徐江红
- 作品数：13 被引量：11H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院更多>>
- 发文基金：上海市科委科研计划项目国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黏膜免疫壳聚糖包裹的PsaA纳米颗粒预防肺炎链球菌感染的实验研究
- 研究背景:肺炎链球菌是引起脑膜炎、败血症、菌血症性肺炎等侵袭性疾病以及中耳炎、鼻窦炎等非侵袭性疾病最为常见的一种病原体,在全球范围内每年大约有160万人死于肺炎链球菌疾病,其中大部分来自发展中国家。目前,市场上预防肺炎链...
- 徐江红
- 关键词：肺炎链球菌
- 文献传递
- 新型肺炎链球菌疫苗研究进展被引量：1
- 2009年
- 肺炎链球菌是肺炎、脑膜炎、败血症、中耳炎和鼻窦炎的主要致病菌。目前针对肺炎链球菌疾病的预防主要是以多糖为基础的23价多糖疫苗和7价多糖蛋白结合疫苗，但因其有血清型的限制，应用有很大的局限性。因此以肺炎链球菌表面毒力因子或蛋白为基础的、无血清型限制的肺炎链球菌蛋白疫苗将成为新型肺炎链球菌疫苗发展的方向，此文综述了肺炎链球菌蛋白疫苗的研究进展。
- 徐江红陈兵
- 关键词：疫苗细菌蛋白质类
- 中耳炎肺炎链球茵自溶素核酸疫苗的制备及其免疫原性研究
- 目的构建肺炎链球菌自溶素(LytA)核酸疫苗并研究其在动物体内的免疫原性。方法用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因(LytA),然后将其分别插入到pVAXI真核表达载体和pET32a(+)原核表达载体...
- 徐江红章德广陈兵郭建李忠明
- 文献传递
- 初免-加强免疫策略显著增强肺炎链球菌PsaA核酸疫苗的免疫原性
- 目的研究肺炎链球菌核酸疫苗初免-蛋白加强免疫策略能否增强肺链球菌核酸疫苗在动物体内的免疫原性。方法从肺炎链球菌基因组中克隆出psaA基因,将其分别插入到pVAX1真核表达载体和pET28a原核表达载体中,分别构建出表达P...
- 章德广王正敏徐江红郭建李忠明范小勇
- 文献传递
- 肺炎链球菌自溶素基因的克隆、表达及蛋白纯化被引量：3
- 2009年
- 目的克隆肺炎链球菌自溶素(LytA)基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化。方法用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a(+),构建pET32a(+)-LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,亲和层析法纯化目的蛋白,将获得的蛋白用Western blot鉴定。结果扩增出的DNA序列与GenBank中的LytA基因序列一致,成功构建了pET32a(+)-LytA重组质粒并在大肠埃希菌中高效表达,所表达的蛋白经Western blot证实为肺炎链球菌自溶素融合蛋白。结论成功克隆了肺炎链球菌自溶素基因,并将其在大肠埃希菌中表达、纯化,为新型肺炎链球菌疫苗的研制奠定了基础。
- 徐江红陈兵章德广郭建顾凌澜
- 关键词：肺炎链球菌
- 肺炎链球菌自溶素核酸疫苗的制备及其免疫原性研究被引量：2
- 2009年
- 目的构建肺炎链球菌自溶素(pneumococcal autolysin,LytA)核酸疫苗,并研究其免疫原性。方法采用聚合酶链反应方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将该基因插入到pVAX1真核表达载体中,构建表达LytA的重组质粒,制备成超螺旋比例大于90%的核酸疫苗。实验组:BALB/c小鼠5只,对其分3次肌内注射核酸疫苗(100μg);对照组:BALB/c小鼠5只,肌内注射pVAX1空载体(100μg)3次。分别采集小鼠血清,采用间接酶联免疫吸附方法测定血清LytA特异性抗体水平。结果扩增出的LytA基因(957 bp)与基因库中LytA的编码序列(957 bp)一致。成功构建了LytA核酸疫苗。实验组小鼠的血清Ly-tA抗体水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功克隆了LytA基因,制备了LytA核酸疫苗,后者可在小鼠体内诱导较强的特异性体液免疫反应。
