粟盛梅
- 作品数：48 被引量：95H指数：5
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 日本血吸虫ATP合酶脂结合蛋白样蛋白基因结构与功能分析被引量：1
- 2005年
- 目的 利用生物信息学技术对已登录的日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)中国大陆株 (chinesestrain)新基因 -ATP合酶脂结合蛋白样蛋白 (ATPsynthaselipid -bindingprotein -likeprotein)基因结构和功能进行分析。 方法 使用NCBI ,SAPS ,TMHMM 2 .0 ,PsortII ,Protscale和Scanprosite等软件对新基因的结构和功能进行分析。 结果 通过Internet在线分析和生物信息学软件分析 ,对新基因的结构和功能有了进一步的认识 ,日本血吸虫ATP合酶脂结合蛋白样蛋白基因编码 12 2个氨基酸 ,分子量为 12 .7kDa ,等电点为 9.41,为一跨膜蛋白 ,含有磷酸化位点和烷基化位点。 结论 生物信息学技术有利于日本血吸虫新基因的结构和功能研究。
- 粟盛梅肖建华胡永轩曾桥黄家芳
- 关键词：日本血吸虫生物信息学
- hDaxx与12型腺病毒E1B 55KD癌蛋白在体内外的结合反应
- 2002年
- 目的 研究 12型腺病毒 (Adenovirus12 ,Ad12 ) E1B5 5 KD癌蛋白 (Ad12 E1B5 5 KD)打破 h Daxx与急性早幼粒细胞性白血病蛋白 (promyelocytic leukemia protein,PML)在细胞核共定位的机制。 方法 构建 h Daxx原核细胞表达质粒 p QE30 / h Daxx,并在大肠杆菌 (E.coli) BL2 1中诱导表达 ,用镍—氮基三乙酸 (Ni- NTA)琼脂糖加以纯化。通过体内外共免疫沉淀反应 ,Western blot方法研究 h Daxx与 Ad12 E1B5 5 KD直接结合反应。 结果 质粒 p QE30 / h Daxx在E.coli BL2 1中成功诱导表达了 h Daxx,其 N端有 6个组氨酸分子附着 (6 His- h Daxx)。Western blot结果显示 h Daxx在体内外与 Ad12 E1B5 5 KD发生直接结合反应。 结论 表达并获得纯化的 6 His- h Daxx,h Daxx能在体内外与 Ad12 E1B5 5 KD直接结合。
- 万艳平吴移谋粟盛梅余敏君尹卫国杨长顺
- 关键词：HDAXX急性早幼粒细胞性白血病
- 沙眼衣原体pORF5蛋白致炎症反应作用及机制初步研究
- 目的：分析沙眼衣原体pORF5蛋白对炎症反应的影响,并初步探讨其分子机制。方法：构建pORF5原核表达重组体pGEX-6p/pORF5、重组体经IPTG诱导表达GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶切制备不含GS...
- 何战胜粟盛梅龚思露邹燕雷文波李忠玉
- 关键词：沙眼衣原体P38MAPK炎症反应
- 改革医学微生物学实验教学 培养创新型医学人才被引量：14
- 2008年
- 医学微生物学实验准备工作质量的高低与实验教学效果有密切的关系。本文对实验技术人员自身素质、实验准备计划的制定、实验预做、实验技术人员和实验带教教师的关系、实验方法改革、实验准备模式等方面进行了改革和探索，为提高实验教学质量，培养医学生创新能力提供参考和借鉴。
- 唐双阳余敏君詹利生胡四海张愉快粟盛梅蔡恒玲
- 关键词：医学微生物学教学质量
- HPV16 E2蛋白及其TAD和DBD对巨噬细胞分泌TNF-α与IL-1β的影响
- 2012年
- 目的分析人乳头瘤病毒(HPV)16型E2蛋白及其转活性结构域(TAD)和DNA结合结构域(DBD)与绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白在巨噬细胞(MΦ)中的定位,并研究其对MΦ分泌TNF-α和IL-1β的影响。方法将质粒pEGFP-C1、pEGFP-C1/E2、pEGFP-C1/TAD、pEGFP-C1/DBD分别转染MΦ,倒置荧光显微镜下观察融合蛋白在MΦ中的分布与定位,通过ELISA测定转染细胞培养上清液中TNF-α和IL-1β的含量。结果 GFP、GFP-E2融合蛋白在MΦ细胞核、细胞浆内均有表达,且后者细胞核荧光亮度强于细胞浆;GFP-DBD融合蛋白表达于细胞核,GFP-TAD表达于细胞浆。GFP-E2组细胞培养上清中TNF-α和IL-1β含量分别为(321.83±22.00)pg/ml和(214.35±22.79)pg/ml,GFP-TAD组分别为(371.79±22.73)pg/ml和(233.52±17.75)pg/ml,GFP组和空白组分别为(265.74±28.74)pg/ml、167.60±18.68)pg/ml和(234.76±31.94)pg/ml、155.13±20.54l)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);GFP-DBD组分别为(258.24±33.55)pg/ml和(148.08±19.50)pg/ml,与GFP组和空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。GFP-TAD组与GFP-E2组比较TNF-α含量差异有统计学意义(P<0.05),IL-1β含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论真核表达载体pEGFP-C1/HPV16E2、pEGFP-C1/TAD、pEGFP-C1/DBD均能在MΦ中表达相应的融合蛋白,GFP-E2主要定位细胞核,GFP-DBD仅定位细胞核,GFP-TAD仅定位细胞浆;HPV16E2及其TAD即时高表达上调MΦ分泌TNF-α和IL-1β。
- 唐双阳刘安元余敏君尹卫国粟盛梅蔡恒玲万艳平
- 关键词：HPV16E2蛋白巨噬细胞TNF-ΑIL-1Β
- 分层次开放实验室 优化实验课程体系 提高医学生科研创新能力被引量：22
- 2011年
- 分析传统病原生物学实验教学弊端,阐述了实验课程对医学生科研创新能力培养的重要性。以省级示范实验室建设为依托,充分利用现有实验教学资源,优化实验课程体系,分层次开放实验室,拓展实验教学内容,创新实验教学手段,促进医学生实验课程教学改革,培养学生创新意识和科研能力,积极探索新型科研创新型医学人才的培养模式。
- 唐双阳李乐余敏君张愉快胡四海王可耕粟盛梅
- 关键词：课程体系
- 沙眼衣原体pORF5质粒蛋白对HeLa细胞蛋白表达谱的影响
- 目的:分析沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)质粒蛋白p ORF5基因转染He La细胞后所引起的蛋白表达谱的变化,为深入研究Ct的致病机制提供实验依据。方法:构建p ORF5基因慢病毒表达载体...
