马涧泉
- 作品数:94 被引量:229H指数:8
- 供职机构:中山医科大学更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家教育部博士点基金广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 转录终止与基因表达调控
- 1991年
- 转录终止在原核生物中可分为依赖与非依赖Rho因子两种类型,研究方向可纳入生物大分子的相互辨认领域。真核生物转录终止,近年采用较新的研究方法(Nuclear run-off法),得到一些有意义的结果.原核生物未成熟转录终止与很多生物功能的精细调节有关。在真核生物,未成熟转录终止的研究,与解决某些病毒感染、癌基因表达等重要医学课题已联系起来。
- 马涧泉
- 关键词:转录终止基因表达
- 人肥胖基因在pBV221中的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量:3
- 1998年
- 目的:在大肠杆菌中高效表达人leptin。方法:根据中国人肥胖基因(obesegene,OB)cDNA序列和高效表达质粒pBV221的多克隆位点,设计PCR引物,以含有人OB的重组质粒pUC19OB为模板,体外扩增人OB编码leptin的片段(OB1),并经内切酶消化鉴定。将带有一对限制性内切酶位点的OB1和pBV221分别进行双酶切,然后把OB1定向克隆于pBV221中。结果:成功地构建了重组质粒pBV221OB1,实现了人leptin在大肠杆菌中的表达。结论:采用定向克隆技术,将OB1插入表达质粒pBV221,连接效率高,且重组质粒中OB1均为正向插入,确保了人肥胖基因在大肠杆菌中的表达。
- 于雪梅朱振宇傅祖植马涧泉
- 关键词:肥胖症克隆基因表达肥胖基因
- DAB诱发大白鼠肝癌过程中细胞质膜糖蛋白变化的研究被引量:1
- 1996年
- 以二甲基氨基偶氮苯(DAB)诱发大白鼠肝癌为模型,观察了在诱癌过程中和肝癌形成后,肝细胞质膜上糖蛋白的变化。用不连续蔗糖密度梯度离心法制备肝细胞质膜,用ConA-Sepharose4B亲和层析法分离出肝细胞质膜糖蛋白,再进行SDS-PAGE电泳分析。结果表明诱癌4wk,l6wk的肝细胞质膜搪蛋白成份和正常肝比较无显著差异。肝癌细胞质膜上糖蛋白的SDS-PAGE电泳图谱和正常肝比较,一些高分子量的糖蛋白缺失,而低分子量的糖蛋白含量增加.并显示了一条分子量为6.61KD的新的糖蛋白带。
- 黄文心徐晓利马涧泉
- 关键词:肝癌细胞质膜糖蛋白DAB
- 反义bcl-2 DNA促进裸鼠荷人鼻咽癌细胞株CNE_2-baxα凋亡被引量:3
- 1999年
- 目的:在裸鼠活体水平上观察bcl - 2 反义寡聚核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide , ASON) 对鼻咽癌细胞株CNE2 - baxα凋亡的影响。方法:DNA 合成仪合成22nt ASON 片段,RT- PCR 检测bcl - 2 表达,电镜观察细胞凋亡。结果:反义bcl - 2 DNA 片段局部注射CNE2 - baxα致瘤组织,RT- PCR 检测肿瘤组织中bcl - 2 表达被封闭,电镜观察视野下可见大量癌细胞凋亡,癌细胞数目减少,细胞间组织大量纤维化;凋亡的癌细胞电子密度增加,具典型凋亡特征。反义bcl - 2 封闭1 周,抑瘤率74-4 % ,第2 周为46-0 % 。结论:反义bcl- 2 抑制鼻咽癌细胞株CNE2 - baxα致瘤性。
- 张清秀朱振宇吴金浪周宁宁马涧泉
- 关键词:反义癌细胞凋亡
- EB病毒BHRF1基因的克隆及其表达产物抑制细胞凋亡的研究被引量:4
- 1998年
- 目的EB病毒BHRF1基因克隆,其表达产物抑制CHO细胞凋亡功能的研究。方法以B95-8细胞株EBVDNA为模板设计一对引物,采用PCR技术扩增BHRF1基因,用目的基因内的两个单酶切点BamHⅠ、BglⅠ进行酶切鉴定。用引物上所引入的两个酶切位点NcoⅠ、SclⅠ酶切目的基因后定向连接到pBV221载体上,转入宿主菌DH5α经质粒抽提,单、双酶切鉴定,从所获克隆中筛选重组质粒克隆。温控诱导目的基因表达,SDS-PAGE及凝胶薄层扫描分析。采用缺血清培养方法建立CHO细胞凋亡模型。结果所得扩增产物长592bp与预期大小一致;筛选出的9个重组质粒克隆经SDS-PAGE和扫描表明重组蛋白表达量占菌体蛋白总量的2.5%。将含重组蛋白的菌体蛋白加入缺血清培养体系,通过与空白菌体蛋白对照表明,重组蛋白具有明显的抑制CHO细胞凋亡的能力。结论BHRF1蛋白具有有效控制血清缺乏所诱导的CHO细胞凋亡功能,这为BHRF1蛋白的广泛应用提供了依据。
