靳宇飞
- 作品数:6 被引量:30H指数:1
- 供职机构:第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 6-羟多巴胺体内去除兔股动脉交感神经的方法研究
- 目的 探讨6-羟多巴胺(Hydroxydopamine,6-OHDA)在体内去除兔股动脉交感神经的可行性,确定有效可行的血管壁交感神经去除方法,为研究单纯血管本身在组织工程骨中有无神经化的作用提供理想的动物实验模型。 方...
- 靳宇飞李富航毕龙裴国献
- 关键词:股动脉交感神经6-OHDA
- P物质对骨髓基质干细胞来源的成骨细胞与内皮细胞体外联合培养体系的影响被引量:1
- 2014年
- 目的 探讨P物质对骨髓基质干细胞(BMSCs)来源的成骨细胞(OB)与内皮细胞(EC)体外联合培养的影响. 方法 分别建立BMSCs来源的OB与EC单独培养体系,以及按2∶1的比例体外直接或间接共培养体系.实验组:各培养体系细胞内同时加入1×10-8 mol/L P物质(n=6),对照组:各培养体系不添加P物质(n=6).培养48 h后采用流式细胞仪分析细胞的增殖与活性,并采用酶联免疫吸附法测定碱性磷酸酶(ALP)的表达,实时定量聚合酶链式反应检测骨钙素(OC)mRNA基因的表达.比较两组不同培养方式细胞功能的变化. 结果 与对照组比较,实验组OB单独培养、间接共培养时细胞G1期减少,G2/M期明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05).实验组OB单独培养、间接共培养、直接共培养的细胞ALP增殖活性[(2.877 ±0.188)、(3.053±0.179)、(4.345±0.305)]及OCmRNA的表达量[(1.682±0.155)、(3.188±0.213)、(3.720 ±0.194)]均明显高于对照组[(2.600±0.233)、(2.842±0.120)、(3.220±0.191);(1.360±0.141)、(2.272±0.143)、(2.507 ±0.176)],差异均有统计学意义(P<0.05);而EC单独培养的ALP增殖活性和OC mRNA的表达量两组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).实验组间接共培养、直接共培养的ALP增殖活性及OC mRNA的表达量较OB单独培养明显增高,且直接共培养较间接共培养也有所提高,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 BMSCs来源的OB与EC共培养细胞相容性良好,P物质可显著促进共培养体系中OB的增殖与活性.
- 李富航靳宇飞毕龙樊俊俊户刚裴国献
- 关键词:P物质成骨细胞内皮细胞共同培养技术
- P物质对BMSCs来源的成骨细胞与血管内皮细胞体外联合培养的生物学特性观察
- 前言:P物质(substance P,SP)是最早发现的神经肽,已经证实SP神经肽来源于感觉神经纤维,其可作用于成骨细胞,且贯穿于骨折愈合的整个过程.SP主要通过与它的受体-Neurokinin-1受体(NK1受体)结合...
