王臣
- 作品数：166 被引量：163H指数：7
- 供职机构：河南科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省高校青年骨干教师资助项目河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 支气管败血波氏杆菌PRN黏附素R1区蛋白的免疫原性被引量：2
- 2009年
- 百日咳杆菌黏附素(PRN)是支气管败血波氏杆菌最重要的保护性抗原。为研究PRN的R1区多肽的免疫原性,分别将prn基因的全长编码区2 040 bp及5′端1 173 bp的片段(prnR1)克隆到原核表达载体pGEX-KG,经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达。SDS-PAGE和Western blot检测证实2种表达产物GST-R1和GST-PRN均具有良好的免疫学反应活性。在主动免疫保护试验中,GST-R1和GST-PRN免疫组小鼠均能产生较高的PRN抗体水平;当使用3 LD50的Bb强毒株HH0809进行鼻腔攻毒后,其保护率均为100%(9/9);当使用10 LD50HH0809攻毒时,其保护率分别为33.3%(3/9)和77.8%(7/9)。在被动免疫保护试验中,腹腔免疫GST-R1和GST-PRN兔抗血清均能100%(10/10)保护小鼠抵抗10 LD50HH0809的腹腔攻击,但经PRN吸附后的2种兔抗血清均失去了保护力(0/5)。这些研究结果表明,重组PRN的N端R1区多肽具有良好的免疫原性。
- 吴庭才赵战勤王臣张春杰吴斌程相朝何启盖
- 关键词：支气管败血波氏杆菌免疫原性
- 猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选被引量：4
- 2020年
- 旨在筛选适宜于猪丹毒丝菌灭活疫苗的佐剂。以分离鉴定出的猪丹毒丝菌1a型HG-1株灭活菌体为抗原分别配制矿物油佐剂疫苗(简称矿物油疫苗)、氢氧化铝胶佐剂疫苗(简称铝胶疫苗)、ISA201双相油乳佐剂疫苗(简称ISA201疫苗)、GEL02水溶性聚合物佐剂疫苗(简称GEL疫苗)、IMS1313水溶性纳米佐剂疫苗(简称IMS1313疫苗)共5种佐剂的灭活疫苗。小鼠免疫保护试验结果表明,二免14 d后使用约为4 LD50的HG-1株对小鼠进行腹腔攻毒,矿物油疫苗和GEL疫苗的保护率分别为100%(7/7)和71%(5/7),其他三种佐剂疫苗的保护率均为14%(1/7)。本研究进一步选择铝胶疫苗和GEL疫苗进行猪体对比试验;仔猪安全性试验结果表明,两种佐剂疫苗的副反应均较小;免疫保护试验结果表明,两次免疫后使用约为16 LD100的HG-1株对免疫仔猪进行耳缘静脉攻毒,两种佐剂疫苗的保护率分别为60%(3/5)和100%(5/5)。本研究最终选择GEL佐剂作为开发猪丹毒灭活疫苗的最适佐剂。
- 裴世璇宋吉健韩忆侬薛云王臣司丽芳赵战勤
- 关键词：疫苗佐剂
- 重组融合肽Tβ4-BP5基因的克隆、表达及其免疫佐剂特性被引量：1
- 2015年
- 胸腺肽Tβ4和法氏囊活性五肽BP5均能够调节机体的免疫反应,为探讨重组融合肽Tβ4-BP5是否也与免疫功能相关,本试验按照大肠杆菌偏嗜密码子设计并合成重组融合肽Tβ4-BP5基因,将其克隆至pET-32α表达载体中,重组表达载体在大肠杆菌BL21中诱导表达。为进一步评价重组融合肽Tβ4-BP5的免疫佐剂特性,以Tβ4-BP5联合灭活H9N2型AIV疫苗免疫鸡,检测免疫后鸡的HI抗体效价、抗原特异性IgG抗体、AIV中和抗体效价及Th1型(IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)的分泌水平,并通过动物免疫保护试验来评价其对鸡的免疫保护作用。结果显示,重组融合肽Tβ4-BP5在大肠杆菌中获得表达;Tβ4-BP5能够增强机体免疫后HI抗体、特异性IgG抗体水平、促进AIV中和抗体的产生、提高Th1型(IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)的分泌水平,表明Tβ4-BP5既能增强机体体液免疫应答,又能增强细胞免疫应答。动物免疫保护试验结果显示Tβ4-BP5有助于鸡肺脏中H9N2型AIV病毒的清除。以上结果提示,重组融合肽Tβ4-BP5具有良好的免疫佐剂的潜能。本研究为新型疫苗佐剂的研究开发奠定了基础。
- 王臣郭香玲李小康李德元陈溥言
- 关键词：融合基因
- 猪口蹄疫重组免疫复合肽的制备方法及应用
- 本发明涉及猪口蹄疫重组免疫复合肽的构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该免疫多肽佐剂为口蹄疫病毒新型辅助T细胞表位(I－S－I－S－E－I－K－G－V－I－V－H－K－I－E－T－I－L－F)和囊素模拟肽(T－P－N－...
