李畅
- 作品数：17 被引量：8H指数：2
- 供职机构：泸州医学院心血管医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省科技计划项目四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖尿病患者肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的变化被引量：4
- 2014年
- 目的探讨糖尿病患者肠系膜动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)大电导钙激活钾通道(BKCa)的电流变化,阐明糖尿病对肠系膜动脉的损伤及其细胞电生理机制。方法将患者分为血糖正常的对照组(n=19)和糖尿病组(n=11),利用单通道膜片钳及全细胞穿孔膜片钳技术记录两组患者肠系膜动脉VSMCs BKCa电流的变化,并比较增加浴液中钙离子浓度[(Ca2+)i]至10-7mol/L时两组BKCa单通道电流的变化。结果在全细胞穿孔膜片钳下,测试电压范围内,膜电位分别为+50mV和+60mV时,对照组的电流密度明显高于糖尿病组(P<0.05),前者为(20.85±2.66)pA/pF(Vm=+50mV,n=10)和(27.49±2.71)pA/pF(Vm=+60mV,n=10),后者为(12.38±1.58)pA/pF(Vm=+50mV,n=6)和14.87±1.63pA/pF(Vm=+60mV,n=6)。在内面向外式膜片下(Vm=+40mV,[Ca2+]free=0),对照组BKCa单通道活性明显强于糖尿病组(P<0.05),对照组Tc=(622.6±173.8)ms,NPo=0.021±0.006(n=8),糖尿病组Tc=(1 912.8±346.6)ms,NPo=0.005±0.001(n=8)。增加浴液中[Ca2+]i至10-7 mol/L时,对照组BKCa通道活性明显增强(P<0.05),Tc=(194.1±40.1)ms,NPo=0.058±0.014(n=7)。但糖尿病组BKCa单通道电流幅度,通道开放时间,关闭时间和通道平均开放概率均无明显变化。结论糖尿病患者人VSMCs BKCa单通道开放概率减少和电流密度降低,且对Ca2+反应性降低,这可能是糖尿病肠系膜动脉功能损伤的原因。
- 文静程俊李鹏云李畅杨艳
- 关键词：糖尿病大电导钙激活钾通道肠系膜动脉
- 人心房肌小电导钙激活钾通道在HEK293细胞上的表达与电生理学特性被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆人心房肌小电导钙激活钾通道亚型2(SK2),构建稳定表达SK通道的HEK293细胞系并研究其基本电生理学特性。方法:以人心房肌为标本,通过逆转录,重叠PCR法和定向克隆构建真核表达载体pIRES-hrGFP-SK2,采用脂质体法转染至HEK293细胞并筛选稳定表达的细胞系;使用全细胞和单通道膜片钳技术进行电流记录,研究其基本电生理学特性。结果:全细胞和单通道膜片钳均能在表达的HEK293细胞上记录到SK2通道电流,其电流具有明显的胞内钙离子依赖性。结论:成功构建稳定表达人心房肌SK2通道的HEK293细胞系,为以后研究通道功能活动奠定了基础。
- 谭晓秋陈桂兰李畅李妙龄李涛杨艳井上勋曾晓荣
- 关键词：小电导钙激活钾通道基因转染心房颤动
- 大电导钙激活钾通道在血管舒缩调控中的功能作用及其临床意义研究
- 曾晓荣杨艳周小波李鹏云刘智飞谭晓秋程俊李妙龄黄文俊李涛毛亮兰欢文静陈桂兰周文陈蓎葶周锐曾博魏燕李畅王娜黄鹂裴杰
- 该成果由3个国家自然科学基金、1个卫生部、2个科技厅、4个教育厅、1个卫生厅和1个科技局共12项目产生的成果组成：国家自然科学基金（1994-1996，NO：39370270）：冠状动脉血管平滑肌钙激活钾通道活动的电生理...
- 关键词：
- 关键词：病理生理学疾病防治
- 钙激活钾通道α亚单位与高血压关系的研究
- 2014年
- 了解调节血管张力的靶点及内源性活性物质配体的BKca通道的特性,有助于深入研究通道特性及临床治疗药物筛选。用脂质体(lipofectamine2000)转染法转染BKca表达质粒pcDNA3.1-BKca筛选稳定表达单克隆细胞系研究其基本的生理学特性,同时建立BKca动力学研究模型。建立稳定转染BKca通道α亚单位的HEK293细胞系,通过膜片钳记录到与天然细胞BKca电生理BKca相似电流,可以用于分析通道动力模型及药物动力学作用机制。成功建立稳定转染BKca通道α亚单位的HEK293细胞系,膜片钳实验证明具有典型的BKca电生理特性,同时建立细胞系可以较好的运用于BKca通道功能调控研究和动力学参数分析。
- 李畅曾晓荣
- 关键词：大电导钙激活钾通道Α亚单位高血压
- 血管紧张素II对人肠系膜动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的激活效应
- 2013年
