倪志勇
- 作品数：148 被引量：437H指数：11
- 供职机构：新疆农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 大豆GmNAC23基因的克隆及特征分析被引量：8
- 2019年
- NAC是一类植物特异性转录因子,其在调节非生物和生物胁迫的发育和响应中起重要作用。为了探索大豆相关基因的功能,利用PCR的方法从大豆中克隆了1个NAC基因GmNAC23。该基因c DNA全长1 077 bp,开放阅读框长1 053 bp,编码350个氨基酸,蛋白质分子量为39. 483 ku,等电点为7. 08。序列分析表明,GmNAC23基因组包含3个外显子和2个内含子。多序列比对结果表明,GmNAC23蛋白含有1个高度保守的NAM结构域。进化树分析表明,该蛋白与绿豆、木豆、鹰嘴豆的NAC蛋白具有同源关系。转录活性分析结果表明,GmNAC23在SD (Trp-/His-/Ade-)营养型缺陷培养基上生长,说明该基因在酵母体内具有转录激活功能。组织特异性表达模式分析表明,在检测的所有组织中GmNAC23都有表达,在根中表达量最高,在茎顶端分生组织中表达量最低。结果表明,大豆GmNAC23基因具有转录激活功能,并且其在根中大量表达。为进一步研究GmNAC23的生物学功能奠定了基础。
- 王萍于月华白玉翠郭坤鹏康嘉楠倪志勇
- 关键词：大豆克隆转录激活
- 海岛棉黄烷酮3-羟化酶(F3H)基因序列分析和表达被引量：1
- 2015年
- 根据棉纤维发育相关基因转录组学、表达谱分析结果,从海岛棉(新海21)中筛选到一个与棉纤维发育相关的黄烷酮3-羟化酶基因(Gb F3H)。生物信息学分析表明,该基因编码区长1107bp,编码368个氨基酸,多序列比对发现Gb F3H序列保守性较高,具有典型的2-酮戊二酸双加氧酶结构域。实时定量PCR分析表明,Gb F3H基因在纤维发育的不同时期中均有表达,在开花后5 d的胚珠中表达量最高,推测Gb F3H基因可能对棉纤维发育具有重要作用。
- 刘超张俊姚正培倪志勇陈全家
- 关键词：海岛棉基因表达
- 木质素生物合成关键酶咖啡酸-O-甲基转移酶基因(COMT)的研究进展被引量：35
- 2010年
- 木质素是植物苯丙烷代谢途径的重要产物之一,其生物合成涉及到许多酶的参与。其中咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid-O-methyltransferase,COMT)是木质素特异途径中的一个关键酶,可催化咖啡酸、5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇甲基化分别生成阿魏酸、芥子醛和芥子醇,参与S-木质素的合成。本文主要对COMT基因的特征、COMT在木质素生物合成中的作用及COMT基因对植物木质素合成调控的研究现状进行了综述,并对COMT基因的研究方法和在生产中的应用作了展望。
- 李波倪志勇王娟吕萌范玲
- 关键词：木质素生物合成途径
- 大豆GmNAC115基因克隆及特征分析被引量：9
- 2016年
- NAC转录因子在植物发育和逆境应答中具有重要的作用。本研究从大豆中克隆了1个NAC基因GmNAC115。该基因c DNA全长1 383 bp,开放阅读框长912 bp,编码303个氨基酸,预测分子量约为34.278 k D,p I8.37。推测的氨基酸序列中含有1个高度保守的NAM结构域。Gm NAC115基因组包含3个外显子和2个内含子。进化树分析发现Gm NAC115和Pv NAC为1个分支。转录活性分析结果表明,Gm NAC115转录因子具有转录激活功能。SDSPAGE电泳分析表明,p ET-28a-Gm NAC115最佳诱导表达条件为在37℃下1.0 mmol·L-1IPTG诱导2 h。组织特异性表达模式分析表明在检测的所有组织中Gm NAC115都有表达,在根中表达量最高,在种子中表达量最低。
- 倪志勇于月华陈全家曲延英
- 关键词：大豆克隆转录激活
- 陆地棉无绒突变体miRNA的鉴定及其靶标基因分析
- 2019年
- 【目的】棉花纤维突起影响纤维的产量和品质,挖掘纤维起始相关的小RNA及其靶基因对于研究纤维起始机制至关重要。【方法】本研究以新乡小吉的野生型(Wild type,WT)及其无绒有絮突变体(Fuzzless mutant,FLM)开花当天的胚珠为材料,构建6个小RNA文库并进行高通量测序,以陆地棉(Gossypium hirsutum L.)基因组序列作为参考。【结果】共发现459个mi RNA,包括301个保守的mi RNA和158个新mi RNA。共得到13个差异表达的mi RNA,预测并分析了它们的靶基因。通过对靶基因的生物信息学分析结果显示,预测的这些靶基因侧重于编码HD-ZIP (Homeodomain-leucine zipper)、GRAS (Gibberellic acid insensitive,Repressor of GAI,Scarecrow)、AP2 (APETALA2)家族的转录因子,功能集中在转录和转录后调控阶段。对靶基因进行Gene Ontology (GO)注释发现,它们参与细胞分化、花药发育、花器官发育等生物学过程。随机选出4个mi RNA进行荧光定量PCR验证,结果证实了测序数据的可靠性。【结论】mi RNA通过负调控靶标转录因子和激素相关基因来影响纤维细胞的起始发育。
