陈建玉
- 作品数：7 被引量：28H指数：4
- 供职机构：杭州师范大学临床医学院附属医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省中医药科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高脂高果糖诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠枯否细胞及其信号分子的活化
- 2013年
- 目的探讨高脂高果糖饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠枯否细胞（KCs）活化及其信号通路蛋白的变化，了解KCs在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）致病机制中的意义。方法将20只6～8周龄SPF级C3H小鼠随机分为4组（正常组、果糖组、高脂组、高脂果糖组）饲养，每组5只。16周后处死小鼠，做肝脏病理检查，同时使用蛋白免疫印迹（WesternBlot）方法检测肝组织中F4／80、NF-KB、p-AKT、AKT的表达情况。结果与正常组比较，果糖组、高脂组、高脂果糖组肝组织脂质沉积明显，肝脏HE染色存在明显的炎症及肝细胞脂肪变，高脂高果糖组最为严重。与正常组比较，3组模型组小鼠肝组织中F4／80、NF—KB显著升高，果糖组p-AKT（P〈0．01）、高脂高果糖组AKT（P〈0．05）明显降低。结论高脂高糖饮食可使C3H／HeN小鼠出现典型的非酒精性脂肪肝表现，NAFLD形成涉及肝组织中KCs活化及其相关信号通路的激活。
- 朱明利刘静柳银兰杨文君罗燕庄振杰焦其彬陈建玉严健卞冬雪马晓洁荀运浩施军平
- 关键词：枯否细胞鼠科
- 慢性乙型肝炎病毒携带合并非酒精性脂肪性肝病小鼠模型建立与观察被引量：4
- 2013年
- 目的建立慢性乙型肝炎病毒（HBV）携带合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠模型。方法4周龄BALB／cHBV转基因小鼠100只，雌雄各半，高脂组70只予高脂饲料喂养，正常组30只予普通饲料喂养。16周末随机处死高脂组小鼠10只，肝组织及血清学检测确认目标模型建立。造模成功后高脂组再随机分为模型组和对照组，每组30只，模型组继以高脂饲料喂养，对照组改以普通饲料喂养，正常组维持原普通喂饲，连续72周（含造模16周）。第24、48和72周末每组分别随机处死小鼠10只，全自动生化仪检测血清ALT、AST、TC、TG、FBG，荧光定量PCR法检测HBV—DNA，化学发光法检测HBsAg，肝组织切片后HE染色评价组织学变化，观察小鼠模型的动态演变情况。结果①高脂饲料喂养16周后，小鼠体质量增加，血清ALT、AST、TC、TG、FBG等各项生化指标升高，HBV．DNA阳性，肝组织HE染色示肝细胞明显大泡性脂肪变性和小叶内淋巴细胞浸润，NAFLD活动度评分（NAS）接近NASH，慢性HBV携带合并NAFLD小鼠模型建立成功。②模型组血清TC和TG值在各观察点均高于对照组和正常组。③24周和72周各组间HBV—DNA值存在明显差异，且差异具有统计学意义（P〈0．05）。④48周和72周各组间NAS存在明显差异，且差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论①高脂喂养HBV转基因小鼠可建立慢性HBV携带合并NAFLD小鼠模型。②NAFLD在一定程度上促进HBV携带小鼠的肝病进展。
- 陆璐柳银兰杨文君刘静罗燕庄振杰陈建玉卞冬雪荀运浩施军平
- 关键词：脂肪肝肝炎病毒乙型转基因小鼠
- 高脂高果糖饮食诱导非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型的建立和鉴定被引量：9
- 2014年
- 目的 采用高脂高果糖饮食建立符合人类饮食习惯的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠模型.方法 6周龄C3H野生型小鼠120只按体质量随机分到高脂高果糖组、高脂组、高果糖组、对照组各30只予以相应喂养,4、8、16周末分批处死小鼠,检测体质量、肝湿重、肝功能、脂代谢等NASH相关指标,肝组织HE、油红O染色评价病理学改变.计量资料两组间均数比较用t检验和Wilcoxon秩和检验,多组间均数比较采用方差分析,计数资料采用x2检验和Fisher确切概率法.结果 与同时点对照组比较,高脂高果糖组和高脂组小鼠体质量、肝湿重增加,油红O染色面积、密度增加,HE染色显示随造模时间延长出现不同程度脂肪变伴炎症灶,高脂高果糖组更明显,造模结束时80％非酒精性脂肪性肝病评分≥5,伴窦周纤维化.