王小红
- 作品数:13 被引量:67H指数:5
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响被引量:3
- 2015年
- 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶,分为A、B 2组。同时包埋EPCs,流式细胞仪检测培养7 d后的细胞存活率,倒置显微镜观察EPCs的生长及长入水凝胶的情况并计数,分析b FGF、VEGF对EPCs存活率的影响。培养7 d后用定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测总RNA量,并检测PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表达。然后用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测2组去水凝胶的培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并用荧光法检测水凝胶的降解速度,b FGF、VEGF对EPCs释放MMP的影响。最后以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术检测含有b FGF、VEGF的水凝胶体外诱导血管新生的作用。结果 A组水凝胶,消化7 d后,流式细胞仪检测发现39.43%的EPCs尚存,B组4.14%;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。水凝胶表面种植EPCs可观察到的细胞数A组为378.333 3,B组为302.333 3;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测2组中MMP-2、MMP-9的表达,发现水凝胶中MMP-2和MMP-9随时间推移在72 h内持续释放,A组较B组释放浓度显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光法检测水凝胶的降解发现,从第1天开始,A组水凝胶降解百分比急速升高,之后增长速度减缓,而B组呈继续增长之势,差异有统计学意义。定量RT-PCR检测发现A组较B组基因Ct值高,且差异有统计学意义(P<0.05)。CAM技术检测发现A组(空白组)、B组(不含b FGF、VEGF组)、C组(含b FGF、VEGF组)的新生血管总数分别为9、25、36;两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外研究证实,缓释的b FGF、VEGF不仅能促进水凝胶中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,还能刺激血管新生。
- 韩艳久刘国辉欧阳柳王小红
- 骨内注射无水乙醇建立兔股骨头坏死模型被引量:11
- 2013年
- 背景:目前还难以建立合适的早期股骨头坏死的动物模型。目的:建立一个简单、标准和可靠的股骨头坏死动物模型用于实验研究。方法:X射线透视下将新西兰兔右侧股骨头中心钻孔并注入无水乙醇,左侧不做处理做对照。经过2,4和6周麻醉下处死动物获取股骨头。结果与结论:大体及X射线观察显示,造模侧股骨头第2周关节软骨颜色变暗、骨质密度不均匀;第6周,关节面有轻微凹陷,骨质低密度影较前进一步增大。MRI显示,造模侧股骨头第2周,T1加权股骨头负重区显示线样或不规则低信号,T2加权呈高信号;第6周,股骨头变性,软骨下骨折,关节面塌陷,新月体形成。对照侧第2,4,6周股骨头结果均常。组织病理学观察显示,造模侧股骨头第2周后,骨细胞核固缩、变性坏死。结果证实,2周后兔股骨头均发生了部分坏死,股骨头坏死的完整的外观形态,大体循环和关节软骨与人类早期股骨头坏死是相似的,提示实验建立了良好的股骨头坏死动物模型。
- 陈东华文彬叶树楠杨述华陈超王小红禹虔刘先哲索进平聂磊
- 关键词:骨组织构建股骨头坏死乙醇X射线国家自然科学基金
- 家兔血管平滑肌细胞分离与培养方法的改良被引量:2
- 2012年
- 我们通过获取血管平滑肌细胞原代并体外扩增,为组织工程血管化提供血管平滑肌细胞。
- 华文彬陈东叶树楠杨述华陈超王小红禹虔刘先哲索进平
- 关键词:血管平滑肌细胞细胞分离家兔体外扩增血管化
- 低强度脉冲式超声对实验性兔骨关节炎软骨损伤修复的影响被引量:8
- 2009年
