周文 作品数:63 被引量:145 H指数:8 供职机构: 泸州医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省教育厅资助科研项目 四川省教育厅自然科学科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 机械工程 更多>>
丹参素对原代培养猪冠脉平滑肌钙激活钾通道的影响 丹参素(DS-182)为活血化瘀中药丹参的水溶性有效成分,药理研究证实DS-182有显著舒张冠脉作用,过去在机制方面的研究集中于钙通道,而与血管舒张密切相关的钙激活钾通道(K)尚无报道。本实验应用膜片钳技术,研究了DS-... 张洁 曾晓荣 杨艳 刘智飞 贺军 周文关键词:丹参素 钙激活钾通道 原代培养 平滑肌 文献传递 高频心电图及高速扩大心电图对冠心病诊断价值的评价 1995年 应用高频心电图(HFEcG)和高速扩大心电图(HsMECG)技术,对234例冠心病患者和222例正常人进行了对比研究。结果:HFECG六导切迹数正常值范围上限为3个,频率正常值范围上限为、78.5Hz,HsMEcG的PtfV1正常值范围下限为-0.0258mm·s;冠心病组的六导切迹数为5.17±1.99个,最高频率为114.6±67.4Hz。PtfV1为-0.037±0.017mm·s,均明显高于正常人(p<0.001);③对冠心病的诊断,若以六导切迹数>4个为标准则敏感性、特异性、正确性分别为81.9%、98.2%、91.2%,若以最高频率>80Hz为标准则敏感性、特异性、正确性分别为66.3%、94.6%、82.4%,若以PtfV1<-0.026mm·8为标准则敏感性、特异性、正确性分别为69.5%、95.5%、80.1%;④不同ECG检测技术对冠心病诊断的敏感性排序为HFECG切迹计数法>HFECG频谱分析法>HSMECG的PtfV1法>常规ECG的PtfV1法。结果提示,HFECG和HsMECG是诊断冠心病敏感性、特异性高的无创伤性检测技术。 莫书荣 曾晓荣 刘智飞 杨燕 余华 周文关键词:心电图 冠心病 离子通道实验中膜片钳位仪参数的设置及应用 1998年 目的:熟悉膜片钳位仪的基本性能,掌握在各种细胞膜片方式下钳位仪参数的设置及应用。方法:对乳鼠心室肌细胞的钾电流、鸡胚心室肌细胞钙电流、人脐血红细胞的钾电流记录过程,设置钳位仪不同参数,观察其结果及影响。结果:电极阻值在4MΩ~8MΩ、封接阻抗在10GΩ~100GΩ时为最好封接;小片膜记录通道电流时,克服背景噪声,准确掌握电压钳或电流钳数值是关键;全细胞记录时补偿串阻90%,快电容成份4Pf~5Pf,慢电容成份4Pf~6Pf。结论:正确掌握不同膜片形式下的参数设置,可大大提高膜片钳实验的成功率,有助于实验数据分析处理。 刘智飞 曾晓荣 周文关键词:离子通道 心室肌细胞 正常家兔心率变异特点 2007年 目的:记录测定正常家兔在体和离体短程心率变异情况,探讨心脏自主神经功能的变化情况,为进一步研究家兔冠状动脉粥样硬化、冠脉痉挛时自主神经变化反映在心率变异性上的特点提供基础数据。方法:在体组用正交法记录胸前心电;离体组,采用兰氏(Langendorff)心脏灌流系统基础上,用正交悬浮电极法记录心电。采用Powerlab/8sp多道生理仪采集心电波。利用Chart模块对电信号进行短程心率变异分析。结果:正常家兔在体和离体组,短程心率变异分析结果值有明显不同。结论:正常家兔短程HRV特征较人体有明显区别,其频段取值范围有明显差异;在体与离体组HRV差异与神经体液调节因素有关。 潘璐 刘智飞 曾晓荣 杨艳 裴杰 周文关键词:心率变异性 家兔 血清药理学与膜片钳技术对川芎扩冠离子机制的探讨 被引量:2 2008年 目的通过观察分析川芎灌胃动物后分离的含药血清(含川芎血清)对猪冠状动脉血管条及平滑肌细胞BKCa的作用,旨在从细胞分子水平阐述其扩冠机制,也为探索建立血清药理学与膜片钳技术结合于中药研究的联合技术奠定基础。方法用膜片钳实验及冠状动脉血管条实验观察含川芎血清、川芎主要活性成分川芎嗪(阳性对照)和空白血清(阴性对照)对BKCa的作用以及对离体猪冠状动脉血管条的影响。结果在内面向外式和贴附式膜片上,含川芎血清和空白血清对BKCa通道无激活作用,但在内面向外式膜片上,阳性对照川芎嗪对BKCa通道具有激活作用,且川芎嗪具有对抗高钾(45mM)去极化所致的冠脉血管条收缩的作用,含川芎血清和空白血清无此作用。结论川芎嗪对BKCa通道具有直接激活作用,含川芎血清在体外实验中对BKCa通道无明显激活作用。 