常会波
- 作品数:32 被引量:99H指数:5
- 供职机构:首都儿科研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 肾母细胞瘤中L1反转座子甲基化的研究
- 肾母细胞瘤是最常见的儿童胚胎性恶性肿瘤,探明其早期发病机理对早期诊断和治疗有重要意义。基因组和重复序列的DNA低甲基化被认为在肿瘤发生中可早于遗传和表型。L1反转座子低甲基化与多种肿瘤发生发展有关,但作用机制尚未明确。最...
- 常会波
- 18例非移植急性髓细胞白血病患儿预后相关因素分析被引量:2
- 2019年
- 目的回顾性分析18例非移植急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)患儿的细胞遗传学及分子学特征及阿糖胞苷治疗强度对总体生存率的影响。方法选取2011年3月至2016年8月经首都儿科研究所附属儿童医院血液科初诊的非移植AML患儿18例。对患儿进行以形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学为基础的MICM分型诊断。患儿完成诱导治疗获得完全缓解后,应用不同剂量的阿糖胞苷进行巩固治疗,4种剂量分别是:①每次阿糖胞苷1g/m^2,12h一次,每疗程8次,共5个疗程,阿糖胞苷累积总量40g/m^2;②每次阿糖胞苷2g/m^2,12h一次,每疗程6次,共4个疗程,阿糖胞苷累积总量48g/m^2;③每次阿糖胞苷1g/m^2,12h一次,每疗程8次,共2个疗程,之后继续以3个疗程:每次阿糖胞苷2.5g/m^2,12h一次,每疗程6次,阿糖胞苷累积总量61g/m^2;④每次阿糖胞苷1g/m^2,12h一次,每疗程8次,共2个疗程,之后继续以3个疗程:每次阿糖胞苷2.0g/m^2,12h一次,每疗程6次,阿糖胞苷累积总量52g/m^2。观察患儿的复发率,2年无事件生存及5年无事件生存情况。结果 18例患儿中有5例复发,且复发均发生在初诊后24个月以内。5年无事件生存者7例,2年无事件生存者13例。复发的5例患儿中有2例为AML1-ETO阳性,且巩固治疗时的阿糖胞苷总量仅有24g/m^2。另有2例伴MLL易位的患儿出现复发,分别为t(9;11)(p22;q23)、MLL-AF9阳性、阿糖胞苷累积量48g/m^2和t(11;19)(q23;p13.1)、MLL-ELL阳性、阿糖胞苷累积量38g/m^2。另1例复发患儿为t(6,9)(p23;q34)、DEK-CAN阳性和阿糖胞苷累积量61g/m^2。结论对于inv(16)(p12q22)及t(8;21)(q22;q22)的患儿,传统化疗会更受益,且巩固化疗中大剂量阿糖胞苷>2g/m^2每次,12h一次,每疗程6次,至少3个疗程,总累积量>48g/m^2治疗方案对这部分病例是安全且有效的;t(9;11)(p22;q23)及复杂核型需结合是否伴有其他预后的良恶性因素而决定治疗方案;除t(9;11)(p22;q23)外的
- 王宇阳李君惠胡涛张蕾李娟娟张朝霞冯顺乔张淑一师晓东刘嵘常会波
- 关键词:急性髓细胞白血病儿童染色体核型基因突变
- TGF-β和IGF-1信号通路调控肾母细胞瘤细胞增殖机制探讨被引量:7
- 2017年
- 目的肾母细胞瘤是一种高发的儿童实体瘤,发病率占儿童恶性肿瘤8%~10%,多发生于<5岁儿童,有研究表明某些信号通路可调控其增殖过程。本研究探讨TGF-β和IGF-1信号通路是否共同参与调控肾母细胞瘤细胞的增殖过程。方法采用siRNA转染实验将TGFBR1-siRNA和IGF1R-siRNA转至肾母细胞瘤细胞株G401,以转染不同siRNA分为TGFBR1-siRNA组和IGF1R-siRNA组,siRNA无关序列(non-siRNA)转染组作为对照组,每组设6个复孔。MTS方法检测TGFBR1-siRNA和IGF1R-siRNA对细胞增殖率的影响,蛋白质印迹法检测TGF-β信号通路TGFBR1及下游蛋白p-ERK、SMAD2/3和p-AKT蛋白表达情况;蛋白质印迹法检测IGF-1信号通路IGF1R及下游蛋白p-AKT蛋白表达情况。ELISA法检测细胞上清中FGF9蛋白表达。