血清检测示:4周末,高脂高果糖组和高脂组总胆固醇及高、低密度脂蛋白明显增高;8周末,高脂高果糖组和高脂组血清高、低密度脂蛋白增加明显;16周末,高脂高果糖组、高脂组、高果糖组、对照组ALT分别为(108.5±93.34)U/L、(44.30±35.71)U/L、(46.70±17.95)U/L、(24.70±6.57)U/L,F=5.099,P=0.005;AST分别为(316.30±208.98) U/L、(132.12±75.43) U/L、(143.30±38.53) U/L、(122.60±12.76) U/L,F=6.654,P=0.001;总胆固醇分别为(5.18±0.58) mmol/L、(3.94±0.75)mmol/L、(2.30±0.50) mmol/L、(2.02±0.24) mmol/L,F=72.470,P=0.000;高密度脂蛋白分别为(3.05±0.49) mmol/L、(2.65±0.54) mmol/L、(1.77±0.47) mmol/L、(1.58±0.16)mmol/L,F=25.413,P=0.000;低密度脂蛋白分别为(1.11±0.23) mmol/L、(0.72±0.17)mmol/L、(0.27±0.04) mmol/L、(0.20±0.05) mmol/L,F=83.297,P=0.000.高果糖组组织病理学、血清学改变均不明显.结论 高脂高果糖饮食喂饲4、8、16周可诱导小鼠出现可模拟NASH的疾病进程,出现典型的NASH肝组织学和肥胖等代谢表型.
- 刘静柳银兰杨文君罗燕庄振杰焦其彬陈建玉卞冬雪马晓洁
- 关键词：肝炎脂肪性非酒精性
- 复方楂金颗粒对NASH小鼠肝脏内TLR4信号通路的影响被引量：5
- 2016年
- 目的观察复方楂金颗粒对高脂高果糖饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠肝脏内Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路影响。方法 6周龄雄性C3H品系小鼠30只,按体重分层随机分为高脂高果糖组(20只)和对照组(10只)。高脂高果糖组用高脂饲料和20%果糖饮用水喂养;对照组用普通饲料和普通饮用水喂养。8周后将高脂高果糖组按体重分层随机分为高脂高果糖组和楂金颗粒组各10只,楂金颗粒组用高脂饲料和20%果糖饮用水喂养,每天按50mL/kg予12.8%的复方楂金颗粒冲剂灌胃(山楂、郁金、泽泻、海藻、象贝、水飞蓟、桃仁按3∶1.5∶1.5∶2∶1.5∶2∶1比例制备而成)。余组喂养如前,每天予同体积蒸馏水灌胃,16周处死小鼠。检测小鼠体重、肝湿重、肝功能及脂代谢指标,采用HE、油红O及Masson染色评价小鼠肝脏病理学改变。用免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR法检测小鼠肝组织TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)表达。结果楂金颗粒组体重、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)明显低于高脂高果糖组(P<0.05);油红O染色面积、密度较对照组减少;HE染色显示,楂金颗粒组炎症气球样变较高脂高果糖组减少;Masson染色阴性;TLR4、MyD88免疫组化染色阳性率和mRNA表达均明显低于高脂高果糖组(P<0.05)。结论复方楂金颗粒剂能明显抑制NASH小鼠肝脏内TLR4信号通路。
- 刘静庄振杰田静李兆翌罗燕柳银兰陈建玉马晓洁臧淑妃施军平
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎TOLL样受体4
- 非酒精性脂肪性肝炎相关肝细胞癌小鼠模型的建立与鉴定被引量：5
- 2016年
- 目的用高脂高胆固醇饮食喂养载脂蛋白E和低密度脂蛋白受体双基因敲除（ApoE-／-/LDLR-/-）小鼠，构建-种基于基因敲除小鼠的非酒精性脂肪性肝炎相关肝癌模型。方法首先用两种基因敲除小鼠ApoE√和LDLR-’交配，从后代中鉴定筛选出ApoE-／-/LDLR-/-纯合子小鼠。纯合子小鼠交配繁殖的子代在出生后2～3d内注射链脲佐菌素（STZ），断乳后继续高脂高胆固醇饮食至第20周。同时设立对照组ApoE-／-/LDLR-/-小鼠断乳后普通饮食。并于第10、16、20周末分批处死小鼠，检测体质量及生物化学指标。肝组织HE、油红O染色和Masson染色评价病理学改变。