杨平常 作品数:107 被引量:369 H指数:8 供职机构: 深圳大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 深圳市科技计划项目 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 环境科学与工程 更多>>
重组花生过敏原Ara h2复合疫苗治疗食物过敏的疗效和作用机理研究 被引量:1 2015年 构建花生过敏小鼠模型,经腹部皮下注射抗原疫苗治疗小鼠,观察治疗小鼠体征;测定小鼠血清中特异性Ig E和lg G2a水平;检测小鼠脾细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ水平,进行小鼠小肠切片HE染色,以探讨新型抗原疫苗Ara h2-IL-18对由花生引起的肠粘膜过敏反应小鼠模型的免疫治疗疗效及作用机理.实验表明:新型疫苗Ara h2-IL-18特异性免疫治疗可使小鼠过敏症状减轻,治疗后小鼠血清中特异性Ig E水平降低,特异性Ig2a水平升高,小鼠脾细胞培养上清液中IL-4水平下降和IFN-γ水平上升.另外,肠道组织HE染色显示,Ara h2-IL-18治疗组小鼠小肠绒毛结构较清晰,顶部略有糜烂现象.新型疫苗Ara h2-IL-18可减轻过敏小鼠肠道炎症反应,具有特异性治疗花生过敏疾病的潜能. 刘玲 闫浩 李兵 何韶衡 杨平常 刘志刚关键词:ARA H2 疫苗 乙酰胆碱对鼻粘膜微循环的通透性研究 被引量:2 1996年 对变应性鼻炎26例用50%乙酰胆碱行鼻粘膜激发试验,鼻分泌物量明显多于正常对照组。60只大鼠随机分成乙酰胆碱组,阿托品组和对照组3组,用伊文思蓝法鼻粘膜血管通透性。结果表明乙酰胆碱直接刺激鼻粘膜,大鼠鼻粘膜血管通透性显著增高,用阿托品对鼻粘膜预处理阻断这种效果。 杨平常 刘涛关键词:鼻粘膜 变应性鼻炎 微循环 乙酰胆碱 通透性 树突状细胞活化或耐受诱导物的研究进展 被引量:6 2016年 树突状细胞(DC)是连接先天性免疫和固有免疫的重要桥梁,不同微环境,其成熟状态不同,成熟DC(m DC)可促进免疫应答,耐受型DC(t DC)则诱导免疫耐受。各种外源或内源因素均可调节DC的分化发育,刺激其活化成熟或诱导耐受以影响免疫应答的结局。本文主要对诱导DC活化或耐受的分子如Toll样受体(TLR)配体、多糖类、热休克蛋白、细菌毒素、树突状细胞和上皮细胞205(DEC205)单克隆抗体或单链抗体DEC融合蛋白、细胞因子、免疫调节剂的用量及其应用进行综述。 徐灵芝 杨平常关键词:树突状细胞 活化 耐受 白花鬼针草花粉过敏原的分离鉴定与纯化 被引量:6 2014年 目的提取和分离纯化白花鬼针草花粉主要过敏原,并鉴定主要过敏原的致敏性。方法提取白花鬼针草花粉蛋白粗提液,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白组分并测定其分子质量,经离子交换层析法分离纯化几类主要的蛋白,Western blotting分别检测其与花粉过敏患者血清IgE结合情况及10位正常人阴性混合血清结合情况,对比鉴定每种主要蛋白质致敏原的致敏性。结果 SDS-PAGE结果示:在12.5-120ku之间广泛分布了20余条蛋白条带,其中主带7条,分子质量在35-70ku和10-15ku的区带蛋白含量最为丰富,余下的范围内还有约10余条次带。Westen-blotting检测示:白花鬼针草花粉变应原的致敏性强,与花粉过敏患者血清特异性IgE结合大。离子交换层析出6类主要变应原蛋白,其分子质量分别为70、65、54、49、39及33ku;阴性对照组Westen-blotting在70ku处有弱显色。结论白花鬼针草花粉的主要过敏原为70、65、54、49、39及33ku;70ku变应原致敏性最强。 李莹 肖小军 柴文戍 何韶衡 杨平常 刘志刚关键词:花粉变应原 变应性鼻炎鼻粘膜嗜酸粒细胞脱颗粒透射电镜观察 被引量:16 1997年 为研究变应性鼻炎鼻粘膜嗜酸粒细胞(EOS)超微结构,从临床确诊为常年性变应性鼻炎(PAR,n=13)、花粉症(PS,n=9)和健康对照(n=3)鼻粘膜取活组织检查标本,除常规组织病理学检查外,重点观察EOS脱颗粒的超微结构改变。PAR和PS患者的鼻粘膜除不同程度的炎性反应外,均有明显的EOS浸润。缓解期鼻粘膜EOS胞膜完整、无突起,胞浆颗粒密度一致、中心键(crystaloid)清晰,胞浆无空泡化,为静息期EOS。发作期鼻粘膜EOS胞膜多不完整,伸出较多伪足,伪足中含有颗粒,胞浆空泡化明显,颗粒密度不一,中心键常脱失,为活化期EOS。此外,尚可见大量的肥大细胞(MC)及T淋巴细胞浸润。EOS与MC及T淋巴细胞的相互作用在变应性鼻炎的发生、发展中起重要作用。 赵长青 陶正德 肖健云 赵素萍 肖健云 孙本韬 赵素萍关键词:变应性鼻炎 鼻粘膜 嗜酸粒细胞 透射电镜 蜂毒肽通过Th1/Th2途径对胶原诱导关节炎大鼠模型免疫调节的影响 被引量:3 2019年 目的探讨蜂毒肽对胶原诱导关节炎大鼠模型免疫调节的影响。方法成功建立胶原诱导关节炎大鼠模型,随机分为模型组、蜂毒肽(0.5 mg/kg)组、甲氨蝶呤(1 mg/只)组,每组6只,另选取未造模大鼠为对照组;造模第14天起,隔日1次ip蜂毒肽,每周1次ip甲氨蝶呤,对照组、模型组ip等量生理盐水,给药21 d。