结果抑制TGFBR1和IGF1R72和96h后,细胞的增殖率受到抑制,对照组增殖率设为100%。与其相比,转染TGFBR1-siRNA 72h后的实验组和对照组的增殖率分别为(80±14)%和(100±7)%,实验组低于对照组,P=0.034;转染IGF1R-siRNA 72h后实验组和对照组的增值率分别为(85±21)%和(100±7)%,实验组低于对照组,P=0.028。转染TGFBR1-siRNA 96h后的实验组和对照组的增殖率分别为(81±13)%和(100±11)%,实验组低于对照组,P=0.021;转染IGF1R-siRNA 96h后实验组和对照组的增殖率分别为(82±17)%和(100±11)%,实验组低于对照组,P=0.038。抑制TGFBR1后,与non-siRNA组相比,下游蛋白FGF-9、p-ERK、SMAD2/3和p-AKT明显受到抑制。TGFBR1-siRNA转染72h后,实验组细胞上清中FGF9蛋白表达量显著下降,实验组为(533.85±54.64)ρg/mL,对照组为(587.34±46.83)ρg/mL,P=0.041;96h后实验组FGF9蛋白表达量仍显著低于对照组,实验组为(495.03±59.26)ρg/mL,对照组为(605.34±49.28)ρg/mL,P=0.018。TGFBR1-siRNA转染48h后,p-ERK、SMAD2/3和p-AKT蛋白表达量出现降低;72h后,p-ERK和SMAD2/3蛋白表达量仍降低。与non-siRNA转染对照组相比,IGF1R-siRNA转染72和96h后,p-AKT蛋白表达量出现降低。�
- 刘卓何峰李媛媛欧阳胜荣曹丁丁常会波马斐斐吴建新
- 关键词:肾母细胞瘤信号通路IGF1R肿瘤增殖
- 半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶荧光定量测定及保存条件对酶活性的影响
- 2010年
- 目的探讨荧光定量测定导致经典型半乳糖血症的半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(GALT)的方法,以及不同保存条件对酶活性的影响。方法选取来本院就诊的半乳糖血症患儿及其父母为研究对象,随机选取健康体检儿童作为对照,采集肝素抗凝血,用定量荧光法测定GALT活性,并观察不同保存温度和不同时间的GALT活性的变化。结果本方法表明酶反应1hr时可以分辨出完全失活型和杂合子,诊断出75%的半乳糖血症患儿,并检测出4例杂合子。同时发现随着时间的推移GALT活性在下降,室温影响最大。结论本方法简单,准确,快捷,费用低廉适合于半乳糖血症的诊断和杂合子的检出,但要注意高温和保存时间对样品的影响。本法也适合于新生儿大规模筛查和孕妇杂合子的检出。
- 常会波王立文朱彦丽李媛媛刘哲伟张霆吴建新
- 表达谱基因芯片筛选巨指脂肪组织差异表达基因被引量:1
- 2015年
- 目的利用表达谱基因芯片初步研究巨指脂肪组织mRNA表达谱差异性,并筛选验证差异基因,为后续研究提供基础数据。方法自2012年4月至12月,我们共收集5例巨指症患儿正常和病变脂肪组织。提取组织RNA后,检测总RNA的质量和纯度,合格样品RNA反转录制备含荧光分子cv5标记的cDNA探针,与含有30968点cDNA的表达谱芯片杂交后扫描荧光强度,筛选出差异表达的基因并进行分析,选取5个基因利用实时定量PCR技术验证差异表达。结果使用mRNA表达谱芯片筛选出了1725个差异表达基因,其中上调基因801个,下调基因924个。实时定量PCR结果显示4个基因表达上调,1个基因表达下调,表达趋势与芯片结果一致。结论巨指症患儿中受累脂肪组织和正常脂肪组织基因表达存在差异,分析这些表达基因有助于我们探索巨指发病机制,为疾病治疗提供理论依据。
- 李文军常会波田光磊陈山林田文赵俊会杨勇
- 关键词:脂肪组织基因表达谱差异表达基因
- 依菲维伦联合放线菌素D治疗黑色素瘤细胞作用机制的研究
- 黑色素瘤恶性程度高,现有的治疗方案对部分病例的治疗无法起到满意的疗效,治疗方案有待优化和提高。我们利用MTT 实验发现依菲维伦和常见的化疗药物放线菌素D 联合治疗效果优于单独治疗效果。我们利用Western Blot 实...