- 本文旨在研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BKCa)的影响,探讨AngⅡ在分子水平扩张血管的作用机制。采用单通道膜片钳及全细胞穿孔膜片钳技术观察人肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa对AngⅡ的反应性;采用RT-PCR技术确定人肠系膜动脉上AngⅡ受体基因的表达情况。在细胞贴附式膜片下(Vm=+40mV),直接加入AngⅡ(100nmol/L),人肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa的活性无明显变化;经AngⅡ1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)特异性阻断剂缬沙坦(10μmol/L)预处理后,再分别加入25、100和250nmol/L的AngⅡ,BKCa的开放概率明显增加,呈现出浓度依赖性。缬沙坦预处理后,当加入100nmol/LAngⅡ时,BKCa的开放概率由0.010±0.003增至0.039±0.015,平均关闭时间由(2729.5±808.6)ms减至(487.7±182.5)ms(n=11,P<0.05),但平均开放时间和电流幅值在给药前后无明显变化。BKCa被AngⅡ(100nmol/L)激活后,再加入AngⅡ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)特异性阻断剂PD123,319,BKCa的活性受到抑制,开放概率由0.016±0.003减至0.004±0.001(n=5,P<0.05),而通道平均开放时间、平均关闭时间和电流幅值在给药前后均无明显变化。另外,将人肠系膜动脉平滑肌细胞经缬沙坦和PD123,319共同处理后再加入AngⅡ(100nmol/L),BKCa的活性无明显变化。在全细胞穿孔膜片钳下,平滑肌细胞经缬沙坦(10μmol/L)预处理后,在测试的电压范围内,AngⅡ(100nmol/L)对膜电位从60mV到+30mV时BKCa电流密度均无明显影响,而在+40、+50和+60mV时,BKCa电流密度分别从(9.03±2.23)pA/pF、(12.88±2.55)pA/pF和(17.26±2.84)pA/pF增加到(12.47±2.22)pA/pF、(18.71±2.51)pA/pF和(27.21±3.12)pA/pF(n=6,P<0.05)。经RT-PCR证实人肠系膜动脉上有AT1R和AT2R这两种AngⅡ受体基因的表达。上述结果提示,AngⅡ对经缬沙坦预处理的人肠系膜动脉平滑肌细胞BK
- 文静程俊李鹏云毛亮岳晓兰李畅杨艳
- 关键词：2型受体大电导钙激活钾通道
- 丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对人肠系膜动脉血管平滑肌细胞BKCa激活效应的研究
- 目的：研究丹参酮Ⅱ-A磺酸钠(Sodium tanshinoneⅡ-A sulfonate,DS-201)对人肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(Large conductance calcium-activated po...
- 文静程俊李畅杨艳
- 一种丹参酮ⅡA磺酸钠脂质体及其制备方法
- 本发明公开了一种丹参酮ⅡA磺酸钠脂质体。该脂质体采用丹参酮ⅡA磺酸钠、磷脂、胆固醇为原料，并调节各原料的重量份配比，将药物活性成分丹参酮ⅡA磺酸钠包埋在脂质体中，药物产品质量高，粒径均匀，稳定性好，包封率高，溶出性好，可...
- 杨艳程俊郁蕾毛亮黄文俊谭晓秋李畅曾晓荣
- 文献传递
- 表达在HEK293细胞上的BK_(Ca)通道基本特性与动力学调控研究
- 2013年
- 目的构建稳定表达人血管平滑肌大电导钙激活钾通道(BKCa)的293细胞系,并研究其基本电生理学特征和动力学模型。方法通过脂质体(lipofectamine 2000)转染法转染BKCa表达质粒pcDNA3.1-BKα和(或)pIRES-BKβ1,筛选稳定表达的单克隆细胞系。使用膜片钳多种记录方式研究其基本电生理学特性,同时建立BKCa动力学研究模型。结果构建稳定转染BKCa通道α和(或)β1亚单位的HEK293细胞系,通过膜片钳能够记录到具有与天然细胞BKCa电生理学特性相似的电流,包括大电导特性[内面向外式构型下单通道电导为(216.38±3.55)pS]、电压依赖性、Ca2+依赖性、钾离子选择性和200nmol/L IbTX(BKCa特异性阻断剂)阻断;联合表达β1亚单位能够明显增加通道的开放时程。采用inside-out宏观电流记录方式可以记录到明显的尾电流。可以用于分析通道激活、去激活等动力学模型及药物动力学作用机制。结论成功构建稳定转染BKCa通道α和(或)β1亚单位的HEK293细胞系。膜片钳实验证明具有典型的BKCa电生理学特性,同时建立的细胞系可以很好的用于BKCa通道功能调控研究和动力学参数分析。
- 谭晓秋程俊程秀丽李畅毛亮曾晓荣曹济民杨艳
- 关键词：大电导钙激活钾通道血管动力学
- 阿托伐他汀治疗50例冠心病伴高脂血症患者的疗效观察
- 2011年
- 目的：观察阿托伐他汀对冠心病伴高脂血症患者的临床疗效和对血脂的影响.方法：100例冠心病伴高脂血症患者随机分为治疗组和对照组各50例,治疗组采用阿托伐他汀,对照组采用氟伐他汀,观察两组的临床疗效和治疗前后血脂变化情况及安全性.结果：治疗组总有效率为90%.对照组总有效率为82%.治疗组疗效优于对照组;两组治疗后血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平明显下降,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平升高,与治疗前比较有统计学差异（P〈0.05）,治疗组疗效优于对照组.结论：阿托伐他汀治疗冠心病伴高脂血症疗效确切.
- 李畅王德华
- 关键词：冠心病高脂血症阿托伐他汀氟伐他汀
- α-actinin2增加SK2通道蛋白在HEK293细胞膜上的表达
- 目的:小电导钙激活钾通道(Small Conductance Ca2+activated K+Channels,SKchannels)在哺乳动物心肌组织中高度表达,参与心肌细胞动作电位复极末期,对动作电位时程和形态有重要...
- 李涛陈唐葶谭晓秋李妙龄李畅杨艳曾晓荣