- 目的研究低强度脉冲式超声(LIPUS)对实验性兔骨关节炎软骨损伤修复的影响及其作用机制。方法取36只成年新西兰兔,双膝关节经改良Hulth法建立骨关节炎模型,右膝为LIPUS组,左膝为对照组。2周后LIPUS组接受LIPUS治疗,超声强度30mW/cm^2,频率1.0 MHz,频宽200μs,重复频率1.0KHz,每日一次,每次15 min;对照组接受假超声治疗(过程同LIPUS组,但超声治疗仪不开机,探头无能量输出)。分别于治疗后2周、4周、8周处死实验动物,每批12只,观察软骨大体改变并行组织病理学(HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化、MMP-13免疫组化)检测,结果采用统计学分析。结果在相同观察时间点的软骨损伤程度,LIPUS治疗组比对照组轻微,LIPUS治疗组Ⅱ型胶原表达强度高于对照组,MMP-13表达强度低于对照组,差异均有统计学意义。结论LIPUS能促进骨关节炎软骨Ⅱ型胶原的合成,并能通过降低MMP-13的表达,减少细胞外基质的降解,从而促进骨关节炎软骨损伤的修复。
- 王小红王洪杨述华唐欣段德宇孟春庆邵增务杜靖远
- 关键词:骨关节炎软骨损伤
- 同种异体骨软骨柱移植治疗关节软骨缺损被引量:3
- 2009年
- 背景:同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤可以解决自体骨软骨来源有限的问题,但存在免疫排斥问题。目的:观察以深低温保护剂保护的同种异体骨软骨柱移植修复兔关节软骨缺损的效果,并与自体关节软骨移植作比较。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-05/10在武汉协和医院骨科实验室完成。材料:24只成年健康新西兰兔中8只用于异体骨软骨柱的制备,16只随机分成同种异体移植组和自体移植组,每组8只。方法:使用横穿钉套筒提取兔股骨内侧髁骨软骨柱,将骨软骨柱在4℃条件下放入盛有10%二甲基亚砜的冻存管中2h,将冻存管移入程序冷冻仪内以1℃/min速率降至-75℃,放入-196℃液氮罐底部保存3周备用。用横穿钉钻头在兔左膝关节股骨内侧髁垂直于软骨面制造缺损,缺损深4mm,直径4.45mm,自体移植组取右膝关节内侧髁骨软骨柱植入到左侧膝关节相应缺损处,异体移植组将经过程序性深低温冷冻保存的同种异体骨软骨柱移植到相应缺损处。主要观察指标:术后12周观察兔关节活动度、修复组织的质地等情况。以苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理变化,以半定量改良Wakitaniscore法进行评估。以免疫组织化学染色观察Ⅱ型胶原分泌情况。结果:两组实验动物关节活动度正常。异体移植组移植处关节软骨面较光整,与周围正常关节软骨高度一致,结合紧密,颜色接近,与自体移植组相似。两组移植后,兔关节缺损处被透明软骨覆盖,潮线整齐,细胞排列有序,分泌大量基质,异体移植组移植处软骨深层及软骨下骨处可见微小裂隙,未见淋巴细胞和浆细胞浸润。同种自体与异体骨软骨移植组Wakitaniscore评分结果无统计学差异,总分接近,修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均强阳性。结论:冷冻同种异体骨软骨柱移植可修复全层小面积关节软骨缺损,术后近期软骨细
- 文昌明王洪杨述华孟春庆段德宇潘海涛唐欣王小红崔树北雷中华方青李立群孙川
- 关键词:关节软骨自体移植同种异体移植
- 激素性股骨头坏死患者中两种内皮祖细胞功能的改变被引量:17
- 2012年
- 目的观察激素性股骨头坏死患者外周血中两种内皮祖细胞功能的改变,探讨其在激素导致的内皮功能失调中的作用。方法选择33例激素性股骨头坏死患者和33例性别与年龄相匹配的健康人,从外周血中分离培养早期内皮祖细胞(EPCs)和内皮集落形成细胞(ECFCs),体外培养并检测其集落形成能力、CCK-8检测增殖能力、Transwell小室检测迁移能力、Matrigel胶检测成血管能力、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子(SDF).1细胞因子分泌水平。结果激素性股骨头坏死患者中的两种内皮祖细胞集落形成能力均有所下降[早期EPC集落数:2.42±1.46比4.52±2.00(P〈0.05);ECFC集落数:0.62±0.55比1.12±0.82(P〈0.05)],早期内皮祖细胞的迁移能力下降[63.8±11.7比152.3±12.4(P〈0.01)],分泌VEGF因子能力下降[(50.8±7.2)ng/L比(62.8±10.1)ng/L,P〈0.01],内皮集落形成细胞的增殖能力下降(P〈0.05),成血管能力下降[7.1±2.7比23.8±4.3(P〈0.01)]。结论激素性股骨头坏死患者中两种内皮祖细胞的功能在不同方面受损,表明其在激素导致的内皮功能失调中发挥不同作用。
