孙昱皓
- 作品数:4 被引量:18H指数:2
- 供职机构:上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 激光捕获显微切割和基因芯片技术用于肿瘤实质细胞转录组的构建被引量:4
- 2008年
- 目的:联合应用激光捕获显微切割和基因芯片技术构建纯化肿瘤实质细胞转录组。方法:应用激光捕获显微切割技术从肿瘤组织冰冻切片中获取纯化肿瘤实质细胞,提取RNA并对其进行线性扩增得到aRNA,合成cRNA探针后与全基因组基因芯片Affymetrix HG—U133.Plus 2.0 Gene—Chip杂交构建全基因组表达谱。结果:从5例结肠癌组织样本中各获取了3mm。细胞,抽提获得RNA118.4~300.3ng,混合后取100ng进行线性扩增获得aRNA 7ug。基因芯片各项质控标准符合基因表达谱芯片操作指南,共有18205条转录本表达,代表15276个基因。结论:联合应用激光捕获显微切割和全基因组基因芯片技术可构建纯化肿瘤实质细胞转录组。
- 孙昱皓樊军卫裘国强周崇治彭志海
- 关键词:结肠肿瘤激光显微切割分子探针技术
- 纯化结肠癌组织基因表达谱的变化被引量:12
- 2007年
- 目的通过构建纯化正常结肠上皮组织和结肠癌组织基因表达谱筛选结肠癌相关基因。方法应用激光捕获显微切割-线性扩增-全基因组基因芯片流程对结肠癌组织及其相应正常结肠上皮组织进行实质细胞纯化并构建基因表达谱,筛选差异表达基因。结果纯化正常结肠上皮细胞和结肠癌细胞分别有14 939和15 276条基因表达。肿瘤组织差异表达基因中4倍以上者208条,其中上调基因72条,下调基因136条。上调基因前20条和下调基因前20条中,10条基因的表达变化在结肠癌中的意义已被证实,另有13条基因的表达变化在其他肿瘤研究中与以前报道一致。结论细胞纯化技术结合基因芯片构建基因表达谱可准确、高效的筛选结肠癌差异基因。
- 樊军卫周崇治裘国强唐华美孙昱皓彭志海
- 关键词:结肠癌基因表达基因芯片
- 激光捕获显微切割技术在肿瘤研究中的进展
- 2008年
- 激光捕获显微切割技术(LCM,Laser Capture Microdissection)是目前最先进的组织纯化技术,LCM结合各种基于细胞、DNA、RNA、及蛋白质的分子生物学技术成功运用于肿瘤学研究的各个方面,通过对切割后细胞的基因组,转录组,蛋白组等分析研究后得到了大量有用的结论。本文就其在肿瘤学研究中的应用进行综述。
- 孙昱皓彭志海
- 关键词:激光捕获显微切割肿瘤学
- 趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系被引量:2
- 2008年
- 目的观察趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其临床意义,探讨基质衍生因子SDF-1(CXCL12)-CXCR4生物学轴在结直肠癌侵袭转移中的作用。方法免疫组织化学法检测53例结直肠癌组织及27例正常黏膜组织中CXCR4的表达及分布,并分析高表达CXCR4与结直肠癌患者临床病理特征的关系。反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)、Western印迹方法检测27例结直肠癌肿瘤组织、正常黏膜及5例肝转移灶内CXCR4 mRNA表达及CXCR4蛋白表达水平。结果53例结直肠癌组织中CXCR4表达阳性率为73.6%,高表达率(表达超过50%细胞)为45.3%;有淋巴结转移组CXCR4高表达率(65.4%)明显高于无淋巴结转移组(25.9%)(P〈0.01)。并与肿瘤血管淋巴管浸润有关。随着临床分期的增加,肿瘤组织中CXCR4高表达率有升高趋势,但差异无统计学意义(P〉0.05)。CXCR4的表达与患者肿瘤部位、大小、浸润深度无关(P〉0.05)。27例新鲜结直肠癌组织中CXCR4mRNA及蛋白表达水平明显高于相应的正常黏膜组织(P〈0.01);5例肝转移灶组织中CXCR4表达显著高于对应的原发灶(P〈0.01)。结论趋化因子受体CXCR4是一类参与结直肠癌病程进展的重要分子,CXCL12-CXCR4信号通路有望成为结直肠癌治疗的新靶点。
- 于亮沈云李继坤孙昱皓王一成张建海
- 关键词:结直肠肿瘤受体趋化因子CXCR4肝转移