陈继德
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
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- 一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法。通过构建含ICAM-1基因的重组逆转录病毒质粒，连同包装质粒共同转染包装细胞，收相关病毒上清并感染间充质干细胞，达到抑制间充质干细胞分化为脂肪...
- 张毅朱恒徐芬芬陈继德刘元林
- ICAM-1基因转染对小鼠间充质干细胞成脂分化功能的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨细胞间黏附分子1（ICAM-1）基因转染对小鼠间充质干细胞（MSC）向脂肪细胞分化的影响。方法构建含小鼠ICAM-1基因全长DNA片段的MIGRl-ICAM-1重组逆转录病毒质粒，连同空质粒MIGRl及包装质粒ECOS分别转染T293细胞，收集相关病毒上清并感染小鼠MSC细胞系C3H10T1／2细胞，荧光倒置显微镜下观察及real．timePCR法和流式细胞术检测转染效率，将获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T1／2细胞（C3H10T1／2-ICAM-1细胞）和转入空质粒的C3H10T1／2细胞（C3H10T1／2-MIGRl细胞）向脂肪细胞诱导分化，以原位油红O染色和real—timePCR检测成脂分化能力及其关键转录因子C／EBPoL和PPARy mRNA的表达水平。结果成功构建MIGRl-ICAM一1逆转录病毒载体；感染C3H10T1／2细胞获得稳定过表达ICAM-1的C3H10T1／2-ICAM-1细胞和空载体对照C3H10T1／2一MIGRl细胞。成脂细胞诱导分化结果显示，无论是在自分化还是诱导分化组中，C3H10T1／2-ICAM-1细胞与转染空载体的细胞相比脂滴变小，其脂肪细胞数量分别为[（3．2±0．5）／孔、（12．2±3．8）／孔]，显著少于转染空载体的细胞[（11．2±0．4）／孔、（51．3±2．8）／孔]（P〈0．05）；C3H10T1／2一ICAM一1细胞自分化组和诱导分化组C／EBPoLmRNA表达水平分别为1．2±0．7和2．9±0．9）；PPAR-,／mRNA表达水平分别为1557．6±70．2和7547．0±442．2，均较转染空载体细胞的5．8±0．5和23．0±2．3：2453．04-215．6和9856．3±542．2下调（P〈0．05）。结论细胞表面ICAM一1过表达可抑制小鼠MSC的成脂分化。
- 徐芬芬朱恒陈继德刘元林刘雨潇郑荣秀张毅
- 关键词：基因ICAM-1间充质干细胞基因转染细胞分化
- microRNA调控树突状细胞研究的新进展
- 2013年
- microRNA(miRNA)是一类长度为22个核苷酸左右的非编码单链RNA,通过与靶基因mRNA 3'UTR区域结合,引起靶基因mRNA剪切、降解及其翻译抑制,通过这种转录后的调控,进而调节细胞增殖、分化、凋亡、发育以及肿瘤的发生。树突状细胞(DC)是一类重要的免疫细胞,通过呈递抗原,启动下游的免疫应答,参与一系列生理和病理活动。最近的研究发现,多种miRNA能够调控DC的发育、分化及功能。对这方面的研究进展予以归纳总结有利于深入了解miRNA层面的DC调控机制,为建立免疫系统相关疾病的全新诊疗策略提供线索。为此,本文就近年来miRNA调控DC的相关研究做一综述。
- 陈继德朱恒张毅
- 关键词：MICRORNA树突状细胞
- 细胞间黏附分子1通过活化MAPK通路调节小鼠间充质干细胞向脂肪细胞分化
- 2014年
- 本研究旨在探讨细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)调节小鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)向脂肪细胞分化的分子机制。分别将小鼠ICAM-1重组逆转录病毒MIGR1-ICAM-1和空载体逆转录病毒MIGR1感染小鼠间充质干细胞系C3H10T 1/2细胞,获得稳定高表达ICAM-1的C3H10T 1/2细胞(MIGR1-ICAM-1/MSC)和对照组细胞(MIGR1/MSC)。通过Western blot检测P38,ERK和JNK通路的活化情况,观察MIGR1-ICAM-1/MSC和MIGR1/MSC向脂肪细胞的诱导分化。实验组加入P38、ERK及JNK 3种信号通路抑制剂后进行培养并观察其成脂肪分化情况。以原位油红染色观察脂滴,应用real-time PCR检测成脂分化关键转录因子C/EBPα和PPARγmRNA的表达水平。结果显示,ICAM-1过表达可活化MSC的P38、ERK及JNK通路;原位油红染色及real-time PCR检测结果显示对ERK通路活化抑制可导致MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγ的mRNA表达水平上调,脂滴变大,脂肪数量增加(P<0.01);阻断P38通路后MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγmRNA表达水平下调,脂滴及脂肪细胞数量更小、更少(P<0.01)。结论:ICAM-1可能通过活化ERK信号通路抑制MSC的成脂分化,通过活化P38通路维持小鼠MSC成脂分化能力。
- 陈继德徐芬芬朱恒李喜梅唐博刘元林张毅
- 关键词：细胞间粘附分子1MAPK通路间充质干细胞脂肪细胞
- 向成骨细胞和成脂肪细胞分化的小鼠骨间充质干细胞调节单核细胞来源的破骨细胞发育被引量：6
- 2012年
- 为探究分化阶段的骨间充质干细胞对于破骨细胞的影响,将小鼠密质骨来源的间充质干细胞体外诱导分化,研究其对于破骨细胞发育的调控作用。从小鼠密质骨中分离培养得到间充质干细胞,将其进行成骨和成脂肪诱导1周,分别将成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞与CD11b+的单核细胞共同培养,并以抗酒石酸的酸性磷酸酶染色鉴定破骨细胞。结果表明:向成骨分化和成脂肪分化的间充质干细胞均可以调节单核细胞向破骨细胞分化。与未分化的间充质干细胞相比,成骨分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用减弱,而成脂肪分化的间充质干细胞促进破骨细胞发育的作用增强。结论:间充质干细胞调节破骨细胞发育的能力在其分化为不同种类细胞后发生相应变化,提示间充质干细胞通过分化为子代细胞而对破骨细胞发育发挥选择性的调节。
- 朱恒刘元林陈继德李红刘雨潇徐芬芬江小霞张毅毛宁
- 一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种抑制间充质干细胞分化为脂肪细胞的方法。通过构建含ICAM-1基因的重组逆转录病毒质粒，连同包装质粒共同转染包装细胞，收相关病毒上清并感染间充质干细胞，达到抑制间充质干细胞分化为脂肪...
- 张毅朱恒徐芬芬陈继德刘元林
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