- 王金金马启峰倪志勇范术丽
- 关键词：陆地棉MIRNA
- 小麦TaSIM蛋白的原核表达与纯化及Western blotting检测
- 2021年
- 为了获得TaSIM(Salinity-induced R2R3-MYB)基因的纯化蛋白,以便研究TaSIM转录因子的DNA结合特异性。本研究以含有pET28a-TaSIM原核表达载体的大肠杆菌BL21为材料,用0.5 mmol/L IPTG,在37℃诱导TaSIM融合蛋白表达2 h,收集上清液,采用Ni-NTA柱纯化含有His标签的TaSIM融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测结果表明获得了分子量大小约为33 kD的TaSIM融合蛋白。采用Western blotting检测TaSIM融合蛋白的表达,以鼠抗血清和辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠Ig G为抗体,结果表明TaSIM融合蛋白能够和抗体特异结合,说明诱导的蛋白是TaSIM融合蛋白。研究结果为进一步利用凝胶阻滞方法检验TaSIM蛋白与顺式作用元件的结合提供实验基础。
- 于月华郑崇珂倪志勇
- 关键词：蛋白纯化
- 通过功能基因相对表达量鉴别棉花纤维品质的方法
- 本发明提供了1项通过功能基因相对表达量鉴别棉花纤维品质的方法，该方法基于功能基因GhCAD6与棉花纤维次生壁发育同步、并且与棉花纤维品质间负相关的理论基础，在开花后15天采集待检测育种材料发育中的纤维样品，通过RT-PC...
- 范玲袁辉倪志勇王冬梅师维军胡文冉马盾吾买尔江马君周小云
- 文献传递
- 受精对胚珠离体培养棉纤维生长发育的影响分析被引量：1
- 2010年
- 【目的】探索了新疆陆地棉品种新陆早36号未受精胚珠(0 DPA)和受精胚珠(2 DPA)在离体条件下棉纤维的生长发育情况。【方法】利用胚珠离体培养技术分别不继代培养未受精胚珠和受精胚珠30 d,通过纤维长度测量和生长图像的数字化处理技术,对二者体外培养12 DPA和27 DPA的生长状况进行对比分析。【结果】12 DPA时,未受精胚珠纤维长度为0.8 cm,纤维团面积为0.28 cm2,分别为受精胚珠的67%和54%;27 DPA时,未受精胚珠纤维长度为1.7 cm,纤维团面积为0.85 cm2,分别为受精胚珠的81%和77%。【结论】发现受精胚珠在不同时期的纤维发育情况均明显好于未受精胚珠,受精胚珠建立的离体培养体系更适合用于棉纤维生长发育过程的研究。
- 吕萌王娟倪志勇胡文冉范玲
- 关键词：胚珠离体培养受精棉纤维
- 陆地棉HRD转录因子基因原核表达与亚细胞定位分析
- 2019年
- 【目的】AP2/ERF家族基因在植物生长和逆境胁迫中起重要作用,GhHRD转录因子基因是该家族的一员。本试验首次克隆了GhHRD基因,为研究其功能提供理论依据。【方法】选用相对耐旱的新陆中36作为试验材料,通过反转录聚合酶链式反应的方法获得GhHRD基因,并通过生物信息学、原核表达、亚细胞定位和酵母杂交分析预测其结构和功能。【结果】GhHRD基因开放阅读框为555 bp,编码184个氨基酸,相对分子质量为19.539×10~3 Da,等电点为5,具有典型的AP2/ERF保守结构域。原核表达分析发现,pET-28a(+)-GhHRD可以被诱导表达,且在37℃、IPTG浓度1 mmol·L^(-1)条件下高效表达。与GFP融合的重组蛋白GhHRD-GFP定位在细胞核,且具有明显的转录自激活特征。【结论】推测GhHRD可能参与了棉花逆境胁迫应答反应,为进一步探索该转录因子的DNA结合位点和转录调控网络奠定了基础。
- 陈琴曲延英倪志勇韩玉慧程浩然陈全家
- 关键词：原核表达亚细胞定位
- 农科类实验室安全管理现状及对策研究被引量：7
- 2019年
- 对当前农科类实验室的安全管理情况进行了系统的分析,分别从实验室规章制度管理、实验场地安全管理、实验用试剂安全管理、实验人员安全管理4个方面阐述了农科类实验室安全管理的现状,并从健全实验室安全管理制度、构建并严格执行监督检查机制、实验室标准化建设、加强安全培训实践操作力度、增加实验室安全经费投入等方面进行了研究和总结,提出了适应农科类实验室安全管理的对策,为农科类实验室安全管理提供新的思路及方法.
- 于月华倪志勇顾爱星王希东孙玉芳
- 关键词：农科类实验室安全安全管理
