彭娟 作品数:32 被引量:65 H指数:6 供职机构: 福建出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 福建出入境检验检疫局科技计划项目 国家质检总局科技计划项目 转基因生物新品种培育专项 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 农业科学 自动化与计算机技术 更多>>
一种利用超声波处理提取河豚鱼DNA的方法 本发明涉及一种利用超声波处理提取河豚鱼DNA的方法,所述方法为:1)合成引物对;2)河豚鱼DNA样品中加入CTAB裂解缓冲液,在功率100%的超声波清洗器中65℃恒温温浴处理,处理时间为5-25 min,各处理重复3次;... 陈文炳 翁国柱 邵碧英 缪婷玉 江树勋 彭娟文献传递 河豚毒素DNA适配子的筛选与结构分析 被引量:9 2012年 人工合成113个碱基的随机ssDNA文库,以河豚毒素为靶物质,采用SELEX技术进行12轮筛选,测定各轮富集文库与河豚毒素的亲和力,其中第10轮富集文库与河豚毒素的亲和力最高。将第10轮富集文库进行克隆、测序,用DNAMAN软件分析克隆子的一级和二级结构,并测定克隆子与河豚毒素的亲和力。结果表明:与河豚毒素结合力高的DNA适配子经过10轮筛选后得到富集,成功筛选到最高亲和力的DNA适配子G10。 邵碧英 高兴 杨方 陈文炳 缪婷玉 彭娟关键词:河豚毒素 适配子 SELEX 沙门氏菌核酸检测试剂盒的评价 被引量:2 2015年 采用室内技术参数验证和协同实验的方式对商品化沙门氏菌核酸检测试剂盒在食品中沙门氏菌核酸检测上的包容性、排他性、灵敏度、特异性、准确度、检测限、耐变性、批间变异进行评价。评价结果表明,试剂盒检测结果与国家标准方法检测结果总体上无显著差异,能满足食品样品的检测要求;但对蔬菜制品的灵敏度较其他食品低,与国家标准方法有显著差异,因此该商品化试剂盒不适用于蔬菜制品中沙门氏菌核酸的检测。 邵碧英 董建 陈彬 陈文炳 黄晓蓉 郑晶 缪婷玉 彭娟关键词:沙门氏菌 环介导等温扩增 样品前处理对大米及米制品转基因成分荧光PCR检测结果的影响 被引量:1 2013年 [目的]通过分析样品前处理对大米及米制品转基因成分荧光PCR检测结果(Ct值)准确性的影响,建立优化的前处理方法。[方法]样品DNA提取采用CTAB法,设置3种样品颗粒细度与3种样品DNA提取温育时间的组合共9种处理,应用双因素方差分析的F检验分析处理间Ct值的差异显著性,根据t检验结果,筛选出DNA提取与荧光PCR检测效果最佳的前处理样品细度与CTAB温浴时间组合。[结果]F检验结果:在9种处理组合中,处理组合之间的大米及米制品DNA提取浓度都存在极显著差异;不同处理对大米内源基因GOS与外源CaMV 35S基因的Ct值影响极显著;对于米制品白粿干与米粉干,CTAB温浴时间对内源基因GOS与CaMV35S基因Ct值的影响达到显著或极显著水准,而样品颗粒大小仅对白粿干的CaMV 35S基因Ct值有显著影响,对米粉干的GOS与CaMV 35S基因及白粿干GOS的Ct值的影响都不显著。t检验结果表明最佳处理组合为:大米颗粒细度>100目,CTAB缓冲液温浴时间>8h;白粿干样品颗粒细度>50目,CTAB缓冲液浸泡温浴时间≥4h;米粉干颗粒细度>50目,CTAB缓冲液浸泡温浴时间>8h。 陈文炳 张冰 王志纯 邵碧英 缪婷玉 彭娟 江树勋关键词:样品前处理 转基因成分 荧光PCR检测 转基因玉米GA21品系LAMP检测引物的筛选及方法的建立 被引量:7 2014年 根据转基因玉米GA21品系的特异序列设计了3套环介导等温扩增(LAMP)引物。通过反应温度优化、特异性测定,筛选到1套特异性好的LAMP引物,包括内引物、外引物和环引物各1对。在LAMP反应体系中加入SYBR Green I荧光染料,在实时荧光定量PCR仪上进行实时监测,对筛选到的LAMP引物进行反应条件、反应体系的优化,建立了转基因玉米GA21品系LAMP检测方法。对该方法的特异性、灵敏度、稳定性进行评价,结果表明建立的LAMP检测方法能特异、灵敏、稳定地检测转基因玉米GA21品系,检测限达到0.05%。将建立的LAMP检测方法应用于玉米及其制品中GA21品系的检测,检测结果与实时荧光PCR法的结果完全一致。 