- 陈超杨述华冯勇陈东禹虔王小红
- 关键词:激素股骨头坏死内皮祖细胞
- 人脐血中分离培养扩增内皮集落形成细胞及其生物相容性
- 2011年
- 背景:内皮集落形成细胞是内皮祖细胞的一种亚型,体外培养扩增及其在组织工程中的应用尚不明确。目的:探索从人脐血中分离培养扩增内皮集落形成细胞并观察其生物相容性。方法:采用密度梯度离心法从人脐血中分离单个核细胞,接种于Ⅰ型鼠尾胶原包被的培养板上,采用内皮祖细胞专用EGM-2培养基诱导培养,早期传代后扩增,免疫荧光鉴定细胞,并检测其体外成血管和增殖能力,与纳米羟基磷灰石/磷酸三钙材料复合培养后的生物相容性。结果与结论:脐血来源内皮集落形成细胞呈铺路石样集落生长,吞噬Dil-Ac-LDL并结合FITC-UEA-1,表达CD31,vWF,KDR和Tie-2,早期传代后拥有较强增殖潜能,可在体外大量扩增,在体外基质胶上可形成闭合管腔样结构,复合纳米羟基磷灰石/磷酸三钙材料后生物学特性不受影响。提示可从脐血中分离并体外大量扩增内皮集落形成细胞。
- 陈超杨述华冯勇陈东禹虔王小红
- 关键词:内皮祖细胞脐血种子细胞
- 肩关节镜下Anchor锚钉结合Orthocord线缝合修复肩袖损伤的疗效被引量:3
- 2012年
- 目的探讨全关节镜技术治疗肩袖损伤的手术方法及其临床疗效。方法本组13例肩袖损伤患者均在关节镜辅助下,采用Anchor锚钉结合Orthocord线和PDS线修复损伤的肩袖,通过临床随访,采用美国肩肘外科医师(ASES)评分进行肩关节功能评估,观察其疗效。结果本组13例病例均获得随访,随访时间12~24个月,平均16.5个月。根据ASES评分标准进行评分,术后一年患者肩关节功能评分由术前的47.7±3.7分提升到87.8±1.1分,手术优良率为84.8%。结论全关节镜技术能够有效地修复重建肩袖,恢复肩关节功能,获得满意的临床疗效,是当前治疗肩袖损伤的较好地治疗方法。
- 吴星火王洪孟春庆王小红汤明邵增务杨述华
- 关键词:关节镜肩关节肩袖损伤
- TGF-β_1短时间干预间充质干细胞可增加其CXCR4的表达及迁移能力被引量:1
- 2012年
- 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)短时间干预间充质干细胞(MSCs)后趋化因子受体4(CXCR4)的表达及对MSCs迁移能力的影响。方法 MSCs被不同浓度(0、0.01、0.1、1、10ng/mL)和时间梯度(6、12、24、48h)的TGF-β1干预后,采用流式细胞术鉴定MSCs细胞,通过Western blot和real-time quantitative PCR检测CXCR4的表达,并使用transwell小室实验来鉴定MSCs细胞的迁移能力。CXCR4基因的甲基化状态通过甲基化特异性PCR(methylation-spe-cific PCR,MSP)检测。结果将MSCs细胞短时间暴露在TGF-β1中会导致CXCR4的蛋白水平以浓度依赖性的方式升高,且随着干预时间的延长表达升高,于24h时达到高峰;而此时,检测MSCs细胞暴露于TGF-β124h这个时间点的CXCR4的mRNA水平,发现其以浓度依赖性的方式升高,而且MSCs的迁移能力增强,但MSP的结果显示CXCR4基因甲基化状态并未发生改变。结论 MSCs细胞经TGF-β1干预后,其CXCR4的表达增加,迁移能力增强。
- 禹虔杨述华冯勇刘先哲陈东王小红陈超
- 关键词:间充质干细胞趋化因子受体4转化生长因子Β1
- 关节镜滑膜切除术联合放射治疗膝关节弥漫型色素沉着绒毛结节性滑膜炎被引量:4
- 2011年
- 目的观察关节镜下滑膜切除术联合术后放射治疗膝关节弥漫型色素沉着绒毛结节性滑膜炎的疗效。方法 26例膝关节弥漫型色素沉着绒毛结节性滑膜炎患者,行关节镜下滑膜切除术,同时6例伴有半月板损伤患者行半月板部分切除术,1例关节僵硬患者行关节松解术,1例软骨剥脱患者行微骨折术。手术后4周关节外放射治疗,采用直线型加速器6mv-X线,照射范围包括患膝关节及手术切口上下缘3cm,每次2Gy,每周5次,总剂量30Gy。术后定期随访并进行Lysholm膝关节功能评分,评分结果进行统计学分析。结果所有患者均获得随访,随访时间12-40个月,平均29.5个月,术后未见复发及放射性治疗并发症,Lysholm评分术前43.28±4.1分,术后6个月85.73±3.4分,术后12个月94.89±5.1分,差别有统计学意义。结论关节镜下滑膜切除术联合术后放射治疗是治疗膝关节弥漫型色素沉着绒毛结节性滑膜炎、减少术后复发的有效方法 。
- 王洪孟春庆王小红汤明杨述华邵增务唐欣段德宇杜靖远
- 关键词:关节镜滑膜切除术色素沉着绒毛结节性滑膜炎复发