殷恒福
- 作品数:84 被引量:218H指数:9
- 供职机构:中国林业科学研究院亚热带林业研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 荔波连蕊茶GA20氧化酶基因的克隆及表达分析被引量:3
- 2014年
- 根据植物GA20ox基因编码区的保守序列设计引物,以山茶属荔波连蕊茶幼嫩茎段为材料,提取总RNA,进行RT-PCR。采用RACE技术扩增获得1 567 bp的GA20氧化酶基因全长cDNA序列,命名为ClGA20ox2(GenBank登录号KF823787)。序列分析表明,ClGA20ox2开放阅读框(ORF)为1 146 bp,编码382个氨基酸,5'非编码区115 bp,3'非编码区303 bp。预测的蛋白质分子量为43.56 kD,等电点为7.02,所推导的蛋白氨基酸序列与夹竹桃和杨树GA20ox蛋白的同源性分别为73%和72%。ClGA20ox2与其它植物GA20ox蛋白比较,构建系统进化树,结果显示山茶GA20ox蛋白与夹竹桃和杨树的GA20ox蛋白的亲缘关系最为密切。实时定量PCR结果显示,该基因在荔波连蕊茶的根、茎、叶和种子中均有表达,其表达模式却不同:ClGA20ox2基因在二年生茎段中的表达丰度最高,在顶端分生组织中表达丰度最低,在嫩叶和根中表达丰度较高,成熟叶片和种子表达丰度较低。
- 肖政李纪元范正琪殷恒福
- 关键词:克隆
- 杜鹃红山茶CaCPI基因的克隆及过量表达提高烟草植株的抗虫性被引量:5
- 2015年
- 绝大多数观赏山茶花属于设施栽培植物,因环境湿热易造成病虫害出现,导致观赏价值降低,影响种植效益。为了提高抗虫性,根据山茶同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3',5'-RACE技术,从杜鹃红山茶嫩叶组织中克隆出半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cysteine proteinase inhibitor,CPI)基因,命名为CaCPI,基因全长579 bp,开放阅读框306 bp,编码101个氨基酸,分子量为11.078 kDa,等电点p I=6.72。利用实时荧光定量PCR方法对杜鹃红山茶根、茎、叶中该基因的表达特性进行分析,结果表明,CaCPI基因在叶中的表达量较高,其次为茎,在根中表达量较低,比较显示叶的表达量分别约为茎的1.53倍,根的1.61倍。转基因烟草分析表明,过量表达CaCPI基因后,转基因烟草中目的基因表达量提高了55.84-174.83倍,并且转基因植株抗蚜虫能力获得提高,接虫5 d后植株上的蚜虫绝大多数死亡,累积死亡率约为90.75%,高达野生型的5.14倍。
- 王江英范正琪殷恒福吴斌刘伟鑫李纪元
- 关键词:杜鹃红山茶基因克隆虫害转基因烟草
- 一种快速鉴别山茶品种的SSR标记引物、方法及应用
- 本发明涉及一种快速鉴别山茶品种的方法,本发明提供了自主开发的3对SSR标记引物SSR525、SSR530、SSR627,并将它们应用于山茶品种鉴别。具体根据同一引物不同山茶品种的SSR基因分型不同,鉴别不同品种。本发明得...
- 李辛雷张莹范梦龙宋志欣殷恒福范正琪刘伟鑫李纪元
- 山茶CjMYB1基因的克隆及表达分析被引量:4
- 2022年
- 该研究通过序列比对分析,以野生红山茶和不同花色品种山茶为材料,采用PCR方法克隆CjMYB1基因,并通过生物信息学和表达分析对其进行初步研究,为深入研究山茶CjMYB1基因在花色形成和花发育过程的调控机理奠定理论基础。结果表明:(1)成功克隆获得山茶CjMYB1基因(GenBank登录号为OL347930),其开放阅读框长为879 bp,编码292个氨基酸,相对分子质量为33.17 kD;CjMYB1基因属于R2R3-MYB转录因子,且与拟南芥MYB基因家族的第7亚组处于同一分支。(2)荧光定量PCR分析发现,山茶CjMYB1基因在野生红山茶花芽中表达量最高,在萼片、花瓣、雄蕊和心皮中都有较高的表达量,推测其在山茶花器官发育中发挥着重要作用;在红色山茶品种中表达量较高,而在粉色、淡黄色、白色山茶品种中表达量较低,说明CjMYB1基因可能在红色山茶品种的花色苷合成途径中起到了关键作用。(3)亚细胞定位实验表明,CjMYB1蛋白定位在细胞核。
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- 关键词:山茶基因克隆亚细胞定位
- 芳香型山茶芳香基因挖掘及快繁关键技术研究
- 范正琪李纪元李辛雷殷恒福林长春孙迎坤吴斌肖政
- “芳香型山茶芳香基因挖掘及快繁关键技术研究”(2010C32038)属浙江省科技计划公益技术研究农业项目,2010年7月批准立项,2012年12月结题。该项目由中国林科院亚热带林业研究所独立提出申请并承担,在执行过程中,...
