司静懿 作品数:86 被引量:227 H指数:8 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 美国中华医学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
杂合性丢失和HPV在宫颈癌中的研究 被引量:1 1996年 在以往宫颈癌与HPV感染相关性研究的基础上,在国内首先应用PCR法检测杂合性丢失(Loss of heterozygosity,LOH),选用p53基因外显子472密码子一对引物对60例宫颈癌组织DNA进行PCR扩增,经B_sH_(1236)Ⅰ内切酶进行RFLP分析,观察到12例有杂合性丢失,占20%(12/60),其中8例是HPV感染阴性组织,4例是HPV感染阳性组织。研究结果表明,在HPV感染阴性组织中,p53基因杂合性丢失率远比HPV感染阳性组织高(89%与7.8%)。在HPV感染阴性的宫颈癌组织中,p53基因杂合性丢失似乎与HPV没有直接关系,可能在其它因素参与下致使p53基因杂合性丢失。 崔克 赵富玺 李昆 司静懿关键词:宫颈癌 杂合性丢失 P53基因 人乳头瘤病毒 维甲酸及三尖杉酯碱对人早幼粒白血病细胞诱导分化的超微结构研究 <正> 我院药物所研制合成的维甲酸(RA)及三尖杉酯碱(H)经实验证明可以阻断某些化学的,物理的,以及病毒等致癌因子的诱癌作用。通过细胞化学方法发现它们可以逆转某些癌前或癌细胞。本文用RA(0.3μg/ml)及H(0.1... 司静懿 李昆 赵维敏 贾丽萍 盛齐 韩锐 路莹 刘红岩文献传递 人乳头瘤病毒16型L1-E7c嵌合基因的构建表达及免疫学效应的研究 被引量:1 2008年 目的构建人乳头瘤病毒16型(HPV16) L1-E7c嵌合基因并表达融合蛋白,以期获得防治HPV16感染及相关肿瘤的疫苗。方法以HPV16型的中国人野毒株为模板,利用PCR克隆技术制备HPV16 L1-E7c嵌合基因,并转入原核表达载体pET28a(+),获得pET28a(+)-L1-E7c表达质粒。以Western blot方法鉴定融合蛋白与HPV16L1和E7抗体的特异性结合。应用蛋白纯化仪纯化HPV16 L1-E7c融合蛋白,经过复性后,电镜观察病毒样颗粒(cVLP)的形态结构。纯化的蛋白免疫动物,测定疫苗抗肿瘤的细胞免疫及抗体产生情况。结果经过序列分析和酶切鉴定表明成功构建了HPV16 L1-E7c嵌合基因,并在大肠杆菌中可高效表达L1-E7c融合蛋白。此融合蛋白具有HPV16 L1和E7的抗原性,纯化的蛋白复性后可形成嵌合病毒样颗粒(cVLP),纯化的蛋白免疫动物后,产生特异性细胞和体液免疫反应,具有抗肿瘤活性。结论构建的嵌合基因HPV16 L1-E7c可有效表达HPV16 L1-E7c重组蛋白并形成cVLP。此蛋白在动物实验中具有疫苗的免疫保护作用,为HPV16疫苗的研究奠定了实验基础。 刘朝奇 许雪梅 徐建青 李昆 司静懿 刘世德关键词:人乳头瘤病毒16型 L1 E7 免疫原性 食管鳞癌HPV感染与病毒致癌基因E6的关系 被引量:2 1998年 目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)与食管鳞状细胞癌的关系。方法:采用多重引物多聚酶链反应(PCR)和免疫组化技术,对104例食管鳞癌进行HPVDNA和病毒癌基因E6蛋白检测。结果:HPVDNA阳性者占50.96%(53/104),其中HPV16型DNA49.06%(26/53),HPV18型DNA5.6%(3/53),HPV6/11DNA7.5%(4/53);两个或三个类型的混合感染占37.73%(20/53)。E6蛋白阳性56例(53.84%),以低分化鳞癌表达强度最高。结论:提示新疆地区食管鳞状细胞癌中HPV有较高的感染率,HPV16。 邹赛英 刘旭明 唐新萍 司静懿关键词:鳞癌 E6基因 致癌基因 基因工程重组人乳头瘤病毒亚基因致癌的分子生物学及超微结构研究 被引量:1 1990年 我们用基因分子生物学结合超微结构的方法在318例人宫颈癌标本中证明人乳头瘤病毒16型(HPV-16)与中国妇女宫颈癌的发生关系密切。它的亚基因片段,E_6-E_7早期基因可能是HPV-16的致癌基因。