吴荃
- 作品数:10 被引量:25H指数:3
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 雌二醇通过调节上皮细胞系的旁分泌促进前列腺间质细胞增殖和分化被引量:5
- 2007年
- 目的:研究雌二醇通过调节上皮细胞的旁分泌对前列腺间质细胞增殖、分化和胞外基质蓄积的作用。方法:雌二醇处理前列腺增生上皮细胞系BPH-1,用收集的条件培养液(CM)培养人前列腺间质细胞,MTT法检测细胞的增殖;用实时定量RT-PCR检测细胞中smoothelin、纤维黏连蛋白、Ⅳ型胶原和转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达水平;用Western blotting检测细胞平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)的表达;用放射性免疫法和ELISA分别检测Ⅳ型胶原、纤维黏连蛋白和TGF-β1的蛋白水平。结果:雌二醇能够上调BPH-1细胞中TGF-β1的表达和分泌;经雌二醇刺激的BPH-1CM能促进间质细胞的增殖;雌二醇刺激的BPH-1CM对平滑肌细胞特异蛋白(smoothelin和SM-MHC)表达的促进作用较未经雌二醇刺激者更加明显;TGF-β1中和抗体可以抑制BPH-1CM对间质细胞中Ⅳ型胶原和SM-MHC的促表达作用。结论:BPH-1可通过分泌TGF-β1促进间质细胞的分化和胞外基质的蓄积;雌二醇可通过上调BPH-1TGF-β1的分泌进一步促进间质细胞的分化;雌二醇还可通过调节BPH-1分泌的某种活性因子促进间质细胞的增殖。
- 吴荃肖向茜刘树业刘宇石建党王克明张琚
- 关键词:雌二醇细胞外基质转化生长因子Β
- 良性前列腺增生组织中基质细胞的增殖和凋亡被引量:8
- 2005年
- 目的:探讨良性前列腺基质增生组织中细胞增殖及凋亡状态的改变。方法:采用双抗体免疫组化方法,对6例良性前列腺增生和4例正常前列腺组织标本中平滑肌细胞的增殖状态进行研究;采用免疫组化和TUNEL相结合的方法,在连续的组织切片上观察基质细胞凋亡状态的变化。结果:在增生的前列腺组织中,处于增殖状态的平滑肌细胞比例远远高于正常前列腺组织,处于凋亡状态的基质细胞比例低于正常前列腺组织。结论:良性前列腺增生组织中,平滑肌细胞的增殖增加和基质细胞的凋亡减少同时发生。
- 石建党李江峰杨洪波王克明吴荃张琚
- 关键词:前列腺增生平滑肌细胞增殖细胞凋亡
- 前列腺上皮细胞对间质病理改变作用的研究
- 目的:“间质-上皮相互作用”在前列腺的生理和病理过程中发挥着重要的作用。迄今为止,大部分关于“间质一上皮相互作用”的研究主要集中在间质细胞对上皮细胞的作用,主要是雄激素如何通过调节间质细胞分泌生长因子影响前列腺上皮细胞的...