杨艳 杨艳艳 李妙龄 程俊 刘智飞 周文 裴杰 曾晓荣关键词:川芎 血清药理学 膜片钳技术 大电导钙激活钾通道 慢性心房颤动患者心房肌KChIP2基因mRNA水平的定量检测 被引量:2 2009年 目的心房颤动(房颤)是最为常见的快速性心律失常之一。钾通道相关蛋白2(K^+ channel interacting protein 2,KChIP2)是心肌细胞瞬时外向钾通道的重要辅助亚单位,在Ito发挥正常功能中起着重要的作用。报告采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术通过对房颤时KChIP2和Kv4.3基因mRNA水平进行定量研究,探讨KChIP2在房颤中的作用和对于瞬时外向钾通道的可能调控机制。方法(1)30例风湿性心脏病患者分为两组:窦性心律组(窦律组)13例,持续性房颤组(房颤组)17例,取其常规切除的右心耳组织作为研究对象;(2)提取心房肌组织总RNA,通过RT-PCR和TA克隆技术构建含有目的基因片段的质粒标准品;(3)以GAPDH为内参照基因,采用SYBR Green Ⅰ法实时荧光定量PCR技术检测持续性房颤和窦律患者KChIP2和Kv4.3基因mRNA水平。结果(1)标准曲线和熔解曲线:标准曲线线性关系良好,相关系数R^2〉0.99。熔解曲线呈明显单峰状,退火温度与预测值基本一致;(2)窦律组和房颤组KChIP2/GAPDH比值分别为0.2200±0.0388、0.1468±0.0452,房颤组KChIP2基因mRNA水平低于窦律组,P〈0.01;窦律组和房颤组Kv4.3/GAPDH比值分别为0.5257±0.1427、0.3946±0.1826,房颤组Kv4.3基因mRNA水平低于窦律组,P〈0.05。结论与窦律患者相比,房颤患者KChIP2基因和Kv4.3基因明显下调,KChIP2和Kv4.3基因下调是房颤时Ito电流下调的分子基础。 谭晓秋 杨艳 刘智飞 白志茹 周文 裴杰 陈桂兰 曾晓荣关键词:心房颤动 钾通道 基因表达 一种改进的人体心房肌细胞分离方法 被引量:11 2007年 本研究旨在探讨稳定的人体心房肌细胞分离方法,并观察分离的正常窦性心律(normal sinus rhythm,NSR)患者右心房肌细胞基本电生理特性。XXIV型蛋白酶和V型胶原酶两步法进行单个人体心房肌细胞分离,常规全细胞膜片钳技术记录正常的L-型钙通道电流(L-type calcium current,I_(Ca-L)、钠通道电流(sodium current,I_(Na)、瞬时外向钾通道电流(transient outward potassium current,I_(to1)和内向整流钾通道电流(inward rectifier potassium current,I_(K1)。此方法分离的人体心房肌细胞数量多,细胞膜光滑,折光性强,横纹清楚,耐钙,可用于膜片钳实验的占分离细胞总数的50%~605。该方法简单、稳定、可靠,酶用量少,分离的心肌细胞质量好,数量多,并能记录到多种离子通道电流,表明其具有正常的电生理功能,适合膜片钳实验。 李妙龄 曾晓荣 杨艳 刘智飞 丁银元 周文 裴杰关键词:心房肌 细胞分离 膜片钳 离子通道 川芎嗪对正常人体肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用 被引量:2 2011年 目的:研究川芎嗪((tetramethylpyrazine,TMP))对正常人体肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道宏观电流(large-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)的作用,探讨TMP对BKCa的作用机制。方法:用急性酶分离法分离人体肠系膜动脉平滑肌细胞,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录该细胞上的大电导钙激活钾通道宏观电流,并测试TMP对该电流的作用。