本文采用近年来开始发展起来的基因工程方法,将HPV-16的全部早期区基因及E_6-E_7基因分别重组至逆转录病毒(小鼠白血病病毒)的基因组中,将比重组的逆转录病毒导入培养细胞,在细胞中大量牛成并释放病毒颗粒到培养液中(此细胞称为重组病毒生成细胞)。借助重组病毒感染方式介导基因转移进行体外转化研究。采用重组逆转录病毒感染方式研究属于DNA病毒的HPV-16的致癌潜能,国内外尚未见报道。我们证明它是目前体外研究转化功能效率最高,最稳定的方法。 司静懿 李昆 张卫 韩日才 陈莲凤 赵维敏 宋国兴 刘世德 贾丽萍 麦永嫣 曾毅关键词:乳头瘤 致癌 超微结构 人乳头瘤病毒16型E_6E_7基因反义质粒对人宫颈癌细胞恶性的逆转作用 被引量:12 1995年 构建可为地塞米松诱导表达的人乳头瘤病毒16型(HPV-16)E_6E_7基因反义质粒(p16asE_6E_7Neo),利用磷酸钙沉淀法将其分别转染到HPV-16阳性的人宫颈癌细胞株Caski和HPV阴性的人宫颈癌细胞株C-33A中。地塞米松诱导反义质粒表达后,CasKi细胞失去其恶性表型,而C-33A细胞的生长特性及恶性行为未发生变化。说明反义质粒能够改变Caski细胞的恶性表型,且这种改变是通过特异性抑制E_6E_7基因表达实现的。 曾苹 司静懿 郭仁 李昆 宋爱华 刘士德 陈莲凤 宋国兴关键词:子宫颈肿瘤 人乳头瘤病毒 人白细胞介素-13基因的克隆与表达 1998年 目的构建一个能在原核高效表达人白细胞介素-13(HIL-13)的系统。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得HIL-13的cDNA,将其克隆至原核表达载体pGEX-2T后进行诱导表达。结果合成了特异编码HIL-13的cDNA,构建了原核表达质粒pGEX-2THIL-13,对其进行序列分析表明,表达质粒中的插入片段为HIL-13基因;诱导表达出含有HIL-13的融合蛋白谷光苷肽-S-转移酶-HIL-13(GST-HIL-13),其相对分子质量为39000。结论(1)从T淋巴细胞中克隆出HIL-13基因。(2)HIL-13cDNA在原核细胞表达的蛋白占菌体总蛋白的37%。 孙张岩 司静懿 刘士德 宋国兴 宋国兴关键词:白细胞介素-13 T淋巴细胞 克隆 食管鳞癌中HPV-16E6与p53的表达相关性 被引量:2 1997年 食管鳞癌中HPV16E6与p53的表达相关性邹赛英1唐新萍1刘旭明1司静懿21兰州军区乌鲁木齐总医院病理科新疆乌鲁木齐8300002中国协和医科大学基础医学研究所生物物理研究室Subjectheadingsesophagealneoplasms... 邹赛英 唐新萍 刘旭明 司静懿关键词:乳头状瘤病毒 P53蛋白 鳞状细胞癌 食管鳞癌人乳头瘤病毒DNA的检测研究 被引量:5 1998年 目的:对新疆食管鳞状细胞癌中进行人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测。方法:采用多重引物聚合酶链反应(PCR)技术。结果:新疆5个地区4个民族104例食管鳞癌中HPVDNA阳性者占50.96%(53/104),其中HPV16型为49.06%(26/53),HPV18型5.6%(3/53),HPV6/11型7.5%(4/53);16型和18型同时阳性者20.75%(11/53),18型和6/11型11.32%(6/53),16型、18型和6/11型三者同时阳性5.7%(3/53);两个或三个类型的混合感染占37.7%(20/53)。5个地区的食管鳞癌中均有不同程度的HPVDNA感染,4个民族中以哈萨克族食鳞癌HPV感染率较高(80.48%)。结论:新疆地区食管鳞状细胞癌中HPV有较高的感染率,以16型为主,伴随与其它类型的混合感染,哈萨克族食管癌的发生发展与HPV具有密切关系。 邹赛英 司静懿 司静懿 刘旭明关键词:食管肿瘤 聚合酶链反应 HPV 鳞癌 HPV致宫颈癌的分子机理与基因治疗及疫苗研究(综述二) HPV16致宫颈癌的基因治疗研究据本组分子流行病学研究资料表明,中国妇女宫颈癌中HPV16阳性率高达84.6%,HPV16 E6E7为其致癌基因,抑制其表达则可消除其转化作用.鉴于至今无特效药物治疗HPV感染.因此,近年... 司静懿 韩广洲 许雪梅 陈连凤 吴璐 陈浩 李昆 宋国兴 刘世德 胡延忠 曾苹 徐建青 刘朝奇 阎伦飙关键词:宫颈癌 人乳头瘤病毒 分子机理 基因治疗 疫苗 文献传递