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王庆苓: 作品数：40 被引量：69H指数：4; 供职机构：徐州医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目江苏省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>

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右美托米啶对β-淀粉样肽引起的SH-SY5Y细胞凋亡的影响被引量：2: 2013年; 目的:探讨右美托米啶(dexmedetomidine,Dex)对β-淀粉样肽(amyloid-βpeptide,Aβ)引起的SH-SY5Y细胞(神经母细胞瘤细胞)凋亡的影响作用。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,随机分为4组:阴性对照组,不同浓度Aβ25-35组(2.5、5.0、10.0μmol/L组),观察不同浓度的Aβ25-35对SH-SY5Y细胞的作用。同时进一步观察Dex与Aβ联合应用对SH-SY5Y细胞的作用,实验随机分为5组:阴性对照组,Aβ组(10.0μmol/L Aβ25-35),Aβ+Dex 0.1组(10.0μmol/L Aβ25-35+0.1μmol/L Dex),Aβ+Dex 1.0组(10.0μmol/L Aβ25-35+1.0μmol/LDex)和Aβ+Dex 10.0组(10.0μmol/L Aβ25-35+10.0μmol/L Dex),分别处理24 h后,采用DAPI荧光染色法计数凋亡细胞数,计算凋亡率。结果:Aβ25-35可以促进SH-SY5Y细胞的凋亡,且呈时间和浓度依赖性;而在Aβ25-35中同时加入Dex作用后,细胞凋亡明显受到抑制,细胞凋亡率明显下降(P<0.05),但仍明显高于阴性对照组。结论:Dex可以有效的抑制Aβ25-35引起的SH-SY5Y细胞的凋亡。; 张茂声张琳王庆苓徐玉婷郑茂金; 关键词：Β-淀粉样肽 SH-SY5Y细胞凋亡

人Midkine基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定: 2014年; 目的构建人Midkine(MK)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体并鉴定,为其体内外实验研究提供基础。方法设计针对人MK基因序列的4条RNAi靶点序列,分别与慢病毒载体进行连接,获得GV115-MK-1、GV115-MK-2、GV115-MK-3和GV115-MK-4质粒,转染感受态细菌,经PCR及测序技术的鉴定,然后与pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染293T细胞,进行慢病毒包装并测定病毒滴度。4种病毒载体感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后,用RT-PCR检测MK mRNA的表达。结果 PCR和测序检测结果证实,插入的MK RNAi核苷酸序列正确,共转染293T细胞后可见大量绿色荧光。浓缩病毒后测定其滴度分别为6×108、5×108、5×108和6×108TU/ml。感染MDA-MB-231细胞后,RT-PCR检测结果表明,GV115-MK-1干扰效果明显,MK基因敲减效率达87.2%(P<0.05)。结论成功构建人MK RNAi慢病毒表达载体,并可有效抑制MDA-MB-231细胞MK基因的表达。; 王庆苓张鹏; 关键词：MIDKINE RNA干扰慢病毒载体

乳腺癌组织中midkine的表达及临床意义被引量：4: 2012年; 目的探讨中期因子(midkine,MK)的表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化PV两步法检测44例乳腺癌及相应癌旁组织(癌旁2 cm)中MK蛋白的表达,并分析其与不同临床病理特征之间的关系。结果 (1)乳腺癌及相应癌旁组织中MK蛋白的阳性率分别为90.91%(40/44)、11.36%(5/44),差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)MK蛋白在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、病理分级、临床分期无关(P>0.05)。结论 MK蛋白在乳腺癌组织中的表达增高与淋巴结转移相关,提示MK可能成为乳腺癌转移的标记物之一,为乳腺癌的诊断和治疗提供新依据。; 王坤华王庆苓来瑞娜吴永平; 关键词：乳腺肿瘤中期因子蛋白临床病理特征