- 吴荃
- 关键词:条件培养液芳香化酶前列腺上皮细胞间质细胞旁分泌
- 文献传递
- BPH-1通过分泌PGE2上调前列腺间质细胞ERRα的表达被引量:2
- 2008年
- 雌激素受体相关受体α(estrogen receptor-related receptorα,ERRα)是一类可以直接或间接参与雌激素应答反应的孤儿核受体,它与雌激素受体(estrogen receptor,ER)在结构上有很强的同源性.雌激素效应在良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasis,BPH)的发生和发展中起着重要的作用.通常,孤儿核受体的转录活性多受一些非经典激素如维生素A衍生物、前列腺素类、固醇的调控.本文研究前列腺上皮细胞分泌的活性因子对间质细胞ERRα表达调控的分子机制.收集前列腺增生上皮细胞系BPH-1和前列腺癌上皮细胞系DU-145的条件培养液(condition medium,CM)培养间质细胞,采用实时定量RT-PCR和Western印迹法检测前列腺间质细胞(prostatic stromal cells,PrSC)中ERRα的表达,筛选CM中影响ERRα表达的活性因子.研究结果显示,BPH-1的CM可以上调ERRα的表达,而DU-145的CM对ERRα的表达没有影响;BPH-1中合成前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的限速酶———环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的mRNA表达水平和PGE2的分泌水平明显高于DU-145中COX-2表达水平和PGE2分泌水平;用经添加COX-2抑制剂NS-398的培养液处理BPH-1,其CM中PGE2的浓度明显下降,并失去了对ERRα表达的上调作用;添加PGE2可上调间质细胞中ERRα的表达.结果表明,BPH-1通过分泌PGE2促进间质细胞ERRα的表达,提示:在良性前列腺增生的发生和发展中,上皮细胞的旁分泌作用可促进间质细胞由ERRα介导的雌激素效应.
- 苗琳石建党周颖杜小玲吴荃王克明张琚
- 关键词:良性前列腺增生前列腺素E2
- BPH-1通过分泌前列腺素E_2促进前列腺间质细胞芳香化酶的表达
- 2008年
- 目的:研究前列腺上皮细胞旁分泌对间质细胞芳香化酶表达的影响。方法:用前列腺上皮细胞系(BPH-1,LNCap,DU145,PC3)条件培养液(CM)处理间质细胞,用RT-qPCR和W estern b lotting检测芳香化酶表达水平。用RT-qPCR和ELISA检测上皮细胞系环氧合酶2(COX-2)的表达及其CM前列腺素E2(PGE2)浓度。用添加COX-2特异性抑制剂NS-398的培养液培养BPH-1,检测其CM和PGE2对间质细胞芳香化酶表达影响。结果:良性前列腺增生上皮细胞系BPH-1 CM能促进间质细胞芳香化酶mRNA和蛋白的表达,而前列腺癌细胞系PC3、DU-145和LNCap对芳香化酶的表达没有影响。BPH-1 COX-2 mRNA表达水平和PGE2分泌水平远高于其它癌细胞系。添加NS-398培养BPH-1的CM,其PGE2浓度明显降低。PGE2可明显诱导间质细胞芳香化酶的表达。结论:BPH-1通过分泌PGE2促进前列腺间质细胞芳香化酶的表达。
- 吴荃周颖张智松杨睿石建党张琚
- 关键词:芳香酶前列腺素E2
- 前列腺间质细胞中雌二醇对MMP-2,MMP-9及其组织抑制因子表达的影响被引量:1
- 2007年
- 目的:研究雌二醇(E2)对前列腺间质细胞中基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)及其组织抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2和雌激素受体α、β(ERα、ERβ)的影响。方法:实时定量PCR法检测E2在前列腺间质细胞中对MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA水平的影响;半定量RT-PCR法检测E2对ERα、ERβ mRNA水平的影响。