陈静 作品数:17 被引量:44 H指数:4 供职机构: 公安部物证鉴定中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 国家教育部“985工程” 更多>> 相关领域: 政治法律 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
血痕特异性mRNA标记研究 被引量:2 2018年 血痕是案发现场尤其是命案中比较常见的生物物证,而血痕的正确组织来源推断是当前鉴定工作中急需解决的问题。随着法医物证学的不断发展,以mRNA(messenger RNA)为基础的体液斑迹组织来源鉴定技术作为一种不同于传统血痕免疫学检测的新型方法,已经越加显示其独特的优越性。在该技术的基础上,实现共同提取生物物证的RNA与DNA的目标,建立体液斑迹鉴定与DNA分型兼容的方法,有利于现场重建,提高生物物证的证据效力,完善证据链。本研究建立了一个包括血痕总RNA提取、逆转录、荧光特异引物扩增、遗传分析仪电泳检测分析等步骤的血痕来源推断技术平台。实验共采集制备了40份的中国人群(女性)外周血、16份月经血样本,筛选了5个外周血标记:HBA、HBB、GYPA、SPTB、ALAS2,2个月经血标记:MMP7、MMP11,构建了一个囊括外周血、月经血特异标记的荧光复合扩增体系。结果显示mRNA技术为基础的鉴定血痕来源的方法是可行的,并且建立了血痕RNA检验的遗传分析仪结果判读方法。 林清峦 赵禾苗 陈静 陈静 严安心 姚岚 姚岚 胡兰关键词:MRNA 盐芥谷胱甘肽过氧化物酶基因(ThGPX8)的克隆与原核表达 被引量:3 2013年 【目的】克隆盐芥谷胱甘肽过氧化物酶(GPXs)基因ThGPX8,对其进行序列分析,构建原核表达载体,为进一步研究ThGPX8的结构和功能奠定基础。【方法】以盐芥为材料,利用RT-PCR技术获得其ThGPX8基因的全长cDNA序列;应用生物信息学手段对该基因编码的蛋白结构和系统进化关系进行分析;构建原核表达载体pET-ThGPX8,转化E.coli BL21(DE3),进行IPTG诱导表达、SDS-PAGE检测和Western blotting鉴定。【结果】获得的ThGPX8基因序列的开放阅读框(ORF)为504bp,编码167个氨基酸,具有GPXs的特征结构域,不是跨膜蛋白;其二级结构主要由无规则卷曲组成,三级结构为二聚体。进化树分析表明,盐芥ThGPX8与拟南芥AlyGPX8、AtGPX8和油菜BnGPX8具有较高的同源性。盐芥ThGPX8与ThGPX6的理化性质存在差异,但具有相似的二级结构和三级结构。将ThGPX8转入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达得到了分子质量约23ku的蛋白,该蛋白在37℃下诱导5h可获得较高的表达量。【结论】获得的ThGPX8基因cDNA序列所编码的蛋白属于植物GPXs家族成员,利用构建的原核表达载体pET-ThGPX8转化E.coli BL21(DE3)获得了融合表达蛋白。 张孜宸 隋欣 高飞 周宜君 陈静 刘楠关键词:盐芥 基因克隆 原核表达 非编码RNA在体液斑迹鉴定中的应用 被引量:6 2020年 在犯罪现场侦查过程中,正确识别现场留下的生物斑迹组织来源非常重要。非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指转录组中不翻译为蛋白质的RNA分子,它在诸多体液(外周血、月经血、精液、唾液、阴道分泌物等)中皆有丰富的特异性表达,因而具备体液组织来源鉴定的潜力。由于其具备特殊结构,诸多ncRNA标记物展现出较好的灵敏度、特异度及稳定性,具有一定的检验优势。本文对非编码RNA在体液斑迹鉴定中的应用及其前景进行综述。 张琦 赵禾苗 李永久 陈静 畅晶晶 杨瑞琴 王冲关键词:法医物证学 非编码RNA 一种对未知检材进行组织来源推断的方法和系统 本发明提供一种对未知检材进行组织来源推断的方法和系统,该方法包括提取未知检材DNA,对所述DNA进行甲基化转化,对经甲基化转化的DNA的3个位点进行扩增,所述3个位点为cg25373595,cg18121066和cg17... 陈静 丰蕾 季安全 王冲 孙启凡 胡胜 赵一霞脱落细胞提取装置 本实用新型提供一种脱落细胞提取装置。该脱落细胞提取装置包括手持部和提取部,所述提取部具有基板,所述基板能够容置在离心管中,在所述基板表面设有胶层;所述手持部呈长条状,其一端固定在所述基板端部,在所述手持部上设有易于使所述... 孟庆振 温佩忠 凃政 李万水 苑美青 崔佳 高珊 孙秀亮 陈静文献传递 circRNA应用于体液斑鉴定的技术可行性研究 被引量:4 2018年 目的利用circ RNA检测技术,探索circ RNA分子应用于体液斑迹鉴定的可行性。