Midkine表达水平对人乳腺癌MDA-MB-231细胞转移潜能影响研究被引量：1: 2014年; 目的:观察中期因子(midkine,MK)基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、黏附和侵袭能力的影响。方法:实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人乳腺癌细胞株MCF-7、Bcap-37和MDA-MB-231中MK mRNA及蛋白表达,筛选出MK表达丰度较高的细胞株。采用脂质体2000将MK shRNA干扰质粒pSilencer-3.1-H1-MK和空载体对照质粒pSilencer-3.1-H1-NC转染到该细胞株,并设未处理对照组。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测干扰后MK基因和蛋白表达;CCK-8检测细胞增殖能力,与胞外基质蛋白作用30min后检测其黏附能力,Transwell检测细胞侵袭能力和迁移能力。结果:实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测结果显示,MDA-MB-231细胞株适合做敲减验证。pSilencer-3.1-H1-MK干扰MDA-MB-231细胞MK表达后,MK基因相对表达量为0.38±0.02,低于对照组0.76±0.04和空载体转染组0.84±0.04,F=144.85,P<0.001;MK蛋白相对表达量为0.39±0.07,低于对照组0.95±0.04和空载体转染组0.99±0.02,F=26.49,P=0.001。CCK-8结果显示,细胞培养24、48和72h,MK基因干扰组细胞增殖能力明显低于低于对照组和空载体转染组,差异有统计学意义,P<0.05。细胞黏附实验结果显示,与胞外基质蛋白作用30min后,MK基因干扰组黏附细胞数为(21.87±5.17)%,低于对照组(38.74±4.98)%和空载体转染组(42.37±5.74)%,F=27.60,P<0.001。Transwell迁移实验中,MK基因干扰组穿越Transwell小室的细胞个数为26.6±6.67,低于对照组(47.0±4.32)和空载体转染组(52.0±6.98),F=44.98,P<0.001。侵袭实验中,MK基因干扰组穿越Transwell小室的细胞个数为13.2±3.46,低于对照组(19.4±4.43)和空载体转染组(19.9±3.90),F=8.94,P=0.001。结论:干扰MK的表达可显著抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外增殖、黏附、迁移和侵袭能力。; 王庆苓王坤华张鹏吴永平; 关键词：乳腺肿瘤 MDA

MTA3在肺癌细胞中调控细胞凋亡机制的研究被引量：5: 2015年; 背景与目的肿瘤转移基因(metastasis associated gene,MTA)是一个肿瘤候选基因家族,主要包括MTA1、MTA2、MTA3,已有的研究证实在不同肿瘤中MTA3发挥着相反的作用,本研究旨在探讨MTA3在肺癌细胞中调控细胞凋亡方面的影响。方法应用Western blot方法和Real-time PCR方法检测肺癌细胞系A549和H157中MTA3的转染效率,流式细胞仪方法检测上调/下调MTA3后肺癌细胞凋亡情况,Western blot方法检测下调MTA3后凋亡相关基因的表达。结果在肺癌细胞系A549和H157中干扰MTA3后则促进细胞凋亡,同时引起凋亡相关蛋白Bax、ClevedCaspase-3、p-PARP表达上调及Bcl-2表达下调。结论 MTA3在肺癌细胞系A549和H157细胞中通过抑制凋亡相关基因的表达抑制细胞凋亡。; 李海英王庆苓张琳包海军张恒; 关键词：肺肿瘤细胞凋亡 A549

三氧化二砷对结肠癌皮下移植瘤的抑制作用被引量：2: 2013年; 目的探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠结肠癌CT26细胞皮下移植瘤的影响。方法取对数生长期CT26细胞株制成单细胞悬液接种在BALB/c小鼠前肢腋下复制皮下移植瘤模型。将荷瘤小鼠随机分为3组:对照组、低浓度组及高浓度组,每组9只,分别连续尾静脉注射等体积生理盐水、1.0 mg/(kg·d)亚砷酸氯化钠注射液、2.0 mg/(kg·d)亚砷酸氯化钠注射液10 d,末次用药后24 h处死小鼠取肿瘤组织。测量肿瘤体积和重量,计算肿瘤生长抑制率;HE染色观察肿瘤细胞的形态学特征;免疫组化检测肿瘤组织Ki-67、Survivin、Bcl-2及Caspase-3的表达;Western blot测定各组肿瘤组织中Caspase-3蛋白的表达情况。结果 (1)与对照组比较,低、高浓度组小鼠皮下移植瘤体积较小,重量较轻,肿瘤生长明显受到不同程度的抑制(P<0.05)。(2)肿瘤组织HE染色,镜下观察药物低、高浓度组中肿瘤细胞的形态和分化发生明显的变化,细胞增殖受到明显抑制,核分裂象大量减少,高浓度组中这种表现更为明显。(3)免疫组化学显示,低、高浓度组中Ki-67、Survivin及Bcl-2的阳性表达明显降低,而同时Caspase-3的阳性表达则明显增强,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(4)Western blot结果显示,低、高浓度组中的Caspase-3蛋白表达量不同程度地升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 As2O3可明显抑制小鼠结肠癌CT26细胞皮下移植瘤的生长,表现为能有效地抑制肿瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。; 张琳吴永平程慧敏王庆苓徐玉婷郑茂金; 关键词：三氧化二砷结肠癌增殖凋亡