结果:TMP在0.73、3.67mmol/L时可明显地可逆性地激活正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa,在0.73mmol/L浓度时,测试电压从-50~+60mV时差异都有统计学意义,其中测试电压在-50mV时,电流密度从0.25±0.03pA/pF增加到0.34±0.039pA/pF(P<0.01,n=12),测试电压在+60mV时,电流密度从8.37±1.75pA/pF增加到14.12±2.66pA/pF(P<0.01,n=12);TMP在3.67mmol/L时可明显地可逆性地激活正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa,测试电压从0~+60mV时差异都有统计学意义,其中测试电压在0mV时,电流密度从1.25±0.23pA/pF增加到1.90±0.31pA/pF(P<0.05,n=7),测试电压在+60mV时,电流密度从10.57±3.61pA/pF增加到20.32±4.68pA/pF(P<0.05,n=7)。但TMP在8.07mmol/L时可明显地可逆性地抑制正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa,测试电压从-60~+60mV时差异都有统计学意义,其中测试电压在-60mV时,电流密度从0.28±0.02pA/pF降低到0.15±0.04pA/pF(P<0.01,n=6),测试电压在+60mV时,电流密度从10.49±0.44pA/pF降低到1.83±0.68pA/pF(P<0.01,n=6)。结论:TMP在0.73、3.67mmol/L下,可激活正常人体肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道,而在8.07mmol/L时可明显地可逆性地抑制正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa。在低浓度和较高浓度下TMP对正常人体肠系膜血管平滑肌细胞上的BKCa有不同效应的实验结果,为TMP应用于临床提供了实验依据。 程俊 曾晓荣 李鹏云 李妙龄 谭晓秋 周文 杨艳关键词:川芎嗪 平滑肌细胞 大电导钙激活钾通道 酶分离猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道全细胞记录电学特性研究 被引量:14 2003年 目的 :观察急性酶分离猪冠脉平滑肌全细胞钙激活K+ 电流 (IKCa)特性及摸索可行的记录方法。方法 :采用常规膜片钳全细胞记录技术。结果 :分离的猪冠脉平滑肌细胞 (来自 15只猪的 4 7个细胞 ,膜电容 32 .3±8.8pF)上的主要K+ 电流为IKCa,此电流具电压依赖性和胞内游离Ca2 + 依赖性。IKCa选择性阻断剂Charybdotoxin(ChTX ,12 5~ 2 5 0× 10 - 9mol.L- 1 )可使外向电流降低 6 8± 8% (n =5 )。 10~ 2 0× 10 - 3mol.L- 1 TEA可阻断 74± 5 % (n =7)的外向电流。结论 :猪冠脉平滑肌细胞全细胞K+ 电流主要成分为IKCa,它与其它组织细胞报道的情况类似而又有独自的特点。我们的数据为猪冠脉平滑肌全细胞K+ 电流特性的认识提供了第一手资料 。 杨艳 曾晓荣 刘智飞 周文 李妙龄 胡平 裴杰关键词:钙激活钾电流 蝎毒 血管紧张素Ⅱ对心房颤动患者外向钾电流的作用 被引量:7 2007年 目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对心房颤动(AF)患者心房肌外向钾电流的作用及其受体机制。方法:采用急性酶解法获取游离心房肌细胞,应用膜片钳全细胞技术记录外向钾电流。结果:(1)在钳制电位-10mV~+50mV时,AF组瞬时外向钾电流(Ito1)密度明显低于窦性心律(SR)组(P<0.01),而持续性外向钾电流(Isus)密度与SR组无明显差异。(2)以0.1μmol/LAngⅡ灌流后,在钳制电位0mV~+50mV时,SR患者的Ito1密度明显低于灌流前(P<0.01),其动力学特性没有改变,AngⅡ对AF组Ito1的抑制作用明显低于SR组(P<0.01)。0.1μmol/LAngⅡ对两组Isus没有影响。(3)AngⅡ对Ito1的抑制作用可逆,10μmol/L缬沙坦(valsartan)以及1μmol/L沙拉新(saralasin)均能完全消除0.1μmol/LAngⅡ对Ito1的抑制,以10μmol/Lvalsartan灌流后,膜电位+50mV时Ito1的电流密度增加(22.46±4.30)%。结论:AngⅡ通过Ⅰ型受体(AT1R)介导,明显抑制心房肌细胞膜Ito1,是AF患者心房肌瞬时外向钾通道电重构的机制之一。 丁银元 曾晓荣 杨艳 刘智飞 李妙龄 周文 裴杰关键词:心房颤动 钾电流