牛胜鸟 作品数:11 被引量:60 H指数:5 供职机构: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
三种西瓜病毒的基因克隆及植物表达载体构建 本研究以从山西西瓜上分离纯化得到的西瓜花叶病毒2号(WMV-2)分离物为材料,用RT-PCR方法得到其外壳蛋白(CP)。基因的cDNA,经克隆和序列测定后,确认该基因是由846个核苷酸组成,可编码产生281个氨基酸。同源... 牛胜鸟关键词:西瓜 病毒 基因克隆 植物表达载体 文献传递 西瓜花叶病毒2号山西分离物外壳蛋白基因核苷酸序列分析 被引量:5 2000年 利用RT PCR方法 ,扩增获得西瓜花叶病毒 2号 (WMV 2 )山西分离物CP基因 ,并克隆到pUC T载体中 .核苷酸序列测定结果表明 ,山西分离物CP基因全长为 846个核苷酸 ,编码由 2 81个氨基酸组成的 31 5kDa蛋白 .与国外已报道的WMV 2CP基因相比 ,其核苷酸序列同源性为 92 8%~ 93 9% ,由此推导的氨基酸序列同源性为 95 4%~ 96 4% .山西分离物外壳蛋白有 4个氨基酸残基明显不同于其它分离物 ,其中蚜传株系的特征结构域DAG突变为YAG . 李大伟 牛胜鸟 韩成贵 刘庆元关键词:西瓜花叶病毒 CP基因 核苷酸序列 香蕉束顶病毒研究进展 2006年 香蕉束顶病毒(Bananabunchytopvirus,BBTV)是引起香蕉束顶病害(Bananabunchytopdisease,BBTD)的病毒,它严重地危害了香蕉的生产。综述了近年来香蕉束顶病毒的分离提纯方法,株系划分以及分类地位,较为全面的介绍了BBTV病毒基因组分结构和各组分编码蛋白的功能等,并提出了目前需要进一步澄清的问题。 赵焕阁 牛胜鸟 华元刚 邱世明 王达新 刘志昕关键词:香蕉束顶病毒 基因组结构 编码蛋白 几个炭疽菌株的分类鉴定 被引量:23 1996年 作者对8个炭疽菌株分离物进行鉴定,明确了核桃、枣、山茱萸、棉花和柑桔寄主上5个分离菌株为胶孢炭疽菌[Colletotrichumgloeosporioides(Penz.)Sacc.];大豆寄主上分离菌株为黑线炭疽菌[C.dematium(Pers.exFr.)Grove];辣椒寄主上分离菌株为辣椒炭疽菌[C.capsici(Syd.)Butl.etBisby];西瓜寄主上分离物为瓜类炭疽菌[C.orbiculare(BerketMont.)Arx.]。 喻璋 任国兰 田尧甫 牛胜鸟 杨芳 禹明甫 殷花娥关键词:炭疽菌 分生孢子 病毒基因介导的抗性机制及抗病毒转基因西瓜的研究 为了探讨不同转基因结构形式对诱发植物基因沉默,以及在病原介导抗病性中的作用,构建了五种不同结构形式的烟草花叶病毒/(TMV/)外壳蛋白/(CP/)基因植物表达载体:pS18、pR29、pDS24、pⅡ38和pⅢ19,借助... 牛胜鸟关键词:转录后基因沉默 西瓜病毒病 文献传递 香蕉束顶病毒海南分离物DNA2编码区的克隆及抗血清的制备 被引量:1 2008年 利用PCR方法克隆香蕉束顶病毒海南分离物(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2编码区,将其插入到原核表达载体pGEX-6p-1谷胱苷肽-S-转移酶(GST)基因下游。所得克隆pGEX-HN-B2测序结果表明,插入的DNA2片段为267bp,且表达相位和理论上设计的完全一致。把此重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3)中,经过异丙硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后出现约33Ku融合蛋白质表达条带。为获得特异的血清,切下目的表达条带并免疫兔子。经Western-blotting检测,获取的血清可以和表达的33Ku融合蛋白特异结合,表明已成功获得DNA2编码蛋白的血清。 赵焕阁 牛胜鸟 彭存智 刘志昕关键词:香蕉束顶病毒 侵染落葵的黄瓜花叶病毒分离物CP基因序列分析 被引量:1 2008年 通过间接酶联免疫法(ID-ELISA)检测到染病落葵病样中存在黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)。