- 陈溥言王臣魏建超曹瑞兵周斌
- 文献传递
- 一种伤寒沙门氏菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用
- 本发明涉及一种伤寒沙门氏菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用，该菌株是伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)ΔcrpST-1，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2011373。本发明的...
- 赵战勤薛云王臣王浩周金龙
- 鼠伤寒沙门菌重组鞭毛蛋白对巨噬细胞细胞因子与氧化/抗氧化水平的影响被引量：2
- 2018年
- 为研究重组鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白对巨噬细胞细胞因子与氧化/抗氧化水平的影响,本研究将50 ng/mL、250 ng/mL和500 ng/mL重组鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白FliC分别与巨噬细胞J774.1共孵育,分别采用CCK-8法、LDH试剂盒、ELISA试剂盒和荧光显微镜检测巨噬细胞活力、巨噬细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)、巨噬细胞分泌细胞因子和巨噬细胞胞内活性氧(ROS)水平;采用商品化试剂盒检测巨噬细胞产生的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)等氧化/抗氧化水平。结果显示,50 ng/mL重组鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白对巨噬细胞活力无影响,而巨噬细胞活力在该蛋白浓度为250 ng/mL(12 h)和500 ng/mL(9 h)时明显下降。该重组蛋白对巨噬细胞上清LDH水平的影响随其浓度的增加呈上升趋势,同时该重组蛋白的浓度对巨噬细胞分泌IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α和TGF-β的影响也呈正相关趋势。荧光显微镜检测显示,该重组蛋白刺激巨噬细胞胞内ROS水平明显增强。氧化/抗氧化水平方面,该重组蛋白导致巨噬细胞iNOS、MDA和NO氧化水平升高,而GSH-PX、SOD和T-AOC抗氧化水平降低。综上所述,鼠伤寒沙门菌重组鞭毛蛋白能增强巨噬细胞分泌细胞因子,也可引起巨噬细胞氧化/抗氧化平衡失调,为进一步探究鼠伤寒沙门菌与宿主的互作提供参考。
- 王晓利廖成水路霞崔淹鸽王安琪王臣
- 关键词：鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白巨噬细胞细胞因子
- 重组法氏囊BP5免疫融合肽的表达及生物学特性
- 王臣廖成水赵战勤李小康周变华张旻王晓利
- 该项目属于兽医传染病领域。主要内容：该成果基于明确法氏囊新分离活性五肽BP5免疫调节功能的基础上，利用基因工程技术，参照大肠杆菌偏嗜密码子优化设计重组法氏囊免疫融合肽TP5-BP5、Tα1-BP5和Tβ4-BP5基因，构...
- 关键词：
- 关键词：基因工程
- 一种类Metalnikowin抗菌肽及其应用
- 本发明公开了一种类Metalnikowin抗菌肽及其应用，属于分子生物学技术领域。类Metalnikowin抗菌肽由23个氨基酸组成，其氨基酸序列如SEQ？ID？NO.1所示，分子量大小为2742.17Da。该抗菌肽能够...
- 王臣李小康郭香玲牛明媚吴庭才
- 文献传递
- 一种抗禽流感的功能性饲料添加剂的制备方法
- 一种抗禽流感的功能性饲料添加剂的制备方法，将人工合成H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的部分片段和真核表达载体pBI-221连接获得重组质粒，通过基因枪、电转化等转化方法将获得的重组质粒转化入杜氏藻细胞，使血凝素在杜氏藻细...
- 冯书营王臣赵战勤李爱芳张小娟薛乐勋
- 文献传递
- 近年来河南省传染性法氏囊病分子流行病学调查
- 应用RT-PCR技术对2002-2005年间收集于河南省15个地区具有代表性的39株IBDV的VP2 基因进行了克隆和序列分析．结果发现,有30株地方流行株属于IBDV超强毒株,但各毒株间也有一定的差异;有9个分离株,既...
- 张春杰李银聚吴庭才程相朝郑祥海王臣余祖华
- 关键词：传染性法氏囊病分子流行病学
- 文献传递
