酸表柔比星和丝裂霉素对HepG2-HIF-2α细胞的抑制率与对照组无统计学差异(P>0.05);Westernblot法进一步分析了HIF-2α在肝细胞癌细胞中的表达导致耐药性增加的原因,结果显示,在HepG2-HIF-2α细胞及PLC/PRF/5-HIF-2α细胞中,耐药相关基因MDR1、LRP、MRP1的表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论:在肝细胞癌中,HIF-2α能够通过上调MDR1、LRP、MRP1耐药基因的表达引起肝细胞癌细胞的耐药性的增加。
- 杨书才张莉刘利平邓唯杰周杰刘慧张鲍虎金涛
- 关键词：肝细胞癌LRPMRP1
- 乙肝病毒X蛋白对正常肝细胞生物钟基因表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对人正常肝细胞中生物钟基因表达的影响。方法:分别将HBx表达质粒(pcDNA3.1-HBx)与空载体质粒(pcDNA3.1)转染入人正常肝细胞系L02后,用RT-PCR与Western blot法检测细胞HBx mRNA与蛋白的表达;real-time PCR检测细胞中生物钟基因CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、CKIε的表达。结果:RT-PCR与Western blot结果显示,L02细胞转染HBx表达质粒后有明显的HBx mRNA与蛋白表达,而转染空载体质粒的L02细胞无HBx mRNA与蛋白表达。与转染空载体质粒的L02细胞比较,转染HBx表达质粒的L02细胞CLOCK与Cry1的mRNA表达明显升高,而BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry2、CKIε的mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:HBx能使正常肝细胞中的生物钟基因表达发生改变,破坏肝细胞正常的生物节律,这可能为其导致肝癌形成的机制之一。
- 金涛刘平黄早早李常海姚弘毅柳湘洁杨盛力
- 关键词：乙型肝炎病毒X生物钟
- 生物钟基因Timeless在HBV相关肝癌组织中的表达及其与乙肝病毒X蛋白的关系被引量：7
- 2016年
- 目的探讨生物钟基因Timeless在HBV相关肝癌中的表达及其与乙肝病毒X蛋白(HBx)的关系。方法选择60例HBV相关肝癌患者,取其癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法观察Timeless的表达,分析Timeless表达与患者临床病理参数的关系。取人正常肝细胞系LO2、肝癌细胞系Hep G2,分别转染pc DNA3.1-HBx质粒和pc DNA3.1质粒,采用Real-time PCR和Western blotting法检测细胞内Timeless mRNA及其蛋白表达。结果肝癌组织及癌旁正常组织Timeless阳性表达率分别为60.0%(36/60)、38.3%(23/60),二者比较P<0.05。Timeless阳性表达与肝癌患者血管侵犯有关(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤组织分化程度、血清AFP水平无关(P均>0.05)。转染pc DNA3.1-HBx质粒的Hep G2细胞和LO2细胞Timeless mRNA及其蛋白相对表达量均明显高于转染pc DNA3.1质粒细胞(P均<0.05)。结论 HBV相关肝癌组织中Timeless高表达,其表达变化与HBV相关肝癌的发生、发展有关;HBx可能是引起Timeless表达升高的原因之一。
- 彭桦何前进金涛李常海
- 关键词：TIMELESS乙型肝炎病毒乙肝病毒X蛋白