- 关键词:
- 关键词:山茶品种繁殖
- 杜鹃红山茶花芽分化及其代谢产物的变化被引量:18
- 2012年
- 以杜鹃红山茶为材料,采用石蜡切片法观察花芽分化过程,研究该过程与外部形态的相关性及其代谢产物的变化。结果表明:杜鹃红山茶花芽分化于5—9月间持续不断进行,该时段内能观察到处于不同分化阶段的花芽;其过程可分为生理分化期、花原基分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期、雌蕊原基分化期。杜鹃红山茶花芽分化过程与其外部形态特征之间有着相对稳定的关系,可以通过花芽形态特征来对其进行判别。花芽分化期可溶性蛋白质含量先升高后降低,可溶性糖含量及可溶性糖/可溶性蛋白质先降低后升高;RNA、总核酸含量及RNA/DNA的变化趋势一致,均随花芽分化逐渐升高,在花瓣原基分化期达到最高,雄蕊、雌蕊原基分化期降低,而DNA含量在整个过程中一直处于较低水平且变化平缓。
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- 关键词:杜鹃红山茶花芽分化代谢物质
- 濒危植物杜鹃红山茶种群结构和动态变化被引量:15
- 2018年
- 通过样地调查和数据统计,以基径(BD)5 mm为径阶距划分径级,对分布于广东阳春鹅凰嶂省级自然保护区内的杜鹃红山茶(Camellia azalea Wei)种群的径级结构和静态生命表进行了分析,通过个体标准化存活曲线、个体死亡率曲线和个体损失度曲线探讨该种群的生命过程,并对种群的时间序列进行了预测。结果表明:该种群径级结构表现出小径级和大径级的个体存活数较少而中间径级的个体存活数较多的特征,其中,Ⅳ级(15 mm≤BD<20mm)至Ⅵ级(25 mm≤BD<30 mm)以及Ⅰ级(BD<5 mm)和Ⅱ级(5 mm≤BD<10 mm)的个体存活数分别占个体总存活数的52.0%和3.3%。从静态生命表看,个体存活数和个体标准化存活数的变化趋势与种群径级结构的变化趋势基本一致;个体标准化死亡数、个体死亡率和个体损失度在Ⅰ级至Ⅲ级(10 mm≤BD<15 mm)均为负值,Ⅳ级后随径级增大呈波动增加的趋势,Ⅸ级(40 mm≤BD<45 mm)后随径级增大呈波动减少的趋势;个体区间寿命在Ⅳ级和Ⅴ级(20 mm≤BD<25 mm)达到峰值,此后随径级增大而减少;个体总寿命、个体期望寿命和个体存活率总体上随径级增大而减少。该种群的个体标准化存活曲线属于DeeveyⅠ型曲线,显示该种群为下降型种群;个体死亡率曲线和个体损失度曲线的变化趋势基本一致,均从Ⅲ级开始波动增加,无明显峰值。时间序列预测结果表明:与现存个体存活数相比,在未来2和5年后,Ⅷ级(35 mm≤BD<40 mm)至ⅩⅣ级(65 mm≤BD<70 mm)的个体存活数均呈增加趋势;在未来10年后,Ⅹ级(45 mm≤BD<50 mm)至ⅩⅤ级(BD≥70 mm)的个体存活数增加,且径级越大增加趋势越明显。总体上看,该种群幼苗缺乏,呈衰退趋势,为下降型种群;生境恶劣和人为干扰是主要致危因子。根据研究结果,对该种群的保护提出了一些建议。
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- 关键词:杜鹃红山茶种群结构静态生命表时间序列预测
- 芳香型山茶‘克瑞墨大牡丹'花器官挥发油形成和分泌的超微结构研究
- 本文利用透射电镜观察了红山茶品种‘克瑞墨大牡丹’不同花器官的超微结构,研究了细胞中挥发油的产生部位和分泌途径,结果表明,‘克瑞墨大牡丹’花器官细胞中的油滴是由质体产生,随着质体解体由质体膜包裹油滴,油滴逐渐靠近细胞质膜,...
- 范正琪李纪元李辛雷殷恒福周兴文
- 关键词:山茶超微结构挥发油
- 文献传递
- 一种山茶花腐病抗病性的评价方法
- 本发明提供了一种山茶花腐病抗病性的评价方法,属于植物病害评价技术领域,所述评价方法包括:将山茶叶杯菌接种在山茶花离体花瓣的伤口处,进行培养;接种72h后测量病斑面积和花瓣总面积,得到相对面积比;根据得到的相对面积比划分病...
- 李纪元刘莹耿显胜刘伟鑫范正琪葛万川殷恒福李辛雷
- 一种耐冬山茶遗传转化的方法
- 一种耐冬山茶遗传转化的方法,属于生物技术和基因工程技术领域。方法包括:1)耐冬山茶无菌苗准备,2)农杆菌侵染液制备,3)农杆菌侵染及共培养,4)农杆菌清洗,5)抗性芽筛选及诱导培养,6)抗性芽壮苗培养,7)生根培养,8)...
- 范正琪李纪元殷恒福李辛雷