从病叶中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增得到657bp的CMVCP基因片段,将扩增产物与T载体连接并进行测序。用DNAMAN将得到的CP基因序列与GenBank收录的黄瓜花叶病毒两亚组部分株系或分离物的CP基因序列进行比较,结果表明该CP基因与CMV亚组I、亚组Ⅱ之间的核苷酸序列同源性分别为91.17%~95.43%和75.30%~75.76%,推导氨基酸序列同源性分别为95.41%~97.71%和81.28%~81.74%,表明CMV.Ba与亚组I同源关系密切。 牛立霞 牛胜鸟 王健华 刘志昕关键词:落葵 黄瓜花叶病毒 CP基因 转基因抗病毒病四倍体西瓜的培育 被引量:9 2007年 利用西瓜花叶病毒2号(WMV-2)外壳蛋白(CP)基因、小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)复制酶(NIb)基因和黄瓜花叶病毒(CMV)复制酶基因构建三价基因的植物表达载体,通过农杆菌介导转化四倍体西瓜植株,经分子检测证明目的基因成功地导入西瓜植株,并在后代中稳定遗传。经温室及大田接种鉴定,T3代转基因西瓜抗病毒性达中抗水平,为抗病毒无籽西瓜新品种的培育提供了可能性。 黄学森 牛胜鸟 王锡民 于嘉林 赵福兴 王生有 翟光明 蔡晓雨 师范生 曹永刚 许艳 郑芳 王小红 金霞关键词:四倍体西瓜 病毒病 转基因 抗病性 几个炭疽菌株的分类鉴定 被引量:2 1998年 根据J.A.Von Arx(1957,1970)和B.Sutton(1980)炭疽菌属分类系统,以自然形态特征为主(分生孢子和附着胞形态和大小),培养性状和寄主范围为辅的综合标准,者对8个炭疽菌株分离物进行了分类鉴定.结果是:(1)核桃炭疽菌、枣炭疽菌、山菜黄炭疽菌、棉花炭疽菌和柑桔炭疽菌的分生孢子都属圆柱形,两端钝圆,孢子平均长于12μm,宽不超过4.5μm.附着胞椭圆形,褐色;在PDA培养基上菌落灰白色,圆形,边缘整齐,平铺,绒状.经人工接种对桃、杏发病率50%~100%,致病性强至无.因此,这5个炭疽菌株都属于胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides(Penz)Sacc.](Syn.Gloeosporium frutigenum;G.citri;Colletoerichum gossypii).(2)西瓜炭疽菌的分生孢子圆柱形,附着胞棒形、褐色;在PDA培养基上菌落灰白色,不规则形.;边缘波状,具同心轮纹;对桃、杏、番茄无致病性.属于瓜类炭疽菌[Colletotrichum orbiculare(Berk.et Mont.Arx.](Syn.Gloesporium orbiculare Berk.et Mont.).(3)大豆炭疽菌的分生孢于镰刀形(新月形),宽2.1~2.5μm,附着胞椭圆形.褐色;在PDA培养基上菌落褐色,圆形,边缘整齐,平铺,绒状;对桃、杏、番茄无致病性,对辣椒、西瓜致病性弱.属于里线炭疽菌[Colletotrichum demafium(Pers.ex.Fr.)Grove](Syn.Vermicularia 喻璋 任国兰 田尧甫 牛胜鸟 相芳关键词:炭疽菌 水果 蔬菜 大豆 西瓜转基因抗病毒病新材料BH-1 被引量:12 2004年 西瓜新材料BH-1,是导入了西瓜花叶病毒(WMV)外壳蛋白基因、小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)复制酶基因、黄瓜花叶病毒(CMV)复制酶基因的转基因新材料。经温室及大田抗病毒病鉴定表明其抗性达中抗以上水平,是我国第1个通过转基因获得的抗病毒病西瓜新材料。 黄学森 牛胜鸟 王锡民 于嘉林 赵福兴 王生有 翟光明 师范生 蔡晓雨 刘彦军 曹永刚 李凯莉 许艳 郑芳 王小红 王桂莲关键词:西瓜 转基因 抗病毒病 西瓜花叶病毒 小西葫芦黄化花叶病毒 复制酶基因