转染Zbtb7a基因对人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制被引量：2: 2013年; 目的观察转染Zbtb7a基因对人胃癌细胞系SGC7901增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法将pcDNA3.1-Zbtb7a和pSilencer 3.1-H1-mk用Lipofectamine2000转染SGC7901细胞,采用RT-PCR和Western Blot法检测MK mRNA及蛋白表达,CCK-8试剂盒和平板克隆法检测细胞增殖,流式细胞仪Annexin V-PI染色检测细胞凋亡。结果转染Zbtb7a后,SGC7901细胞中MK表达水平明显升高,细胞增殖能力明显增强(P<0.05),并且0.5ng/mL TRAIL诱导的细胞凋亡受到抑制(P<0.05)。Zbtb7a高表达后干扰MK的表达,细胞增殖及克隆能力则明显降低(P<0.05),TRAIL诱导的细胞凋亡数也明显增加(P<0.05)。结论 Zbtb7a可以通过上调MK的表达,促进SGC-7901细胞增殖以及抑制TRAI诱导的细胞凋亡。; 张鹏王庆苓; 关键词：胃癌细胞增殖细胞凋亡

干扰人胃癌MGC803细胞EPCR表达对内皮细胞增殖、迁移及脉管形成的影响: 2016年; 目的：探讨内皮细胞蛋白C受体（endothelial protein C receptor，EPCR）在肿瘤血管形成中的作用。方法采用RNA干扰方法降低人胃癌MGC803细胞中EPCR的表达，利用Western blot 技术检测干扰EPCR效果。EPCR小干扰RNA（ siRNA）片段、无关序列片段分别转染胃癌MGC803细胞，以未转染的MGC803细胞为对照；收集培养液上清，制备相应肿瘤条件培养基。人脐静脉内皮细胞（ HUVECs）经不同肿瘤条件培养基作用后， CCK－8法检测HUVECs增殖能力，Transwell小室检测HUVECs迁移能力，Matrigel检测HUVECs脉管形成能力。结果与对照组及无关序列组相比，EPCR干扰组HUVECs的增殖、迁移及脉管形成能力均明显降低（ P＜0．05）。结论干扰胃癌MGC803细胞EPCR的表达能够抑制HUVECs增殖、迁移及脉管形成能力，提示EPCR可能在胃癌血管形成中起重要作用。; 王田嫄张鹏杨红丽徐炎炎王庆苓; 关键词：胃癌细胞人脐静脉内皮细胞迁移

shRNA靶向抑制MK表达对MDA－MB－231细胞裸鼠体内成瘤能力的影响被引量：3: 2016年; 目的：探讨中期因子（Midkine，MK）基因表达对人乳腺癌MDA－MB－231细胞株裸鼠体内成瘤性的影响。方法将转染pSilencer－3．1－H1－MK（MK KD组）和pSilencer－3．1－H1－NC（NC组）质粒的乳腺癌细胞分别接种于雌性BALB／c裸鼠右侧前肢腋部皮下，然后于接种第7、14、21、28和35天观察测量肿瘤大小。结果与NC组相比，MK KD组裸鼠肿瘤形成时间长，并且肿瘤生长速度慢，瘤体重量轻、体积小（P＜0．05）。结论抑制MDA－MB－231乳腺癌细胞MK基因的表达，可以抑制裸鼠体内成瘤能力。; 韩正杰张鹏孙卓巩玉森刘慧王庆苓; 关键词：MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤

Midkine特异的shRNA对胃肿瘤细胞BGC823增殖及凋亡的影响被引量：2: 2010年; 目的研究shRNA干扰midkine对胃肿瘤细胞BGC823增殖能力及凋亡的影响。方法构建midkine基因的特异性小RNA干扰质粒,采用脂质体2000转染BGC823细胞,运用CCK-8检测细胞的增殖能力,PI染色检测细胞凋亡情况。结果成功转染重组体的BGC823细胞增殖明显受到抑制(P<0.01)细胞形成克隆数明显降低(P<0.01),并且有明显的亚二倍体峰出现(P<0.05)。结论针对midkine基因的特异性小RNA干扰质粒在体外能有效抑制人胃癌细胞BGC823 midkine表达,细胞增殖能力减弱,细胞凋亡增加,为midkine基因靶向治疗提供一定的实验依据。; 王庆苓黄亚红柳红侯亚义; 关键词：MIDKINE SHRNA 胃肿瘤细胞细胞增殖

王庆苓

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