- 李富航靳宇飞毕龙裴国献
- 关键词:P物质骨髓干细胞成骨细胞
- P物质在BMSCs来源的成骨细胞与内皮细胞体外联合培养中的作用被引量:1
- 2014年
- 目的:观察P物质(substance P,SP)在BMSCs来源的成骨细胞与内皮细胞体外联合培养中的作用,研究P物质作用于种子细胞的最适浓度指导组织工程骨修复骨缺损。方法:采用新生新西兰大白兔胎兔(雌雄不限)密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞行体外培养和连续传代,获得较纯的BMSCs。取生长状态良好的第3代BMSCs行成骨诱导培养及成血管内皮细胞诱导培养并鉴定。将诱导7 d的两种细胞按2:1比例混合培养,待细胞传至2代加入不同浓度的SP作为实验组,以正常未加SP的细胞培养基为对照组。培养后1、3、5、7 d采用CCK-8法测定细胞增殖并绘制生长曲线,观察细胞生长数量,测定碱性磷酸酶活性及观察细胞周期分布。结果:浓度范围从1×10-12-1×10-6mol/L的SP对联合共培养的成骨细胞增殖和活性都有促进作用,在浓度为1×10-8mol/L对联合共培养的成骨细胞增殖和活性的作用功效最强。结论:在体外直接联合共培养的体系中,SP对新种子细胞促进效果明显,其在1×10-8mol/L对联合共培养的成骨细胞增殖和活性作用最强。
- 李富航靳宇飞毕龙裴国献
- 关键词:P物质BMSCS成骨细胞内皮细胞共培养
- 6-羟多巴胺去除股动脉交感神经的动物模型建立及相关研究
- 2014年
- 目的探讨6-羟多巴胺(6-OHDA)在体内去除兔股动脉交感神经的可行性,以期为研究单纯血管本身在组织工程骨中有无神经化作用提供理想的动物实验模型。方法分离16只新西兰兔右侧股动脉,采用不同药物处理:实验组采用含0.1mg/mL6-OHDA和质量百分比为0.1%抗坏血酸Krebs缓冲液处理.为确定药物干预后交感神经的恢复时间,将实验组再分为7d、14d和28d取材组(n=4);对照组(n=4)采用仅含0.1%抗坏血酸Krebs缓冲液处理。分别用苏木精.伊红(HE)染色、乙醛酸激发单胺荧光染色检测股动脉组织变化、交感神经分布情况,并通过Westernblot检测酪酸羟化酶(TH)和神经肽Y(NPY)蛋白表达水平的差异。结果HE染色结果显示:与对照组相比,3个取材组股动脉组织血管壁结构完整,无明显形态学改变。乙醛酸激发单胺荧光染色结果显示:对照组股动脉可见大量交感神经呈网状和放射状分布;7d和14d取材组几乎不可见交感神经,28d取材组有少量交感神经。Westernblot检测结果表明:对照组、7d取材组、14d取材组及28d取材组TH/β—actin比值平均分别为0.70±0.08、0.19±0.08、0.20±0.06、0.33±0.06;NPY/β-actin比值平均分别为0.68±0.14、0.14±0.02、0.17±0.02、0.53±0.10,各取材组的TH和NPY蛋白表达量较对照组均显著减少,而28d取材组的TH和NPY蛋白表达量较7d、14d取材组明显增多,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论体内局部应用6-OHDA可有效去除股动脉交感神经纤维,是一种可行的血管壁去交感神经方法。本研究建立了一种理想的化学去股动脉交感神经的动物模型。
- 靳宇飞李富航毕龙裴国献
- 关键词:股动脉交感神经系统羟多巴胺
- 富血小板血浆的制备现状及研究进展被引量:28
- 2013年
- 富血小板血浆富含多种生长因子,目前国内外大量文献报道这些生长因子可显著促进骨缺损的修复,并在体外对骨髓基质干细胞的增殖与分化有明显的促进作用。然而也有一些学者认为在动物实验中,富血小板血浆无促进骨再生的作用,或在临床应用中富血小板血浆复合植骨材料修复骨缺损的效果不明显,其主要原因是各研究人员及临床工作者所使用的富血小板血浆其制备标准不一致。并且目前研究人员及临床工作者大都使用患者自体血液,这无疑会对患者的机体形成二次打击,且由于各患者存在个体差异,导致所制备的富血小板血浆质量不一致,从而影响研究结果与临床疗效。本文主要对富血小板血浆的成分、生物学特性、制备方法以及临床应用做一简要综述,这可以为后期同种异体富血小板血浆的标准化制备提供一些理论依据,使得制备方法统一、疗效确定的同种异体富血小板血浆制剂能像其他药品一样,被广泛应用于科研和临床,具有极为广阔的应用前景。
- 吕敏裴国献刘勇靳宇飞李富航白建萍
- 关键词:富血小板血浆骨缺损