观察关节肿胀程度、进行关节炎指数(AI)评分;给药结束后,收集血清,ELISA法检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、IgG1、IgG2a、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平;分离大鼠脾脏,提取淋巴细胞,流式细胞术检测Th1、Th2细胞比例。结果蜂毒肽组大鼠关节皮肤发红,关节肿胀明显减轻;与模型组比较,蜂毒肽显著抑制AI评分(P<0.05);显著降低血清中IgG、IgG2a、IFN-γ浓度(P<0.05),升高IgG1、IL-4浓度(P<0.05);显著下调Th1细胞比例、Th1/Th2比值(P<0.05),上调Th2细胞比例(P<0.05)。结论蜂毒肽能通过调节Th1/Th2平衡抑制胶原诱导关节炎大鼠的炎症。 贺守第 范钊坤 关丽 黎德育 杨平常 刘志刚 黄胜光关键词:蜂毒肽 TH1细胞 TH2细胞 胶原诱导关节炎 尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表达及纯化 2014年 目的研究尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表达和纯化,为研究其在尘螨疫苗免疫治疗中的作用奠定基础。方法采用生物信息学方法,根据GenBank中Hypothetical protein CE2118蛋白的基因序列,将其中稀有密码子改造为大肠杆菌常用密码子并进行二级结构优化,合成Hypothetical protein CE2118基因,构建原核表达载体pGEX6P-1-hypothetical protein CE2118并经酶切鉴定,在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,重组产物采用GST亲和层析纯化柱纯化。结果经密码子改造和二级结构优化后Hypothetical protein CE2118基因长度为588bp,其编码蛋白理论分子量为21kDa。重组表达载体经酶切鉴定与理论推测结果相符,该基因经IPTG诱导在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中得到高效的可溶性表达,纯化后的重组蛋白分子量约为21kDa,其单一蛋白纯度达95%以上。结论本研究成功构建了Hypothetical protein CE2118基因的pGEX6P-1原核重组质粒,获得的可溶性重组蛋白为进一步研究肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118在尘螨疫苗免疫治中的作用机理奠定基础。 杨小猛 袁谢芳 陈涛 杨平常 刘志刚关键词:尘螨 肠道微生物 PROTEIN 外排泵ABC转运蛋白基因msbA和spab在幽门螺杆菌多重耐药中的重要作用 被引量:6 2011年 目的:探讨外排泵ABC转运蛋白基因msbA和spab在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)多重耐药中的作用.方法:从临床上胃炎和消化性溃疡患者的胃黏膜标本分离H.pylori.采用琼脂二倍稀释法测定氨苄西林、头孢曲松、四环素、克拉霉素、氧氟沙星和呋喃唑酮对H.pylori的最小抑菌浓度(MIC).应用氯霉素对敏感株和标准菌株进行体外诱导多重耐药.采用RT-PCR的方法分别测定敏感株和多重耐药株中msbA和spab基因的相对表达量.分别构建msbA和spab的基因敲除株,分别测定敲除前后菌株对9种抗生素的敏感性.结果:诱导出包括标准菌株NCTC11637在内的5株多重耐药株.多重耐药株中msbA和spab基因的相对表达量明显高于敏感株(1.8200±0.5310,1.8340±0.2726vs0.8420±0.0789,P=0.018,0.015).成功构建了msbA和spab基因敲除株(H.pyloriMZ1006△msbA和H.pylori MZ1006△spab),两株基因敲除株对4种抗生素的敏感性相对于野生株分别有明显的增加.在临床分离的20株H.pylori中均检测出msbA和spab基因,未发现基因缺失株.结论:ABC转运蛋白msbA和spab基因在H.pylori多重耐药机制中起重要作用. 米阳 郑鹏远 张炳勇 刘志强 宋春花 杨平常关键词:幽门螺杆菌 外排泵 ABC转运蛋白 多重耐药 MSBA 一种重组Gal‑1过敏环境免疫耐受诱导模型及建立方法 本发明属于医疗领域,公开了一种重组Gal‑1过敏环境免疫耐受诱导模型及建立方法,诱导模型能诱导出抗原特异性调节性T细胞,恢复病人体内的抗原特异性免疫耐受,从而抑制过敏反应;过敏反应环境下,体内TNF‑α含量增加,抑制Ga... 杨平常 刘志强 杨贵 徐灵芝 谢瑞娣文献传递 Ⅰ型变态反应动物模型内源性抗IgE抗体的诱导及其对血清IgE水平的抑制作用 被引量:1 1996年 25只白兔用卵清蛋白为抗原经全身和鼻粘膜局部免疫,4w后其中17只动物血清卵清蛋白特异性IgE抗体上升到免疫前的5倍以上,并经抗原刺激鼻粘膜诱发出打喷嚏样反应、流清涕等变应性鼻炎样临床症状。这17只动物用作Ⅰ型变态反应动物模型,其中9只进一步用制备的异种基因型IgEFcε片段为抗原免疫。2w后在血清中检测到较高浓度的抗IgE抗体,同时伴有血清总IgE抗体浓度下降,上述变化持续观察10w无明显改变。提示异常增高的IgE抗体水平可通过诱导机体产生内源性抗IgE抗体的方式抑制。 杨平常 曾海燕 张涛源 范道生关键词:I型变态反应 免疫球蛋白E 抗体