- 戴克胜朱振宇马涧泉
- 关键词:EB病毒BHRF1基因细胞凋亡
- DAB诱发大白鼠肝癌过程中细胞质膜上酶变化的观察
- 1996年
- 本实验以二甲氨基偶氮苯(DAB)诱发大白鼠肝癌的动物模型为材料,观察了在诱癌过程中和肝癌形成后大白鼠肝细胞质膜上几种酶活性的变化。用不连续蔗糖密度梯度离心法制备肝细胞质膜,用分光光度法对酶活性进行定量测定。实验结果表明,在诱癌过程中,肝细胞质膜上5'-AMP酶活性下降,γ-GT_(ase)酶活性显著升高。γ-GT_(ase)酶活性升高幅度与病理变化正相关,并且在诱癌早期就能表现出来。
- 黄文心徐晓利马涧泉
- 关键词:肝癌谷氨酰转肽酶
- 复印机不能代替笔记本——谈研究生做笔记的训练
- 1998年
- 复印机不能代替笔记本———谈研究生做笔记的训练●马涧泉摘要复印的滥用,看得见的损失是资源的浪费,无形的损失则是研究生们忽视了做笔记的自我训练。在阅读大量参考文献的同时,养成做笔记的习惯,可更牢固、深刻地掌握新知识,培养出精读的本领,并在一定程度上有助...
- 马涧泉
- 关键词:复印机记笔记笔记本写作能力训练学位与研究生教育
- 体外导入IL-2R反义RNA表达质粒对小鼠脾细胞活化增殖的影响
- 2002年
- 目的 观察导入白细胞介素 2受体 (IL 2R)反义RNA真核表达质粒对体外培养的小鼠脾细胞活化增殖的影响及其机制的探讨。方法 用粘附辅助脂质体法把IL 2R反义RNA真核表达质粒转染脾细胞 ,用丝裂原刺激脾细胞活化增殖 ,MTT法检测细胞生长情况。狭线杂交法检测IL 2RmRNA的表达水平 ,流式细胞仪检测IL 2R的蛋白表达水平。结果 转染各重组质粒后 ,脾细胞的生长增殖受到明显抑制 ,且 pcAnti mIL 2Rαβ与 pciAnti mIL 2Rαβ组抑制率较 pcAnti mIL 2Rα及pcAnti mIL 2Rβ组的大 ,pcAnti mIL 2Rα组抑制率较pcAnti mIL 2Rβ的大。转染各重组质粒对NIH3T3细胞生长增殖无影响。转染各重组质粒后IL 2RmRNA及蛋白表达水平明显降低。结论 IL 2R反义RNA能有效抑制体外培养的小鼠脾细胞的生长 ,IL 2Rαβ融合基因反义RNA较α、β单基因反义RNA的抑制率高 ,IL 2Rα反义RNA较 β反义RNA抑制率高。初步推断 ,IL 2R反义RNA抑制细胞生长的作用是特异的 ,只针对功能性表达IL 2R的细胞。反义RNA封闭IL
- 何承伟梁念慈朱振宇何晓顺黄洁夫马涧泉
- 关键词:白细胞介素2反义脾细胞增殖
- EB病毒BHRF_1基因聚合酶链反应扩增及其鉴定
- 1998年
- 目的:BHRF1的研究对于认识EBV有关肿瘤和其它疾病的发病机理、寻找预防、治疗途径有十分重要的意义。方法:以B958细胞DNA为模板,设计一对引物,用PCR方法扩增BHRF1基因,用目的基因内的两个限制性内切酶位点进行酶切鉴定。结果:扩增产物长592bp,与预期结果一致,两个酶所切下的四个片段长度也与理想值相符。结论:本研究首次采用PCR方法,成功地获得完整的EB病毒BHRF1基因,从而为该基因的进一步研究和应用奠定基础。
- 戴克胜朱振宇马涧泉
- 关键词:EB病毒BHRF1基因聚合酶链反应鼻咽肿瘤
- 螺旋藻多糖对小鼠巨噬细胞及K细胞ADCC活性的影响被引量:8
- 1996年
- C(57)BL/6J小鼠腹腔注射PSP100mg·kg(-1),连续12d,可明显促进小鼠K细胞ADCC活性,PSP组K细胞毒指数(CI)比对照组升高54.7%。在5mg/L~320mg/L浓度范围内,PSP可促进体外培养的C(57)BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞ADCC活性,最适浓度为80mg/L其CI值为对照孔的5.14倍。
- 左绍远马涧泉
- 关键词:K细胞腹腔巨噬细胞