- 常会波
- 关键词:黑色素瘤细胞放线菌素D
- 神经内分泌瘤标志物的检测方法的建立及其临床应用
- 目的:香草扁桃酸(VMA)、高香草酸(HVA)和5-羟吲哚乙酸(5HIAA)是目前临床检验神经内分泌瘤的最佳标志物。本研究应用高效液相色谱-库仑阵列电化学法测定尿液中的神经内分泌瘤标志物,以及连用紫外检测法同时测定肌酐浓...
- 常会波李媛媛刘卓欧阳胜荣吴建新
- 文献传递
- 基因组不稳定、印记基因和错配修复基因甲基化状态与神经管畸形发生相关
- 目的:通过观察NTDs中是否存在基因组不稳定现象,印记基因H19DMR1和IGF2DMR0和错配修复基因hMLH1,hMSH2启动子区甲基化状态是否发生变化,探索遗传稳定性及特定基因甲基化异常与NTDs发生的可能联系.方...
- 刘卓李媛媛欧阳胜荣常会波吴建新
- 关键词:印记基因错配修复基因甲基化状态
- 脱氢奎尼酸合成酶基因aroB在大肠杆菌中的克隆和表达被引量:3
- 2004年
- 目的 :克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因aroB ,并测定其生物学活性。方法 :根据大肠杆菌中aroB基因的序列设计了一对引物 ,利用PCR技术扩增得到aroB基因 ,将其克隆入pGEM Teasy载体中 ,以双脱氧法进行测序 ,然后再克隆入高效原核表达载体pBV2 2 0 ,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达 ,并测酶的生物活性。结果 :构建了aroB基因的克隆和表达重组子 ,经SD序列调节后 ,aroB基因获得高效表达 ,SDS PAGE图谱显示新增 38.8× 10 3 蛋白带 ,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为 5 .4。结论 :实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达 ,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础。
- 常会波刘云吴建新徐琪寿
- 关键词:大肠杆菌基因表达
- 半乳糖血症患儿半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因突变的鉴定与分析被引量:4
- 2013年
- 目的从分子水平研究半乳糖血症患儿半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶基因(GALT基因)突变情况。方法选取2例确诊为半乳糖血症的患儿,分离其外周血淋巴细胞,提取总RNA,RT—PCR扩增GALT基因全长cDNA;将PCR产物亚克隆至T—easy载体,筛选阳性克隆并测序;同时,采用限制性片段多态性的方法将PCR产物进行酶切鉴定。结果2例患儿均出现了未报道过的突变。其中1例患儿GALT基因1006位A突变为G,导致M336V氨基酸突变;另1例患儿GALT基因779位A突变为T,导致H260L突变。这2例突变均为碱基替换形成的错义突变,且均为杂合型突变。结论基因诊断可提高半乳糖血症诊断的准确性,并为该病的产前筛查、造血干细胞移植甚至基因治疗提供有价值的参考。
- 王宇阳刘哲伟常会波王立文吴建新
- 关键词:半乳糖血症基因突变