孙会玲
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国农业大学农学与生物技术学院果树逆境生理与分子生物学北京市重点实验室更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 苹果花粉中与花柱S-RNase互作的γ-硫堇筛选及鉴定被引量:4
- 2011年
- 以‘国光’苹果(S1S2)花粉为材料,成功构建了酵母pGADT7-cDNA文库,转化效率约为1.2×106.μg-1,插入片段大小在300~2000bp之间。通过酵母双杂交方法,用苹果S2-RNase的C2HVC3区筛选文库获得一个长505bp的cDNA片段,经分析发现该cDNA序列上有一个261bp的开放阅读框(ORF),该ORF编码一个具N端信号肽的多肽,该成熟多肽由64个氨基酸组成,富含带正电荷的赖氨酸和精氨酸,其C端有8个半胱氨酸和一个γ-硫堇功能域,结构预测显示其具有一个α螺旋,3个β折叠,4个二硫键,由此,推断其为苹果γ-硫堇,命名为MdD1。RT-PCR分析发现:MdD1基因在‘国光’苹果叶片、萼片、花瓣、子房、花药和花柱等组织中都有表达,但花药中表达量最高。酵母双杂交结果表明MdD1除了与苹果S2-RNase的C2HVC3区互作外,还与S1-RNase的C2HVC3区,S1、S2-RNase的成熟多肽区存在互作。初步认为:苹果γ-硫堇可能通过与S-RNase非特异性互作,作为花粉非S因子参与自交不亲和反应。
- 孙会玲孟冬白松龄胡建芳李天忠
- 关键词:苹果S-RNASE自交不亲和酵母双杂交