吴国华
- 作品数：126 被引量：287H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省科技重大专项计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达
- 2010年
- 为了构建O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒并在BHK-21细胞中进行表达,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)从阳性质粒pGEM-P12A克隆到P1-2A基因,将扩增产物纯化、双酶切后连接到pBudCE-IFN载体,构建重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A。重组表达质粒鉴定后,在脂质体介导下转染BHK-21细胞,用RT-PCR和直接免疫荧光试验分别检测P1-2A和IFN-γ在BHK-21细胞中的表达。RT-PCR检测显示,重组表达质粒转染细胞后P1-2A和IFN-γ基因成功转录出mRNA;免疫荧光试验表明目的基因在BHK-21细胞中获得了表达。结果证明,本研究成功构建了重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A并在体外进行了表达,这为研制抗FMDVDNA疫苗和IFN-γ的佐剂作用奠定了坚实基础。
- 吴国华张强颜新敏侯俊玲赵志荀崔力凡李健朱海霞朱彩珠
- 关键词：FMDVIFN-Γ基因共表达
- 检测绵羊痘病毒的试剂盒
- 本发明公开一种用于检测绵羊痘病毒的试剂盒。本发明的用于检测绵羊痘病毒的试剂盒内至少包括有四条引物，分别是SEQ ID №1、SEQ ID №2、SEQ ID №3和SEQ ID №4，以及dNTP、Tris-HC、KCl...
- 赵志荀张强范斌吴国华颜新敏岳华李应国张光培王远微聂福平周晓黎李健朱海霞芦晓立代雪玲田波孙晓林刘发央
- 文献传递
- 水疱性口炎病毒研究概述被引量：2
- 2010年
- 对水疱性口炎病毒的病原特征、临床症状、流行病学、病毒的致病和免疫机制进行了概述,并对其作为载体在重组疫苗上的研究热点进行了展望。
- 颜新敏张强吴国华李健朱海霞
- 关键词：水疱性口炎病毒病原学临床症状活载体
- 病毒受体及其研究进展被引量：3
- 2012年
- 介绍了病毒受体的基本生物学特性,重点阐述了噬菌体展示、免疫共沉淀及酵母双杂交等病毒受体研究方法,综述了几种重要动物病毒细胞膜受体的研究进展,并对病毒受体研究的发展前景进行了展望。
- 高顺平吴国华张强
- 关键词：病毒受体生物学特性研究方法动物病毒
- 一种检测猪水泡病病毒的引物、检测试剂盒和制备方法
- 本发明公开一种检测猪水泡病病毒的引物、检测试剂盒和制备方法。本发明用于检测猪水泡病病毒的引物基因序列为SEQ？ID？No.1（SVDV-F）、SEQ？ID？No.2（SVDV-R）、SEQ？ID？No.3（UWD-F）、...
- 张强卢昌赵志荀吴国华颜新敏李应国岳华周晓黎李健朱海霞代雪玲田波芦晓立高顺平王曼
- 文献传递
- 靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的序列siRNA-165
- 本发明公开靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的序列siRNA-165，以及这个序列的用途。
- 张强赵志荀吴国华颜新敏李健朱海霞崔立凡高顺平才学鹏
- 文献传递
- 山羊痘病毒P32基因与绵羊CD58基因共表达载体的构建及其免疫活性分析被引量：1
- 2015年
- 为了增强山羊痘病毒P32蛋白的免疫效果,发挥CD58的免疫佐剂作用,将山羊痘病毒P32基因和绵羊CD58基因构建在同一载体上,转染BHK21细胞,通过直接免疫荧光试验和间接免疫荧光试验分别间接检测P32和直接检测CD58在BHK21中的表达。结果显示,P32和CD58在BHK21细胞中都有表达。以构建的P32基因与绵羊CD58基因共表达载体为DNA疫苗,通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,定期采血,用ELISA检测免疫抗体水平,用MTT法检测细胞免疫情况;结果表明,共表达载体可诱导机体产生体液免疫和细胞免疫。
- 芦晓立吴国华颜新敏张强
- 关键词：山羊痘病毒P32基因体液免疫细胞免疫
- 山羊痘病毒P32基因的克隆与序列分析被引量：20
- 2006年
- 应用PCR技术,用特异性引物扩增出羊痘病毒结构蛋白P32基因,连接于pMD18-T载体,转化到JM109感受态细胞,对重组质粒双酶切、PCR鉴定与序列分析得出:P32结构蛋白基因全长969 bp,编码323个氨基酸.与山羊痘病毒和绵羊痘病毒P32基因序列同源性分别达99%和97%;与山羊痘病毒和绵羊痘病毒P32基因编码的氨基酸同源性分别达98.9%和96%.
- 马维民刘湘涛张强吴国华颜新敏李健朱海霞吴润
- 关键词：羊痘病毒P32基因克隆
- 猪带绦虫六钩蚴TsO1基因的克隆、表达与结构预测
- 从猪带绦虫六钩蚴cDNA 表达文库中筛选、克隆的TSOl 基因,设计表达性引物,亚克隆到pGEX-4T-1表达载体,构建pGEX-GST-TSO1的融合表达的重组载体,转化BL21寄主菌和IPTG 诱导表达后,经SDS-...
- 才学鹏景志忠窦永喜蒙学莲吴国华骆学农郑亚东
- 关键词：六钩蚴免疫筛选基因克隆
- 文献传递
- 山羊痘病毒结构蛋白P32基因的表达被引量：2
- 2007年
- 将山羊痘病毒结构蛋白P32基因从重组质粒pMD-P32中亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体上,用构建的重组表达质粒pGEX-P32转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1 mmol/L IPTG诱导表达,细菌裂解物经SDS-PAGE检测到分子量约为58 ku的目的蛋白,与预期的产物大小一致.Western-blotting表明该重组蛋白可被山羊痘阳性血清所识别.
- 张强马维民吴国华颜新敏李健朱海霞朱彩珠吴润刘湘涛才学鹏
- 关键词：羊痘病毒P32基因原核表达
