李栋博
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
- 供职机构：贵阳医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 耗散结构与骨髓干细胞移植
- 2005年
- 论述了“耗散结构”理论及其对生命科学研究的指导作用和意义。应用耗散结构理论深 入分析骨髓移植对机体功能的维持和恢复,并从不同角度和层面剖析在更深层面上耗散结构作为开 放系统进行物质与能量吸收和交换的含义,提出在一定条件下相似耗散结构之间可以存在熵的转 移,纵向分析了骨髓移植所体现出的系统与子系统间的熵变关系,深化和扩展了耗散结构中熵的概 念。
- 李栋博杨呈兰
- 关键词：骨髓移植干细胞
- 桂皮酸诱导K562细胞凋亡及其机制的初步研究被引量：4
- 2006年
- 目的探讨桂皮酸对K562细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法应用MTT测出 IC50,应用免疫荧光显微镜,DNA Ladder,流式细胞仪,检测凋亡的发生,应用RT-PCR琼脂糖凝胶电泳检测bcl-2基因表达的差异。结果经MTT检测发现IC50为1 mmol／L,24 h后药物基本达到了较佳的效果,且免疫荧光显微镜、DNA Ladder、流式细胞仪检测均有凋亡的发生,RT-PCR结果显示,经桂皮酸处理24h后,bcl-2基因表达明显降低。结论1 mmol／L的桂皮酸作用24 h后可以引起K562 细胞发生凋亡,并且bcl-2基因表达下调是引起凋亡的原因之一。
- 孙海燕王季石李栋博方琴李辰蕊
- 关键词：细胞凋亡K562细胞桂皮酸
- 含MGMT及增强荧光蛋白真核表达载体的构建被引量：1
- 2005年
- 目的克隆O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因,测序鉴定正确后构建含增强荧光蛋白(EGFP)的真核表达栽体。方法利用RT-PCR从人正常肝细胞中克隆MGMT并与克隆栽体pGEM-T载体相连接。经PCR、酶切及测序鉴定证明克隆成功后用限制性内切酶切下MG- MT片段,同时酶切载体pIRES2-EGFP。凝胶纯化回收后重组构建真核表达载体并鉴定。结果测序结果显示所克隆的编码序列与GeneBank公布MCMT cDNA序列一致。真核表达栽体的PCR及酶切鉴定结果与预期结果一致。结论成功克隆了耐药基因MGMT并构建了含EGFP编码序列的真核表迭载体pIRES2-MGMT-EGFP,为MGMT的进一步相关研究奠定了坚实基础。
- 李栋博王季石孙海燕方琴李伟达徐伟
- 关键词：O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶耐药基因真核表达基因克隆
- 烷化剂耐药基因导入对真核细胞保护性作用的研究
- 目的克隆人氧六甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因并构建表达载体,导入真核细胞进行表达,研究MGMT对真核细胞保护性作用。方法利用RT-PCR克隆人肝细胞MGMT基因并重组构建真核表达载体。脂质体法导入K562...
- 李栋博王季石方琴孙海燕
- 关键词：耐药基因细胞转染
- 文献传递
- MGMT在BCNU诱导骨髓瘤细胞耐药机制中作用的研究
- ＜正＞目的研究与探讨MGMT（O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶）作为烷化剂抗性基因与骨髓瘤细胞多药耐药机制的相关性。方法 RT-PCR方法从人肝组织中获得MGMT基因并克隆入pGEM-T载体。用限制性内切酶EcoR Ⅰ...
- 李栋博王季石孙海燕李伟达
- 文献传递
- MGMT基因导入对真核细胞保护作用的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的克隆六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因并构建表达载体,导入真核细胞表达,研究MGMT对真核细胞保护作用。方法利用RT-PCR克隆人肝细胞MGMT基因并重组构建真核表达载体。脂质体法导入K562细胞及人外周血单个核细胞(PBMNC),用实时定量PCR法检测目的基因的表达。MTT法检测转基因细胞对烷化剂耐药性的改变。结果成功克隆人MGMT基因,转染K562细胞和PBMNC后,转基因组MGMT mRNA表达水平分别是转染空载体组的13．4倍(P<0．01)和4倍(P<0．01)。Western blot结果显示MGMT蛋白表达在转基因组中明显高于转空载体组及对照组。耐药性实验结果显示目的基因导入后,K562稳定转染细胞和PBMNC瞬时转染细胞对烷化剂的半数抑制浓度分别提高到原来的7倍和2倍。结论MGMT基因导入可使真核细胞对烷化剂的耐药性得到不同程度的增强,从而对细胞起到保护作用。
- 李栋博王季石方琴孙海燕
- 关键词：基因克隆基因MGMT细胞转染抗药性
- 六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因导入增强外周血单个核细胞抗药性
- 2006年
- 目的研究六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因导入后人外周血单个核细胞(PBMC)对烷化剂抗药性的改变。方法利用脂质体法将含人MGMT基因的真核表达载体导入体外培养的外周血单个核细胞,实时PCR及Western blot检测目的基因mRNA及蛋白水平的表达。四氮唑蓝法(MTT)检测细胞对硝卡芥抗药性的改变。结果转染目的基因组在mRNA及蛋白水平与转空载体及对照相比均为高表达。MTT法结果显示转目的基因组对硝卡芥的IC50是转空载体组及对照组的两倍。结论MGMT基因导入能够增强外周血单个核细胞对烷化剂的抗性从而起到保护作用。
- 李栋博王季石方琴
- 关键词：单个核细胞耐药基因烷化剂
- Trail蛋白、地塞米松及其联合作用对 多发性骨髓瘤细胞诱导凋亡作用的比较性研究
- ＜正＞目的研究Trail蛋白、地塞米松、及Trail蛋白与地塞米松联合作用诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的异同,并进一步bcl-2基因在其中的作用。方法用Trzol从脾脏组织中提取RNA,进行 RT-PCR,琼脂糖凝胶电泳分离...
- 孙海燕李栋博王季石
- 文献传递
- 烷化剂耐药基因真核表达质粒的构建及在K562细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 目的克隆烷化剂耐药基因M GM T,构建真核表达质粒并导入真核细胞进行表达,筛选稳定表达的细胞系。方法从人肝组织中克隆M GM T基因后重组构建真核表达粒质pIRES2-M GM T-EGFP并鉴定。通过脂质体法将目的基因导入K 562细胞,应用RT-PCR及W estern b lot检测目的基因的表达并筛选稳定转染的细胞克隆。结果成功克隆M GM T并构建了真核表达质粒pIRES2-M GM T-EGFP。转染细胞后M GM T在mRNA及蛋白水平均有表达,而对照组则为阴性。结论含烷化剂耐药基因M GM T真核表达质粒的构建及转染后表达的成功为烷化剂耐药基因的相关研究奠定了良好的基础。
- 李栋博王季石方琴孙海燕李伟达
- 关键词：烷化剂质粒药物耐受性
- 人细胞色素P450酶基因多态性与白血病被引量：2
- 2004年
- 白血病发病机制及治疗的相关性研究历来是人们关注的焦点。作为人体内主要Ⅰ相代谢酶的细胞色素P450酶在血液系统恶性肿瘤发生、发展及转归方面的作用已经成为本领域中新的研究靶点。本文论述基因多态性与恶性肿瘤发生及治疗的相关性,尤其是与血液系统恶性肿瘤的关系,重点介绍国外近年有关细胞色素P450酶基因多态性及其与白血病易感性和治疗的相关研究进展。
- 李栋博王季石
- 关键词：细胞色素P450酶基因多态性白血病恶性肿瘤