方法制备精液、唾液、阴道分泌物三种体液斑迹样本,以Qiagen RNeasy Micro试剂盒提取总RNA,经RNase R消化后得到circ RNA,进行逆转录PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测分析。结果制备的体液斑迹样本均可检测到circ RNA分子,提示circ RNA普遍存在于法医常见体液斑迹中,具备一定的应用价值。结论 circ RNA的检测可与现有DNA检测技术兼容,利用其组织特异性,可成为体液斑迹鉴定的新标记,具备重要的研究价值。 赵禾苗 赵禾苗 陈静 陈静 李万水关键词:法医物证学 基于DNA甲基化的三种常见体液组织来源鉴定 2021年 目的针对唾液、精液、外周血,找到一组可用于区分不同体液的组织差异性甲基化位点,为确定案件现场提取的体液组织来源提供科学依据。方法选取常见体液样本共49份,运用Illumina 850K甲基化芯片进行全基因组甲基化检测,筛选获得17个候选CpG位点;使用焦磷酸测序对55份样本进行测序,实际共检测了候选位点及其附近的位点共34个CpG位点。选择基于赤池信息量(AIC)的逐步条件多分类逻辑回归方法进行数据分析。结果基于3个CpG位点(cg25373595、cg18121066、cg17283169)构建了多分类逻辑回归模型用于体液组织来源预测,分别位于RAP1GAP2,TBCD,CALML3基因上。该模型对精液来源预测的AUC、灵敏度和特异性均为1,对唾液和静脉血来源的预测AUC和灵敏度均为1,特异性分别为0.99和0.98。在独立的唾液、精液和静脉血3种体液共24份样本中对该预测模型进行验证,预测结果全部正确。结论本文建立的基于3个CpG位点的体液组织来源鉴定方法可以实现唾液、精液和静脉血3种体液的有效区分,在法庭科学中具有潜在的应用价值。 杨梦思 陈燕 陈静 王科文 郭向前 季安全 丰蕾关键词:焦磷酸测序 硬质渗透性载体表面接触DNA的检验 被引量:8 2018年 本文介绍一种适用于石头、混凝土块等硬质渗透性载体表面接触DNA检验的新方法。首先,将一定浓度的茚二酮荧光显现试剂喷涂在渗透性载体表面,使其与接触痕迹中的氨基酸反应,产生荧光物质,在高能量532nm激光(绿光,50万lx照度)照射下激发出荧光,从而定位接触痕迹。然后,利用负压吸附的方法定点吸附接触部位的脱落细胞,提取出脱落细胞的DNA,即接触DNA。在一起杀人案STR分型检验中,应用该方法在关键物证石头、混凝土块表面分别获得了嫌疑人各自单一的DNA分型。茚二酮荧光显现试剂结合高能量激光照射技术可对微量接触痕迹灵敏、准确地定位,将其用于对硬质渗透性载体表面接触DNA的检验,采取"定位-定点吸附-STR分析"的技术路线可大大减少工作量,有效提高单一个体DNA分型的检出率。 严安心 王冲 凃政 徐秀兰 徐珍 陈静 李永久关键词:激光 负压吸附 DNA检验 人D6S1043-1型STR质粒DNA标准物质的研制 被引量:3 2020年 短串联重复序列(short tandem repeat,STR)是存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的DNA序列,由含2~6个碱基对的重复单位串联构成。DNA STR分型检验是当前法庭科学进行个体识别和亲缘鉴定的主要依据。STR分型标准物质是DNA STR检验量值溯源的基础和关键物质,对其进行研究将极大推动我国法庭科学DNA STR检验的标准化进程。以STR基因座D6S1043为例,介绍人类基因组中STR序列的质粒DNA标准物质的制备过程。首先,合成包含13个重复单元([ATCT]13)的D6S1043序列(定义为D6S1043-1)并将其与pUC57载体连接构建重组质粒,制备质粒溶液。其次,通过酶切鉴定、Sanger测序、多种STR分型试剂盒的分型鉴定等方法检验DNA序列的准确性。再次,采用微滴式数字PCR方法(droplet digital PCR,ddPCR)检测质粒浓度,评估质粒溶液的均匀性和稳定性。最后,由8家实验室协作,测定浓度标准值,综合分析均匀性检验、稳定性检验、定值过程等引入的不确定度,得到总不确定度;由6家实验室协作,测定D6S1043-1的分型值。结果表明:该标准物质的均匀性、稳定性良好,在-20℃可保存6个月,在4℃可保存14 d;核酸拷贝数为(7.7±1.2)×10^3 copies·μL^-1;在D6S1043基因座上的分型值为13。人D6S1043-1型STR质粒DNA标准物质[编号:GBW(E)091072]是我国法庭科学DNA检验领域首批有证标准物质之一,其研制过程为其他STR基因座的质粒DNA标准物质的研制提供了一定的借鉴。 严安心 陈静 刘洪迪 李永久 彭柱 赵禾苗 李亮 赵兴春关键词:STR 一种对未知检材进行组织来源推断的方法和系统 本发明提供一种对未知检材进行组织来源推断的方法和系统,该方法包括提取未知检材DNA,对所述DNA进行甲基化转化,对经甲基化转化的DNA的3个位点进行扩增,所述3个位点为cg25373595,cg18121066和cg17... 陈静 丰蕾 季安全 王冲 孙启凡 胡胜 赵一霞