免疫组织化学分析肝癌标志物磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican3）的表达情况。结果模型组小鼠空腹血糖、总胆固醇水平均明显高于对照组（P〈0．01），丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和总甘油三酯随造模时间延长逐渐增加，在20周时差异均有统计学意义（P〈0．05）。与对照组相比较，HE染色结果显示模型组小鼠10周出现酒精性脂肪性肝炎，16周出现异型增生结节，20周出现早期肝癌。肝脏油红0染色面积、密度、染色强度等结果提示在10周酒精性脂肪性肝炎阶段脂肪变程度最高，而后随造模时间延长脂肪变程度相对减轻。Masson染色结果显示模型组小鼠16周有轻度窦周纤维化，20周癌组织周围纤维化，有纤维间隔形成。对照组HE染色、油红O染色、Masson染色均未见异常。免疫组织化学结果显示模型组小鼠16周Glypican3在结节部位表达阳性，20周在肝癌组织细胞质表达阳性。结论新出生ApoE-／-/LDLR-/-小鼠经STZ注射后高脂高胆固醇饮食20周可以模拟脂肪肝相关肝细胞癌的疾病进程，可能不经过肝硬化直接发展成为早期肝癌。
- 罗燕杨炙君陈建玉张晶曾小丹庄振杰臧淑妃周刚狄春红施军平
- 关键词：脂肪肝非酒精性肝细胞
- RNA干扰TLR4信号通路对枯否细胞吞噬功能的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨RNA干扰Toll样受体4（Toll—likereceptor4，TLR4）信号通路对枯否细胞（Kupffercells，KCs）吞噬功能的影响。方法以RAW264．7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞为研究对象，经QPCR验证得到最优干扰RNA为Tlr4-mus-1567后，以正常细胞为对照组，NegativeControlRNA干扰为NC对照组，Tll4-mus-1567RNA干扰为实验组，倒置显微镜观察各组细胞吞噬酵母菌情况，并测定各组的吞噬细胞百分数和吞噬指数，组间进行比较。结果实验组平均吞噬细胞百分数较正常对照组明显降低（17．67％±3．51％和32．00％±3．00％，P〈0．01），实验组平均吞噬指数较正常对照组明显降低（46．33％±7．51％和82．00％±6．08％，P〈0．01）。结论RNA干扰TLR4信号通路能降低KCs的吞噬功能。
- 臧淑妃刘静柳银兰杨文君罗燕庄振杰焦其彬陈建玉卞冬雪马晓洁苟运浩朱明利施军平
- 关键词：枯否细胞肝疾病受体TOLL
- 中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂sivelestat对非酒精性脂肪性肝炎的防治作用及其机制被引量：5
- 2017年
- 目的研究中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂sivelestat对非酒精性脂肪性肝炎的防治作用及其机制。方法将4周龄雄性C57BL／6J ApoE基因敲除小鼠40只平均分为：（1）正常饮食组：正常饮食＋等渗盐水；（2）正常饮食＋干预组：正常饮食＋sivelestat；（3）模型组：高脂高胆固醇饮食＋等渗盐水；（4）模型＋干预组：高脂高胆固醇饮食＋sivelestat。连续喂养12周后取血和肝脏检测血清生物化学指标，用肝组织油红O染色评价脂肪变程度，用HE染色进行非酒精性脂肪性肝病活动度评分评价炎症反应。用荧光定量RT—PCR及免疫组织化学方法检测肝脏炎症因子及CD68和F4／80水平。4组间均数比较采用单因素方差分析，组问两两比较采用LSD或SNK法（方差齐）和Tamhane或Dunnett法（方差不齐）。结果高脂高胆固醇饮食12周能诱导ApoE基因敲除小鼠出现典型非酒精性脂肪性肝炎表现。sivelestat干预组空腹血糖、血胆固醇和肝生物化学指标较模型组明显降低，胰岛素敏感性增加，非酒精性脂肪性肝病活动度积分降低（5．71±1．11比3．16±1．16，P〈0．05），肿瘤坏死因子和单核细胞趋化蛋白-1也降低。sivelestat干预后CD68和F4／80的mRNA水平明显降低，免疫组织化学结果显示CD68在肝脏内表达减少。结论中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂sivelestat对非酒精性脂肪性肝炎的防治作用明确，减少枯否细胞活化可能是其防治非酒精性脂肪性肝炎的重要机制。
- 臧淑妃马晓洁王磊朱葛丽杨文君柳银兰严健罗燕庄振杰陈建玉荀运浩施军平
- 关键词：脂肪性肝炎非酒精性中性粒细胞中性粒细胞弹性蛋白酶
