孙守勋
- 作品数：12 被引量：42H指数：4
- 供职机构：解放军第201医院更多>>
- 发文基金：烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Toll样受体2的研究进展被引量：14
- 2008年
- 孙守勋蒲晓允
- 关键词：LPS信号传导配体天然免疫获得性免疫
- 重组腺病毒介导的sTLR2对LPS致炎小鼠抗炎效应的实验研究被引量：6
- 2010年
- 目的:观察携带Toll样受体2(TLR2)胞外区基因的重组腺病毒介导的sTLR2在小鼠体内的抗炎作用,为急性炎症反应的防治提供新的思路和治疗策略。方法:建立亚致死剂量脂多糖(LPS)所致炎症小鼠模型。将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、炎症对照组及重组腺病毒(Ad)TLR2实验组。AdTLR2于致炎前后,分别作用于小鼠,观察其对小鼠生存时间的影响,并应用ELISA对血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的含量进行检测,探讨AdTLR2对小鼠血清细胞因子水平变化的影响。结果:重组AdTLR2作用于炎症小鼠模型后,实验组小鼠的生存时间与炎症对照组比较相对延长,并且实验组中血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的水平均较炎症对照组显著降低(P<0.05)。结论:重组AdTLR2能够使LPS所致炎症小鼠模型的生存时间相对延长,并能够降低炎症小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的含量,提示AdTLR2在活体内可以分泌sTLR2蛋白发挥免疫调节作用并能降低血清中炎性细胞因子的水平,具有一定的抗炎作用。
- 孙守勋李强石妍刘静蒲晓允
- 关键词：TOLL样受体2LPS腺病毒抗炎
- 乳腺癌细胞过表达iASPP对顺铂作用的影响被引量：5
- 2008年
- 目的构建过表达iASPP的乳腺癌细胞株,分析过表达iASPP对顺铂(cis-dichlorodiamine platinum,DDP)作用下乳腺癌细胞的影响。方法采用RT-PCR方法在乳腺组织中扩增出iASPP,转染入MCF-7,G418筛选获得过表达iASPP的乳腺癌细胞株,MTT和流式细胞仪分析过表达iASPP的乳腺癌细胞株在DDP作用下增殖和凋亡情况。结果成功构建了过表达iASPP的乳腺癌细胞株,过表达iASPP可明显降低DDP对乳腺癌细胞增殖的抑制作用(P<0.01),并降低细胞凋亡的百分数(P<0.01)。结论过表达iASPP可以明显降低乳腺癌细胞MCF-7对DDP作用的敏感性。
- 李强程湘孙守勋刘莹
- 关键词：IASPP顺铂乳腺癌细胞
- 重组腺病毒介导的sTLR2和sTLR4体外抗炎效应的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的观察重组腺病毒介导的sTLR2和sTLR4对炎症模型细胞因子表达水平的影响。方法将人单核细胞系THP-1细胞随机分为正常对照组、炎症对照组、重组腺病毒AdTLR2组、重组腺病毒AdTLR4组、重组腺病毒AdTLR2+AdTLR4组。AdTLR2和AdTLR4单独或者联合作用于各组细胞,通过RT-PCR方法检测TLR2和TLR4 mRNA表达,应用ELISA法对上清液中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的含量进行检测,探讨AdTLR2和AdTLR4对LPS诱导的THP-1细胞上清细胞因子表达水平的影响。结果通过RT-PCR方法检测THP-1细胞转染AdTLR2+AdTLR4后,TLR2和TLR4能够获得高表达。AdTLR2和AdTLR4单独和联合作用于LPS所致炎症细胞后,细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的含量较炎症对照组显著降低,且联合作用较单独作用组进一步降低,具有统计学意义(P<0.05)。结论重组腺病毒AdTLR2和AdTLR4能够降低LPS所致炎性细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的含量,并且联合使用的抗炎效果优于AdTLR2或AdTLR4的单独作用。提示制备的重组腺病毒能够分泌sTLR2和sTLR4,能有效抑制炎性细胞的活化,减少细胞因子的释放,具有一定的抗炎作用。
- 刘静孟冬娅孙守勋蒲晓允
- 关键词：腺病毒细胞因子LPS
- 鲍氏不动杆菌的临床分布特征及耐药性监测被引量：5
- 2013年
- 目的了解鲍氏不动杆菌感染的临床分布和耐药现状,为医院感染的控制和指导临床合理用药提供帮助。方法收集医院2008-2011年从临床送检标本中分离的499株鲍氏不动杆菌,常规方法结合ATB Expression微生物分析仪鉴定细菌,药敏试验采用CLSI/NCCLS推荐的K-B纸片扩散法。结果 2008-2011年鲍氏不动杆菌的检出率分别为8.04%、9.65%、11.97%和14.46%,呈现逐年上升的趋势;临床标本来源以呼吸道标本为主占74.2%;临床科室分布以ICU为主,占61.3%,且ICU的检出率呈现出逐年上升的趋势;药敏结果显示鲍氏不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势,并显示出多药耐药性,其中多黏菌素B、米诺环素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率相对较低,分别为1.4%、34.5%和37.5%。结论鲍氏不动杆菌已成为医院感染重要病原菌,对多种抗菌药物耐药,临床应加强耐药性监测,合理使用抗菌药物,有利于预防及控制医院感染的暴发流行。
- 孙守勋石妍白晓
- 关键词：鲍氏不动杆菌耐药性医院感染
- 腺病毒介导的人TLR2基因体内抗炎作用的实验研究
- 背景与目的：
炎症是人类多种疾病中一种最常见的病理过程，可发生于机体的任何部位和组织，是机体对感染或创伤等引起的内环境紊乱的正常反应。但是过度的炎症反应会引发全身炎症反应综合症，导致机体组织细胞自身性损害，表现...
