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光敏色素与光调控被引量：24: 1997年; 生物体的新陈代谢和生长发育主要受遗传信息及环境信息的调控,遗传信息规定了个体发育的潜在模式,但它的实现在很大程度上受控于环境信息。光作为主要的环境因子,不仅提供光合作用所需的能量,而且触发植物形态变化、质体分化、新陈代谢等重要反应(统称为光形态建成)。光形态建成至少与四个不同类型光受体相关:光敏色素、蓝光受体、UV-A受体、UV-B受体,其中研究最深入的当属光敏色素。自1983年Vierstra和Quail分离到完整的光敏色素蛋白质以来,科学家相继对光敏色素的分子种类、生物合成与调控及生理机制展开了广泛深入的研究,并且取得了令人瞩目的进展。时至今日,随着新方法、新技术的应用,从光敏色素感受光刺激到基因在细胞核中表达,再到光形态建成的整个信号传递途径已逐步为人们所认识,许多与光敏色素调节有关的顺式因子及相应的DNA结合蛋白也已被确定。功能研究发现,没有哪一个反式作用因子在光调节的表达中单独起作用,可见光敏色素调控的基因表达是相当复杂的。本文拟就光敏色素分子、光敏色素基因家族、光敏色素所激活的信号传递途径及光敏色素与基因表达的关系等方面做一综述。; 顾雪松陈章良朱玉贤; 关键词：植物光敏色素光调控

豌豆乙酰羟酸还原异构酶cDNA克隆、表达及酶活性的影响因子研究: 植物的衰老机制一直是现代分子生物研究的热门课题.衰老过程中伴随着基因表达的变化,为了从分子生物学的角度深入探索基因表达对衰老的影响,研究人员开始寻找G2豌豆项芽衰老过程中特异表达的基因.G2豌豆顶芽衰老受光周期调控,即在...; 顾雪松; 关键词：支链氨基酸植物衰老赤霉素

豌豆乙酰羟酸还原异构酶基因的cDNA克隆及其表达被引量：2: 2001年; 　用ｃＤＮＡ差示分析法从Ｇ２　豌豆总ＲＮＡ中筛选到一个ＧＡ＿３特异诱导表达的基因片段，用该片段作探针进一步筛选Ｇ２豌豆ｃ　ＤＮＡ文库，得到一个全长２０３６　ｂｐ　的ｃ　ＤＮＡ序列．经分析，该ｃ　ＤＮＡ含有一个　１７４６　ｂｐ　的可读框，编码的蛋白质含有　５８１个氨基酸，理论分子量为　６４　ｋｕ，　ｃ　ＤＮＡ及推导的氨基酸序列分别与不同来源的乙酰羟酸还原异构酶相应序列有较高的同源性．将该基因转入表达载体中并在大肠杆菌中表达，获得了具有显著酶活性的外源蛋白．; 徐华松徐云剑顾雪松胡廷章苏彦辉朱玉贤; 关键词：基因克隆原核表达 CDNA文库

玫瑰果的清除活性氧作用被引量：2: 1995年; 通过透析后活性降低及凝胶过滤分离获知，玫瑰果对活性氧的清除，除了ＳＯＤ的作用外，大部分来自小分子物质。考察了维生素Ｃ与玫瑰果中Ｌ－ＳＯＤ之间的关系。; 顾雪松刘大涛林永齐; 关键词：活性氧维生素C 稳定性

活性氧自由基对细胞色素C和肌红蛋白的作用: 1996年; 研究了过硫酸铵－Ｎ，Ｎ，Ｎ＇，Ｎ＇四甲基乙二胺（ＡＰ－ＴＥＭＥＤ）体系产生的活性氧自由基（超氧阴离子自由基（Ｏ２－）、羟基自由基（·ＯＨ））对细胞色素Ｃ和肌红蛋白的作用．结果表明，Ｏ２－可以将细胞色素Ｃ中的三价铁离子还原为二价铁离子，延长作用时间可使铁卟啉基团脱落；亦可使肌红蛋白中的铁卟啉脱落．与此同时，紫外可见吸收光谱发生了变化．圆二色谱的变化说明蛋白分子中的α－螺旋遭到破坏．植物Ｌ－ＳＯＤ对于该损伤有保护作用．; 刘大涛顾雪松王贞佐林永齐; 关键词：细胞色素C 肌红蛋白活性氧自由基蛋白质

长白山植物的抗自由基被引量：4: 1994年; 用电子顺磁共振方法从长白山出产的二十余种中草药中筛选出能清除活性氧自由基的中草药１６种，其中绝大部分的清除效率大于５０％。此可做为利用其研制抗衰老、抗肿瘤等药物和开发的理论依据。; 顾雪松刘大涛赵云峰郑莹光林永齐王敬伯林海; 关键词：中草药超氧化物歧化酶活性氧自由基

用两步PCR法克隆全长cDNA被引量：3: 2000年; 采用两步 PCR法成功地克隆了一个全长的 c DNA.首先 ,用差式分析法克隆得到差别表达的 c DNA片段 ,再分别用这些片段内部的特异序列及 c DNA两端不同接头的序列为引物进行第一步 PCR扩增 ,得到差别 c DNA片段的上游和下游序列 .然后 ,根据第一步 PCR扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步 PCR,从而得到全长的 c DNA.; 苏彦辉徐云剑顾雪松刘天昀朱玉贤; 关键词：全长CDNA 克隆 PCR

L-SOD发挥活性作用的可能机制: 1998年; 氧化剂、还原剂处理前后，Ｌ－ＳＯＤ的活性及紫外光谱发生变化，Ｈ２Ｏ２使Ｆｅ（Ⅲ）吸收增强，同时钝化Ｌ－ＳＯＤ的活性；加入保险粉后，Ｌ－ＳＯＤ重新活化，Ｆｅ（Ⅲ）吸收减弱．ＮＥＭ封闭Ｃｙｓ后，Ｌ－ＳＯＤ紫外吸收谱发生变化，且活性减弱．说明Ｆｅ辅基及Ｃｙｓ是活性发挥的必需基团．; 顾雪松林永齐朱玉贤; 关键词：紫外光谱

微磁球法分离转基因烟草细胞壁CaMBP: 1997年; 运用亲和层析原理,并结合凝胶覆盖法,建立了一种适于小量分离纯化CaMBPs(CaM结合蛋白)的方法──微磁球法,在转基因烟草细胞壁中检测出3条可能的CaMBPs.检测结果证明分离效果较好,保留了CaMBP条带.将洗脱液收集并进行检测,发现存在可抑制被CaM激活的PDE活性的成分,而这种抑制又可被外加纯化的CaM解除,说明确实存在CaMBP. 本实验室以胡萝卜悬浮培养细胞为材料研究了外源钙调素(CaM)对植物体细胞增殖的促进作用,并用珍珠梅花粉为材料,离体萌发后观察了外源 CaM对花粉管中生殖细胞有丝分裂的影响,说明外源 CaM对植物体细胞和性细胞的增殖与分裂均有促进作用,并说明外源 CaM的作用位点可能在细胞外部;在研究光信号传递途径的工作中,暗环境中显微注射CaM,不注入单个细胞而是注射入整株植株的下胚轴中,同样激活了转基因植株中的RbcS启动子,使报告基因得到表达,说明胞外CaM介导了这一通路,为胞外存在CaMBP提供了间接证据.故此,我们进行了一系列实验以确定细胞外CaMBP的存在.; 顾雪松陈章良朱玉贤; 关键词：烟草钙调素转基因烟草细胞壁

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顾雪松