- 徐江红王正敏陈兵章德广戴文佳朱美美徐晨媚
- 关键词：中耳炎链球菌肺炎疫苗
- 小鼠肺炎链球菌psaA核酸疫苗的制备及其初免-蛋白加强免疫策略的研究被引量：1
- 2009年
- 目的制备肺炎链球菌核酸疫苗，初步探讨初免一蛋白加强免疫策略能否增强疫苗在动物体内的免疫原性。方法从肺炎链球菌基因组中克隆出肺炎球菌表面黏附素A（pneumococcalsurfaceadhesinA，PsaA）基因，将其分别插入到真核表达载体pVAX1和原核表达载体pET28a中，分别构建出表达PsaA的核酸疫苗及其基因工程表达菌株。pVAX1-psaA核酸疫苗体外转染293T细胞，并通过反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）加以鉴定。实验组5只BALB／c小鼠经核酸疫苗免疫3次后，PsaA纯化蛋白加强免疫1次，对照组5只小鼠经pVAXl空载体免疫3次后，生理盐水加强免疫1次，分别采集血清测定两组抗PsaA抗体水平。结果成功克隆出psaA基因并实现其亚克隆；所构建的psaA核酸疫苗序列正确，同时实现了PsaA蛋白的一步亲和纯化；psaA核酸疫苗可在293T真核细胞中成功表达；核酸疫苗初免后蛋白加强组的抗PsaA抗体滴度高于对照组（t=87．518，P〈0．05）。结论成功构建出psaA核酸疫苗，采用核酸疫苗初免一蛋白加强免疫策略能增强肺炎链球菌psaA核酸疫苗的免疫原性。
- 章德广王正敏徐江红陈兵戴文佳范小勇
- 关键词：中耳炎链球菌疫苗
- IL-17A在肺炎链球菌急性中耳炎黏膜免疫保护中的作用
- 目的 探讨IL-17A在肺炎链球菌急性中耳炎黏膜免疫保护中的作用。方法 6～8周龄SPF级BALB/c小鼠在感染前24h腹腔注射200 μgIL-17A抗体中和体内的IL-17A,注射相同剂量的Ig2a抗体作为对照组(I...
- 徐江红戴文佳刘向梁琼李雯
- 关键词：肺炎球菌急性中耳炎黏膜免疫
- 5-氨基酮戊酸对人鼻咽癌CNE细胞的光动力作用
- 2009年
- 目的观察及检测5-氨基酮戊酸(5-ALA)对于人鼻咽癌CNE细胞的光动力作用。方法通过5-ALA与CNE细胞共培养后荧光检测确定适合的培养时间及药物浓度,从而观察5-ALA光动力治疗(5-ALA-PDT)后细胞的形态变化及坏死、凋亡情况,并且通过MTT检测5-ALA浓度及激光器能量密度与细胞生存率的关系。结果5-ALA与CNE细胞共培养的适合时间为12 h,最大有效浓度1 mmol/L。5-ALA-PDT后能观察到细胞凋亡,能量密度越大,变化出现越早。并且,光动力后早期细胞主要凋亡,晚期细胞逐渐坏死。当激光能量密度不变时,细胞死亡率随药物浓度增高而增高,但并不呈线性相关;而5-ALA小于1 mmol/L且固定不变时,细胞生存率随能量密度增高而降低,且呈线性相关。结论5-ALA对CNE细胞有明显的杀伤作用,并且PDT后的细胞生存率与5-ALA浓度及激光的能量密度相关。
- 顾凌澜仇荣星张菁田洁徐江红
- 关键词：5-氨基酮戊酸鼻咽癌光动力作用
- 肺炎链球菌表面黏附素A的原核表达和抗原性分析被引量：3
- 2009年
- 目的应用基因工程技术制备肺炎链球菌表面黏附素A(pneumococcal surface adhesin A,PsaA),并分析其抗原性。方法根据基因库中报道的psaA基因序列,从肺炎链球菌基因组中扩增出psaA基因,连接到原核表达载体pET28a中,构建出重组质粒pET28a-psaA,转化大肠杆菌BL21(DE3),采用镍柱亲和层析法纯化PsaA蛋白,Western-blot分析其抗原性。结果克隆出的psaA基因同基因库中报道的psaA基因序列一致。成功构建出重组质粒pET28a-psaA,基因测序证实重组质粒构建正确。成功表达和纯化出PsaA蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白分子量为37-kDa,最终得到纯度较高的蛋白,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析显示在37-kDa处见到目的蛋白条带。结论利用基因工程技术可以克隆出psaA基因,并成功表达和纯化出PsaA蛋白,其抗原性良好。
- 章德广王正敏徐江红陈兵戴文佳李忠明
- 关键词：中耳炎疫苗