- 孙守勋
- 关键词：TOLL样受体2内毒素脓毒症腺病毒同源重组分子克隆
- 文献传递
- 联合检测尿β_2-MG、NAG及AAP在地震挤压伤肾损害中的意义被引量：3
- 2010年
- 目的探讨尿β_2-微球蛋白(β_2-MG)、N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、丙氨酸氨肽酶(AAP)联合检测对诊断地震挤压伤伤员肾脏早期损害的临床价值。方法对本院收治"5.12"汶川地震伤员进行检测,采用免疫比浊法检测尿β_2-MG的含量,连续监测法检测尿NAG和AAP的活性。结果地震挤压伤伤员尿中β_2-MG、NAG、AAP水平均显著高于对照组(P<0.01);单纯检测上述指标中的1项或2项阳性率较低,联合检测3项阳性率较高。结论检测尿β_2-MG、NAG、AAP是早期肾损害的敏感指标,联合检测对地震挤压伤伤员肾脏损伤的早期诊断和疗效观察有重要的意义。
- 李强吴杰红孙守勋蒲晓允
- 关键词：Β2微球蛋白乙酰氨基葡糖苷酶挤压综合征
- 人TLR2和TLR4胞外区cDNA的克隆
- 2008年
- 目的从脂多糖诱导的外周血单个核细胞克隆人Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)胞外区cDNA。方法用不同浓度脂多糖在不同时间刺激单个核细胞后提取总RNA,RT-PCR方法半定量测定TLR2和TLR4的表达,应用pUCm-T载体克隆胞外区cDNA,双酶切以及DNA测序进行鉴定。结果单个核细胞在四种浓度脂多糖刺激3h、6h和12h后,TLR2和TLR4表达并不相同。15μg/mL脂多糖作用6hTLR2表达最高,10μg/mL脂多糖作用3hTLR4表达最高。经RT-PCR扩增TLR2和TLR4胞外区cDNA分别为1700bp和1900bp,T载体克隆、酶切鉴定及测序分析后证实,目的片段与GenBank中序列一致。结论脂多糖的诱导对外周血单个核细胞TLR2和TLR4表达有显著影响,并且成功克隆了胞外区cDNA。
- 孙守勋李强刘静白晓蒲晓允
- 关键词：LPS单个核细胞胞外区基因表达
- 1人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的构建并鉴定人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体。方法以pUCm-TLR4质粒为模板,运用PCR技术扩增TLR4胞外区目的基因片段,片段回收后经酶切连接穿梭质粒pAdTrack-CMV上,获得重组腺病毒质粒pAdTrack-CMV-TLR4.通过KpnⅠ和HindⅢ双酶切,测序鉴定后,将鉴定正确的质粒经PmeI酶切线性化后,转化到含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态细菌BJ5183中,进行同源重组,卡那抗性筛选阳性克隆,提取质粒,用脂质体介导转染293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR技术,Western blot等方法鉴定重组腺病毒,并进行病毒滴度测定。结果人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体构建正确,病毒滴度为3.2×109pfu/mL。结论成功构建了人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体,为下一步实验奠定基础。
- 刘静李强孙守勋李玲柴若楠蒲晓允
- 关键词：腺病毒载体胞外区
- 人Toll样受体2细胞外区基因重组腺病毒穿梭载体的构建及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:克隆人Toll样受体2(TLR2)细胞外区基因,并构建含有目的基因的重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-TLR2。方法:应用RT-PCR方法从人外周血单个核细胞中扩增TLR2细胞外区基因,克隆入pUCm-T载体并转化大肠埃希菌感受态DH5α,提取质粒进行酶切鉴定及DNA测序分析后,用KpnⅠ和HindⅢ双酶切,将目的片段定向克隆至经相同处理的pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒中,双酶切鉴定并测序验证。结果:RT-PCR扩增得到约1000bp的目的基因片段,TA克隆后测序鉴定与GenBank中的序列一致,经酶切连接成功地将目的基因插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中。结论:成功克隆了人TLR2细胞外区基因,并构建了含目的基因的重组腺病毒穿梭载体。
- 孙守勋李强石妍刘静蒲晓允
- 关键词：TOLL样受体2重组腺病毒穿梭质粒单个核细胞
