施农农
- 作品数:40 被引量:382H指数:11
- 供职机构:杭州师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- Na^+/H^+逆向转运蛋白与植物耐盐性关系研究进展被引量:30
- 2006年
- Na+/H+逆向转运蛋白与植物的耐盐性有密切的关系。在高等植物体内,主要存在两种Na+/H+逆向转运蛋白,分别为位于细胞质膜上的逆向转运蛋白SOS1,以及存在于液泡膜上的AtNHX1。质膜Na+/H+逆向转运蛋白主要负责Na+的外排,液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白主要负责把Na+区隔化入液泡。过量表达质膜Na+/H+逆向转运蛋白SOS1或液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白AtNHX1能够明显提高植物的耐盐性。对植物中Na+/H+逆向转运蛋白及其与植物耐盐性之间的关系最新研究进展作一概述。
- 陈观平王慧中施农农陈受宜
- 关键词:转基因植物耐盐性NA^+/H^+逆向转运蛋白
- 建兰花叶病毒TGB1和TGB2基因的原核表达被引量:2
- 2012年
- 建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)是严重危害兰科植物的主要病毒之一。本研究根据NCBI登录序列号(AB197937)的CymMV-TGB1,-TGB2基因分别设计特异性引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从感染CymMV蝴蝶兰病叶中扩增TGB1,TGB2基因,并将目的基因插入pGEX-4T3中,构建相应的原核表达载体。将表达载体转入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后成功表达出目的蛋白;SDS-PAGE及Western blot检测证实目的蛋白分别是融合GST的CymMV TGB1和TGB2蛋白。两个蛋白的表达为下一步抗体制备以深入开展CymMV TGB1和TGB2功能研究奠定了基础。
- 邓衍福陈芝娟程晓非章鹏程胡凤施农农
- 关键词:建兰花叶病毒原核表达WESTERNBLOT
- 镉中毒水稻苗期体内总蛋白量和POD、CAT活性的变化被引量:24
- 2000年
- 镉对水稻种子苗期生长、体内蛋白质的分解抑制、过氧化物酶 (POD)、过氧化氢酶 (CAT)活性抑制在低于致死浓度下均呈明显的剂量效应 (R >0 .88)。镉对种子造成伤害的临界浓度为 0 .0 5mmol/L ,此时种子根芽生长势明显弱于无镉害对照 (P <0 .0 1 ) ,并比对照推迟 2天达到 1 0 0 %萌芽率 ,过氧化氢酶活性与对照差异显著 (P <0 .0 5 ) ,但是总蛋白分解和过氧化物酶活性与对照差异不明显 ;0 .5~ 1mmol/LCd+ + 胁迫 5天的种子仅长弱芽不长根 ,萌芽率为零 ,各生长指标与对照均呈极显著差异 (P <0 .0 1 ) ;镉对种子的致死浓度为 >1mmol/L。镉对水稻种子苗期的生长生理抑制推断是由于镉抑制了蛋白酶、肽酶的分解活性 ,抑制了POD、CAT参与的戊糖磷酸途径 (PPP)的运转 ,造成构建幼叶、幼根的细胞成份缺乏所致。POD、CAT活性的有时不规则增减甚至高于对照 ,可能是机体抵御逆境的一种自卫体现。萌芽第 5天二酶活性回落或增长迟缓是机体由异养转向自养的体现 。
- 施农农
- 关键词:总蛋白POD镉中毒水稻苗期
- 兰属Cymbidium植物ISSR遗传多样性分析被引量:51
- 2008年
- 将简单重复序列区间扩增多态标记(inter-simple sequence repeats,ISSR)技术应用于16种兰属的遗传多样性分析,15个引物共扩增出836条带,其中有227条多态带,多态百分比为27.2%。UPGMA聚类结果显示:春兰与春剑的亲缘关系最近,而兔耳兰与其他15种兰属植物的距离最远。ISSR聚类结果与传统分类结果基本相似,表明该技术能在分子水平上对传统兰属分类进行必要补充。
- 吴振兴王慧中施农农赵艳
- 关键词:兰属植物ISSR
- 镉胁迫下水稻种子的萌芽生长及体内水解酶的活性变化被引量:52
- 1999年
- 利用室内培养方法研究了不同镉离子浓度胁迫下水稻种子的萌芽状况。结果表明,在镉胁迫下,水稻种子萌芽力受挫,生长势削弱,直至完全失活,与种子体内淀粉酶(Amy) ,酸性磷酸酯酶(Acp) 这二种主要水解酶活性受镉的剂量抑制效应有关。镉对水稻种子造成伤害的临界浓度为0 .05 m mol/L,抑制种子萌芽的浓度为0 .5 m mol/L,使种子完全失活的致死浓度为5 m m ol/L。对镉胁迫的反应Amy 较Acp 敏感,但二者活性大小均可作为鉴定水稻受镉害程度的酶学生理指标。