邵碧英 陈文炳 曾莹 陈彬 郑晶 缪婷玉 彭娟关键词:环介导等温扩增 特异性检测 基于多条DNA条形码的6个鳗鱼物种鉴别方法 本发明提供基于多条DNA条形码的6个鳗鱼物种鉴别方法,采用4对引物,用于扩增6种鳗鱼的16S rRNA、Cyt b、CO Ⅰ编码基因的4个DNA部分片段(<I>COⅠ</I>基因2条片段),从这4条片段中截取碱基数分别为... 陈文炳 邵碧英 缪婷玉 彭娟 张志灯 陈彬 江树勋文献传递 超声波处理对水稻种子转基因成分荧光PCR检测的影响 2016年 以转基因水稻科丰6号含量0.1%(m/m)与0.01%(m/m)的水稻种子为样品,对影响检测结果的DNA提取过程中样品CTAB裂解缓冲液常规温育与超声波温育处理进行比较分析。结果表明,在不同样品颗粒细度的样品中,无论温育时间10 min、30 min还是1 h,CTAB缓冲液超声波温育处理与常规温育处理比较,获得的DNA质量浓度有明显提高,转基因成分NOS、Cry1Ab、Kf6(Ub-C)的荧光PCR检测Ct值差异达到极显著,超声波温育处理30 min、1 h可基本达到常规温育处理4 h或8 h的样品荧光PCR检测效果,使得水稻种子转基因成分荧光PCR检测时间至少节省3-7 h,大幅度提高了检测效率。 缪婷玉 邵碧英 彭娟 江树勋 陈文炳关键词:超声波处理 水稻种子 转基因成分 实时PCR 水稻种子样品前处理对转基因成分荧光PCR检测的影响 被引量:3 2015年 以转基因水稻科丰6号不同含量的水稻种子为样品,对影响检测结果的主要前处理措施,包括样品研磨颗粒细度与DNA提取过程中样品CTAB裂解缓冲液温育时间等,进行分析筛选.结果表明,样品颗粒细度与CTAB缓冲液温育时间的不同处理组合对提取的DNA含量影响极显著,其中,样品颗粒细度>100目与CTAB缓冲液温育时间>8 h(过夜)处理的样品DNA提取效果与荧光PCR检测结果均最佳.采用最佳前处理组合,样品的主要转基因成分(Ca MV 35S、NOS、Cry1Ab)检出限从通常的转基因含量质量分数0.01%降到0.001%,使得水稻种子转基因成分荧光PCR检测灵敏度提高10倍,大幅度提高了检测结果的准确性. 王志纯 张冰 邵碧英 江树勋 缪婷玉 彭娟 陈文炳关键词:水稻种子 转基因成分 实时荧光PCR 多基因DNA条形码鉴定6个鳗鱼物种 被引量:6 2018年 建立6种鳗鱼的物种多基因DNA条形码精准鉴定方法。以鳗鱼DNA为模板,采用3对通用引物对6种鳗鱼的3个基因(16S rRNA、Cyt b、COⅠ)部分DNA片段进行聚合酶链式反应扩增、测序,结果6种鳗鱼各获得3条16S r DNA(638~643 bp)、Cyt b(464~466 bp)、COⅠ(705~707 bp)基因部分DNA序列,从中选取各物种序列同源的片段设计3对新引物对6种鳗鱼的16S rRNA、Cyt b、COⅠ基因部分DNA片段进行PCR扩增,其产物大小分别为504~507、400、609 bp,再从各片段中筛选出具有6种鳗鱼物种特异性强的、碱基数分别为262、280、300 bp的3条DNA片段序列,作为6种鳗鱼物种的3个基因的标准DNA条形码,应用DNAMAN V6软件进行同源性分析,并通过Gen Bank数据库的比对验证,制定了供检测实践用的同源率判别指标,建立鳗鱼物种的多基因条形码检测方法。应用该方法对30个待检鳗鱼样品进行检测,结果表明,各样品基于3个基因DNA条形码的比对,符合同源率指标,物种判别结果互相吻合,从而精准判别样品的所属物种。该方法稳定、精准、易于操作,可应用于6种鳗鱼的物种鉴定,值得推广。 陈文炳 邵碧英 缪婷玉 彭娟 陈彬 张志灯 江树勋关键词:RRNA基因 CYT B基因 LAMP法检测转基因大豆A2704-12品系 被引量:12 2013年 根据转基因大豆A2704-12品系的特异序列设计了4套环介导等温扩增(LAMP)引物。通过反应温度优化、特异性测定,筛选出1套特异性强的LAMP引物。对筛选到的LAMP引物进行反应条件、反应体系的优化,建立了转基因大豆A2704-12品系的LAMP检测方法。结果表明:建立的LAMP检测方法能特异、稳定地检测转基因大豆A2704-12品系,检测限达到0.1%(m/m)。应用建立的LAMP方法检测大豆及其制品中转基因大豆A2704-12品系,检测结果与实时荧光聚合酶链式反应(PCR)结果完全一致。 邵碧英 陈文炳 曾莹 陈彬 郑晶 缪婷玉 彭娟关键词:环介导等温扩增 特异性检测