阳宏
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠CTGF miRNA质粒载体构建及其稳定转染肝星状细胞系的建立
- 目的 构建结缔组织生长因子(CTGF)基因miRNA质粒载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR,获得CTGF miRNA质粒稳定转染大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的细胞系.方法 根据大鼠CTGF基因mRNA序列...
- 李孝生阳宏向颖邢旎旎沈艳
- 关键词：肝星状细胞结缔组织生长因子RNA干扰
- 川芎嗪及大鼠CTGF miRNA质粒对高糖刺激肝星状细胞结缔组织生长因子、转化生长因子-beta的影响被引量：4
- 2014年
- 本文旨在研究川芎嗪及大鼠结缔组织生长因子(CTGF)miRNA质粒对高糖刺激大鼠肝星状细胞(HSC)的CTGF和转化生长因子-beta(TGF-beta)mRNA表达量、蛋白表达量及Ⅰ型胶原表达量的作用。首先体外培养大鼠HSC以及稳定表达大鼠CTGF miRNA和稳定表达阴性质粒的大鼠HSC,高糖及川芎嗪作用后提取总RNA、总蛋白及收集细胞上清液,检测川芎嗪及大鼠CTGF miRNA质粒对高糖刺激HSC的CTGF、TGF-beta及Ⅰ型胶原表达量。实验结果表明,高糖导致HSC的CTGF mRNA、CTGF蛋白、TGF-beta mRNA、TGF-beta蛋白及Ⅰ型胶原表达量增加(P<0.05)。川芎嗪组CTGF mRNA、CTGF蛋白、TGF-beta mRNA、TGF-beta蛋白及Ⅰ型胶原的表达量较高糖组低(P<0.05)。大鼠CTGF miRNA质粒干扰组CTGF mRNA、CTGF蛋白、TGF-beta mRNA、TGF-beta蛋白及Ⅰ型胶原的表达量较高糖组低(P<0.05)。川芎嗪组与大鼠CTGF miRNA质粒干扰组相比,CTGF mRNA及CTGF蛋白的表达量差异无统计学意义(P>0.05),川芎嗪组Ⅰ型胶原的表达量明显低于大鼠CTGF miRNA质粒干扰组(P<0.05)。因此,高糖可刺激CTGF、TGF-beta、Ⅰ型胶原的表达,而川芎嗪、大鼠CTGF miRNA质粒可导致CTGF、TGF-beta、Ⅰ型胶原的表达量下降。
- 阳宏李军邢旎旎向颖沈艳李孝生
- 关键词：川芎嗪肝星状细胞结缔组织生长因子
- 川芎嗪和大鼠CTGF miRNA质粒对高糖刺激大鼠肝星状细胞CTGF、TGF-β表达的影响
- 目的:探讨川芎嗪和大鼠CTGF miRNA质粒对高糖刺激大鼠肝星状细胞(HSC)的结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子(TGF-β)及Ⅰ型胶原表达的作用效果，为在临床上应用川芎嗪治疗及预防肝纤维化提供理论依据。 ...
- 阳宏
- 关键词：川芎嗪肝星状细胞结缔组织生长因子
- 大鼠CTGFmiRNA质粒载体构建及其稳定转染肝星状细胞系的建立
- 目的：构建结缔组织生长因子(CTGF)基因miRNA质粒载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR,获得CTGF miRNA质粒稳定转染大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的细胞系.方法：根据大鼠CTGF基因mRNA序列设...
- 李孝生阳宏向颖邢旎旎沈艳
- 文献传递
- 川芎嗪和siRNA沉默转化生长因子β1干预大鼠肝星状细胞结缔组织生长因子的表达
- 2012年
- 背景:作者前期研究发现川芎嗪可以通过抑制肝星状细胞的增殖、阻抑p38MARK信号通路、下调结缔组织生长因子的表达等多途径发挥抗肝纤维化的作用。一般认为转化生长因子β1是促进纤维化发生最重要的细胞因子,结缔组织生长因子是转化生长因子β1的下游效应介质,siRNA靶向抑制转化生长因子β1可能成为治疗肝纤维化的新方法。目的:观察川芎嗪及化学合成的siRNA转化生长因子β1对大鼠肝星状细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法:体外培养大鼠肝星状细胞,从3条siRNA转化生长因子β1中筛选一条有效的基因沉默片段,然后利用脂质体转染试剂共同转染培养24h的细胞作为转染组,并设计空白对照组、转染试剂组、川芎嗪组及联合治疗组。结果与结论:与空白对照组相比,转染组、川芎嗪组、联合治疗组Ⅰ、Ⅲ型胶原及结缔组织生长因子mRNA表达均下调(P<0.05)。在转染组、川芎嗪组及联合治疗组,结缔组织生长因子蛋白表达均下调(P<0.05);培养上清液中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量均降低(P<0.05)。结果表明,siRNA沉默转化生长因子β1基因能下调结缔组织生长因子的表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。川芎嗪也能下调结缔组织生长因子的表达,但对Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的抑制作用更加显著,提示川芎嗪抗肝纤维化可能是多种作用靶点。
- 向颖李军贾茜阳宏李孝生
- 关键词：川芎嗪小干扰RNA转化生长因子Β1肝星状细胞结缔组织生长因子
- 川芎嗪及大鼠CTGF miRNA质粒对高糖刺激肝星状细胞结缔组织生长因子、转化生长因子的影响
- 目的:研究川芎嗪及大鼠CTGF miRNA质粒对高糖刺激大鼠肝星状细胞(HSC)结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子-beta(TGF-beta)基因水平、蛋白水平及Ⅰ型胶原表达的作用.
方法:体外培养大...
- 李孝生阳宏王文丽向颖沈艳
- 关键词：川芎嗪肝星状细胞结缔组织生长因子
- 文献传递
- 大鼠结缔组织生长因子基因miRNA表达质粒的构建及其稳定转染大鼠肝星状细胞系的建立被引量：1
- 2013年
- 目的构建大鼠结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)基因miRNA表达质粒,并建立稳定转染大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)系。方法根据大鼠CTGF基因mRNA序列,设计并合成3对寡聚单链DNA X191-1、X191-2和X191-3及1对阴性对照序列DNA X191-4,将4对寡聚单链DNA退火成双链后,分别与载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR连接,构建CTGF基因miRNA重组表达质粒,分别转染HSC-T6细胞,荧光显微镜观察细胞的转染效率,RT-PCR检测转染细胞中CTGF基因mRNA的转录水平;取干扰效率最高的重组质粒及阴性对照质粒,分别转染HSC-T6细胞,经杀稻瘟菌素持续加压筛选。结果经测序鉴定,重组表达质粒构建正确,插入片段的碱基序列与设计相符;细胞的瞬时转染效率约为50%;3组干扰质粒转染的HSC-T6细胞中,CTGF基因mRNA的转录水平明显低于空白对照组(P<0.01),其中X191-2质粒对CTGF基因转录的干扰效率最高;获得了稳定转染的HSC-T6细胞。结论成功构建了CTGF基因miRNA表达质粒,并获得了稳定转染的肝星状细胞系,为进一步研究肝纤维化的形成机制及其治疗奠定了基础。
- 阳宏李孝生向颖邢旎旎沈艳
- 关键词：结缔组织生长因子肝星状细胞