- 施农农陈志伟贾秀英
- 关键词:种子水解酶萌芽生物监测
- Bar表达框基因载体高频转化栽培小麦被引量:2
- 2007年
- 为探讨无载体主干序列(细菌DNA)的表达框基因直接转化栽培小麦的可行性和有效性,对栽培小麦(Triticum aestivum L.)进行了bar表达框基因的基因枪转化.通过试材培养、外植体分离、bar表达框基因分离提取和纯化、基因枪轰击、诱导分化与再生培养、再生苗核酸抽提、转基因检测及除草荆涂抹试验等方法,筛选到23株全部来自幼胚愈伤的独立再生苗,其中18株显示bar表达框基因的整合,且均表现抗除草荆效应.基因型鄂麦12号的转化频率(1.55%)高于鄂恩1号(0.87%),两基因型在1100psi轰击压下的转化频率均高于900psi,其中鄂麦12号达到3.51%,明显优于鄂恩1号,且高于常规小麦基因枪的平均转化频率0.50%~1.00%.鄂麦12号幼胚在1100psi轰击压下转化bar表达框基因可获高转化效应.袁明受体基因型、外植体类型、轰击压等因素在优化表达框基因转化体系中具重要作用.推断表达框基因转化方法具有片段小、环境安全、转化效率高、整合模式简单、表达高效等优势,在作物遗传转化中具有广泛应用前景.
- 施农农何光源李克秀王慧中
- 关键词:BAR
- 能够同时检测CymMV和ORSV的RT-PCR检测试剂盒及方法
- 本发明提供了一种能够同时检测CymMV和ORSV的RT-PCR检测试剂盒,主要包括特异性简并引物以及PCR反应试剂,所述简并引物核苷酸序列如下:上游引物:5’-TYAAMAMTKKCGAGAAAG-3’;下游引物:5’-...
- 施农农章鹏程杨科府陈芝娟
- 文献传递
- 6-BA与NAA不同浓度配比对大花蕙兰原球茎诱导的影响被引量:12
- 2012年
- 以大花蕙兰茎尖为外植体,研究6-BA与NAA浓度梯度配比对大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及分化的影响.结果表明:6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L浓度配比下,大花蕙兰茎尖存活率达到93.3%;6-BA0.8mg/L+NAA 0.4mg/L浓度配比下,原球茎诱导率达到85.8%;6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L浓度配比下,原球茎增殖系数达到4.59;6-BA 0.8mg/L+NAA 0.5mg/L浓度配比下,原球茎出芽率达到87.5%.首次报道采用6-BA 0.8mg/L+NAA 0.5mg/L浓度配比组合适合大花蕙兰茎尖培养,可同时获得较高的原球茎诱导率(80.8%)和出芽率(87.5%),比目前已报道的最佳原球茎诱导率(72.7%)和出芽率(76.7%)提高8%以上.
- 章鹏程陈瑜邓衍福陈芝娟施农农
- 关键词:大花蕙兰茎尖6-BANAA原球茎
- 植物细胞质雄性不育及其在育种中的应用被引量:8
- 2006年
- 细胞质雄性不育的研究在杂种优势利用上具有重要的实践意义。主要以能量为切入点阐述了植物线粒体引起细胞质雄性不育的作用机制,对提出的2种主要假说做了相关分析;从转录后调控和翻译后调控2个层面对育性恢复的机制作了详细的阐述;综述了近年来细胞质不育在植物育种上的应用所取得的成就。随着对多个物种全基因组和线粒体基因组序列测序的完成以及比较基因组学和生物信息学方法的建立和不断完善,相信对细胞质雄性不育机制的研究会有很大的进展。
- 胡滨陈观平施农农卢江杰王慧中
- 关键词:育种学基因工程细胞质雄性不育
- 转WMV-2 CP基因西瓜的安全性评价被引量:8
- 2009年
- 以转WMV-2CP基因西瓜(Citrullus lanatus var. lanatus)为例,对转基因食品进行了安全性评价。对转WMV-2CP基因西瓜进行小鼠急性和亚急性毒性试验、致突变试验以及30 d喂养试验。结果表明,小鼠经口急性毒性半数致死量LD50>150 g.kg-1,属实际无急性毒性物质;经微核实验、精子畸变实验及Ames实验均未发现有致突变作用;30 d喂养试验,90 g.kg-1、180 g.kg-1、270 g.kg-1各剂量组小鼠发育、增重、食物利用率、血常规、脏体比及病理组织学观察等各项指标与基础对照组比均无显著性差异。初步表明转WMV-2CP基因西瓜对小鼠没有毒性,属安全食品。
- 应奇才薛大伟徐祥彬施农农王慧中
- 关键词:毒性试验致突变试验