酶谱电泳法检测MMP-2、MMP-9的活性。Western blotting检测E2在前列腺间质细胞中对ERα蛋白水平的影响。结果:前列腺间质细胞中有MMP-2和ERα mRNA的表达,未检测到MMP-9 mRNA;培养液中检测到MMP-2前体(pro-MMP-2),未检测到其活性形式,也未检测到MMP-9前体及其活性形式。用E2处理间质细胞后MMP-2 mRNA水平降低,pro-MMP-2蛋白量减少,雌激素受体抑制剂ICI182.780可抑制此作用。E2对TIMP-1,2 mRNA表达无显著影响。E2能够增加前列腺间质细胞中ERα mRNA及其蛋白表达的水平。结论:E2能够通过ERα下调前列腺间质细胞中MMP-2的表达。
- 肖向茜符蓉张立国刘树业吴荃闫春和石建党张琚
- 关键词:雌二醇基质金属蛋白酶金属蛋白酶类组织抑制剂前列腺肿瘤
- TGFβ1介导雌二醇对前列腺间质细胞smoothelin表达的促进作用被引量:7
- 2007年
- 研究了雌激素在促进前列腺基质细胞化过程中作用的分子机制,在前列腺基质细胞培养液中分别添加 TGFβ1,雌二醇、雌二醇和 ICI182.780、睾酮、睾酮和芳香化酶抑制剂、双氢睾酮、雌二醇和 TGFβ1中和抗体;用半定量 RT-PCR 的方法检测基质细胞中平滑肌细胞特异蛋白 smoothelin 和 TGFβl mRNA 的表达水平;用ELISA 测定基质细胞培养基中 TGFβ1的浓度.结果显示 TGFβ1可明显促进 smoothelin 的表达;雌二醇和睾酮能明显刺激 TGFβ1基因和蛋白的表达水平,而雌激素受体抑制剂 ICI182.780和芳香化酶抑制剂可分别抑制雌二醇和睾酮对 TGFβ1表达的促进作用;双氢睾酮对 TGFβ1基因的表达没有影响.TGFβ1中和抗体能抑制雌二醇对 smoothelin 的促表达作用.结果显示雌二醇可能通过诱导 TGFβ1促进前列腺平滑肌细胞特异蛋白smoothelin 的表达.
- 吴荃张智松周颖石建党张琚
- 关键词:良性前列腺增生雌二醇转化生长因子Β1SMOOTHELIN
- 采用SM22启动子调节荧光蛋白的策略分选和鉴定人前列腺平滑肌细胞与成纤维细胞被引量:3
- 2007年
- 平滑肌细胞的数量、表型以及在间质细胞中所占的比例在前列腺间质增生的发生和发展中占有重要的地位.获得纯的平滑肌细胞和成纤维细胞,研究它们基因表达的差异,有助于进一步揭示前列腺增生的分子病因学.构建不同长度的SM22启动子,测定荧光素酶活性.采用了基于启动子特异性激活红绿色荧光蛋白表达结合流式细胞分选的策略,体外分离纯的平滑肌细胞和成纤维细胞.启动子活性实验结果表明,1396bp的人SM22启动子具有平滑肌细胞特异性和较高的相对活性.构建了红绿荧光蛋白的表达载体pDual-color,在此载体中,RFP的表达受1396bp的SM22启动子调控,GFP的组成型表达受CMV启动子控制.用流式细胞仪分选GFP+/RFP+和GFP+/RFP-细胞,提取总RNA,进行实时定量RT-PCR.结果显示,在分选获得的GFP+/RFP+细胞比GFP+/RFP-细胞的SM22和SMMHC表达水平高10倍以上.提示,基于启动子特异性可以在体外分离纯的平滑肌细胞和成纤维细胞.
- 王春雨周颖张智松阎春和吴荃石建党张琚
- 关键词:前列腺增生平滑肌细胞成纤维细胞
- 前列腺增生基质病变分子机制的研究(续一)
- 程勇郭志荣石建党张立国阎春和吴荃
- 该组采用双抗体免疫组化的方法,用平滑肌细胞特异肌球蛋白(myosin)和细胞增殖特异蛋白PCNA的抗体在同一张组织切片上作双抗体染色免疫组化;用肌球蛋白(myosin)抗体和检测细胞凋亡试剂盒在同一张组织切片上作免疫组化...
- 关键词:
- 关键词:雌激素平滑肌细胞
- 雌激素受体α和β在前列腺基质细胞增殖和分化中作用机制
- 张琚石建党于大海吴荃张智松阎春和王春雨
- 雌激素是调节前列腺基质细胞增殖和分化的重要因子。该项目研究雌激素在其受体α和β介导下直接或间接的对前列腺基质细胞增殖和分化影响的信号传导途径;进一步深入研究雌激素通过何种类型受体促进TGFβ1的表达以及该种受体与TGFβ...
- 关键词:
- 关键词:细胞增殖前列腺基质细胞分化前列腺雌激素受体Α