管海宏
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人源性抗角蛋白Fab抗体脂质体的制备
- 2005年
- 目的制备人源性抗角蛋白Feb抗体(HAKFA)脂质体,检测脂质体的体外释放及包裹和游离抗体的活性,探索HAKFA可行的应用途径.方法采用逆相蒸发与钙融合联合法制备HAKFA脂质体,在透射电镜下观察脂质体颗粒的性状及大小,应用紫外分光光度计检测抗体的包封率,ELISA检测包裹前后的抗体活性.结果本方法制备的脂质体呈现圆形、粒径大小较一致,约50～100nm;HAKFA脂质体包封率达到(60.3±12.7)％;HAKFA脂质体呈现缓释特性并且抗体依然保持良好的抗原结合活性.结论逆相蒸发与钙融合法为制备HAKFA脂质体较理想的方法.
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- 关键词：脂质体包封率
- 天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的多反应性鉴定及其分子机制的初步探讨被引量：4
- 2005年
- 目的对天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的多反应性进行鉴定,并探讨其分子基础。方法用间接酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫组化法检测3B4与多种抗原的反应活性,分析其可变区基因与氨基酸序列。结果3B4除与角蛋白和皮肤发生较强的反应外,尚能选择性与多种具有不同表位的抗原和不同的组织反应;同源性分析表明,其重、轻链可变区基因分别与胚系基因VH1J558.42及VK1am4高度同源;HCDR3区为该抗体区别于其他同源性较高的免疫球蛋白的惟一基序,主要由短的侧链氨基酸组成。结论天然抗角蛋白单克隆抗体3B4具有多反应性,由少量突变的胚系基因编码,HCDR3区的柔韧性可能是多反应性的分子基础之一。
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- 关键词：分子机制免疫组化法检测分子基础可变区基因同源性分析种抗原
- 多反应性分子机制的研究进展
- 2004年
- 多年来,传统免疫学理论一直认为抗原抗体间以“一把钥匙开一把锁”的方式特异性识别,但近二三十年研究发现的多反应性现象,更正或丰富了人们对抗原抗体间相互作用的认识。多反应性的分子机制是目前研究的热点之一。
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- 关键词：分子机制反应性抗原抗体相互作用钥匙
- 天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的噬菌体呈现的scFv的构建及表达被引量：1
- 2005年
- 目的:构建并表达噬菌体呈现的天然抗角蛋白单克隆抗体(mAb)3B4的单链抗体(scFv),并测定其活性。方法:分别以pMD18TmAb3B4VH和pMD18TmAb3B4VL为模板进行PCR,扩增mAb3B4的VH和VL基因,然后将其依次插入噬菌体表达载体pscMH中。经DNA序列测定正确后,转化大肠杆菌,用辅助噬菌体VCSM13超感染诱导表达scFv;用ELISA检测其与亲本mAb3B4的抗原结合活性的改变。结果:对扩增的mAb3B4的VH和VL基因进行测序,结果表明VH基因与原序列完全一致,VL基因在骨架区FR1有1个碱基发生突变。用VCSM13超感染后能检测到scFv的表达,其与亲本一样具有多反应性,但抗原结合模式不完全相同。结论:成功地构建并表达了天然抗角蛋白mAb3B4噬菌体呈现的单链抗体,表达的scFv与mAb3B4的抗原结合活性有一定的差异,为探讨天然自身抗体的抗原结合模式奠定了基础。
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- 关键词：天然抗角蛋白自身抗体SCFV