- 李忠玉戴文婷邹燕雷文波粟盛梅何战胜
- 关键词：沙眼衣原体差异蛋白
- 文献传递
- 沙眼衣原体质粒蛋白pORF5相互作用宿主蛋白的筛选及鉴定
- 目的 筛选并鉴定与沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)质粒蛋白pORF5相互作用的宿主蛋白,为深入研究Ct的致病机制提供实验依据.方法 构建pORF5基因慢病毒表达载体,与辅助质粒共转染293T...
- 戴文婷粟盛梅龚思璐邹燕雷文波李忠玉
- 沙眼衣原体pORF5稳定转染HeLa细胞后宿主蛋白转录谱分析被引量：3
- 2017年
- 目的分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，Ct）质粒蛋白pORF5基因对HeLa细胞蛋白质表达谱的影响，为深入研究Ct致病机制提供实验依据。方法构建pORF5基因慢病毒表达载体，与辅助质粒共转染293T细胞包装慢病毒颗粒，收集慢病毒后感染HeLa细胞，流式细胞术多次分选获得pORF5基因稳定转染的HeLa细胞系（pORF5-HeLa细胞系）和对照HeLa细胞系。采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术结合二维液相色谱串联质谱（2DLC-MS/MS）技术建立pORF5-HeLa细胞和对照HeLa细胞蛋白质表达谱，筛选并构建差异蛋白质表达数据库，采用qRT-PCR和Western blot方法对部分差异蛋白质进行验证。结果成功建立了稳定过表达pORF5基因的HeLa细胞系和对照细胞系；采用iTRAQ结合2D LC-MS/MS质谱技术共鉴定了314个差异表达的宿主蛋白质，其中有159个蛋白质表达上调，155个蛋白质表达下调。差异蛋白质主要涉及代谢过程、免疫应答、生物黏附等众多事件。pORF5基因转染的HeLa细胞中组蛋白H1.2C（HIST1H1C）、血红蛋白α亚基（HBA1）、帕金森蛋白（PARK7）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、HMGB2的mRNA表达水平上调，而胞内氯离通道蛋白1（CLIC1）、细胞角蛋白7（KRT7）、SFN（14-3-3σ）、周期素依赖性刺激抑制因子2A（CDKN2A）的mRNA表达水平下调，Western blot证实PARK7、HMGB1蛋白表达水平增加，这些结果均与蛋白质组学结果一致。结论成功构建了pORF5基因稳定转染HeLa细胞的差异蛋白质表达谱，发现了一组受pORF5基因调控并与细胞代谢、增殖和黏附等生物学过程相关的差异表达蛋白质。提示pORF5可能通过改变宿主蛋白质的表达，影响宿主细胞生物学行为以促进Ct的生长发育。
- 戴文婷何战胜粟盛梅周洲陈超群李忠玉
- 关键词：沙眼衣原体蛋白质组学技术差异蛋白质
- 沙眼衣原体pORF5质粒蛋白激活p38MAPK和NALP3信号通路调控THP-1细胞IL-1β分泌的研究被引量：3
- 2018年
- 目的研究沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白诱导THP-1细胞产生IL-1β的分子机制,为阐明Ct致病机制提供实验依据。方法将原核表达重组体pGEX-6p/pORF5转化大肠埃希菌,表达并纯化GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶切后制备不含GST标签的pORF5蛋白;用不同浓度的pORF5蛋白体外刺激THP-1细胞,ELISA测定不同时间IL-1β水平;分别用NALP3siRNA、ASC siRNA、Caspase-1抑制剂和p38抑制剂预处理THP-1细胞,再用pORF5蛋白刺激THP-1细胞24h,ELISA测定IL-1β含量,Real-time PCR测定IL-1β和NALP3炎性体mRNA的表达,Western blot分析Caspase-1的表达及p38磷酸化水平。结果 pORF5蛋白以剂量和时间依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β,24μg/ml pORF5蛋白刺激24h时IL-1β的表达水平达到峰值(495.1±55.5pg/ml);pORF5蛋白能促进THP-1细胞中NALP3炎性体mRNA的表达;NALP3-siRNA、ASC-siRNA及Caspase-1抑制剂预处理THP-1细胞后,IL-1β分泌量分别降低37.7%、71.3%和40.1%;p38抑制剂能降低NALP3炎性体mRNA及IL-1β分泌量(P<0.01),但抑制NALP3炎性体后p38磷酸化水平未受影响(P>0.05)。结论 pORF5质粒蛋白通过激活p38MAPK和NALP3信号通路共同调控IL-1β的产生和分泌。
- 刘安元李群聂倩陶立坚粟盛梅周洲李忠玉
- 关键词：沙眼衣原体IL-1Β
