胡纯婷
- 作品数：7 被引量：40H指数：4
- 供职机构：南方医科大学基础医学院病理学系更多>>
- 发文基金：广东省高等学校科技创新团队项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-21通过PTEN/AKT通路抑制白血病细胞K562的迁移和增殖被引量：17
- 2013年
- 目的 miR-21在多种肿瘤中的研究已有大量文献报道,但其对白血病细胞迁移和增殖的影响及其可能机制尚未完全阐明,文中旨在探讨抑制miR-21对白血病K562细胞迁移和增殖能力的影响及可能的作用机制。方法将miR-21 inhibitor用LipofectamineTM2000转染K562细胞,荧光定量PCR检测miR-21的表达水平;Transwell迁移实验和Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测细胞迁移和增殖变化;Western blot检测PTEN、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达变化。结果抑制miR-21表达后K562细胞的迁移和增殖能力均受到明显抑制;抑制miR-21能明显增强PTEN蛋白和减低p-AKT蛋白表达水平,对AKT蛋白水平无明显影响。结论抑制miR-21表达可能通过调控PTEN/AKT通路抑制白血病K562细胞迁移和增殖。
- 吴共发黄绮亭曾宇婷林俊汕叶梓莹胡纯婷
- 关键词：MIR-21白血病PTENAKT
- 简易的单个肿瘤干细胞分离及其培养方法
- 2012年
- 目的建立一套简单有效的单个肿瘤干细胞分离及培养方法,提高研究的效率与质量。方法在火焰上轻烤拉伸后的毛细管,与无菌塑料管连接建立口控毛细管单细胞分离装置。分离单个SW480细胞无血清培养筛选出克隆球,CD133、CK7荧光标记鉴定;消化克隆球吸取单个肿瘤干细胞并移至石蜡油封闭的微滴及96孔板中培养对比观察。结果 SW480细胞克隆形成率约为1.04%,其CD133表达强CK7表达弱;口控毛细管单细胞分离装置分离单个肿瘤干细胞的有效率可高达98.99%;单个肿瘤干细胞在微滴中培养与在96孔板中培养的比较:在分裂时间点上,前两次分裂时间相差无几(P>0.05),在微滴中培养的细胞后续分裂需时较长;在持续扩增的数量上,微滴培养为11.5%(22/192)而96孔板为9.2%(17/184),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论单个SW480细胞无血清培养可形成肿瘤干细胞球,口控单细胞分离装置能够有效分离单个肿瘤干细胞,石蜡油封闭微滴培养法和96孔板培养法均能够有效扩增单个肿瘤干细胞。但石蜡油封闭微滴培养法操作灵活、观察便捷、环境稳定,可作为培养单个肿瘤干细胞的首选。
- 邓永键蒋强于莉娜于莉娜于莉娜王红霞丁彦青
- 关键词：肿瘤干细胞
- miR-205对黑色素瘤A375细胞增殖、黏附和迁移的影响及机制探讨被引量：5
- 2012年
- 目的探讨miR-205对人皮肤恶性黑色素瘤细胞系A375增殖、黏附和迁移的影响及其可能机制。方法将miR-205 mimics用阳离子脂质体LipofectamineTM2000转染A375细胞,CCK-8法测细胞增殖变化;细胞黏附实验和划痕实验检测细胞黏附和迁移能力变化。Western blot检测PTEN、总AKT和磷酸化AKT蛋白表达变化。结果上调miR-205表达后实验组的细胞增殖、黏附和迁移能力均比空白对照组和阴性对照组减低(P均<0.05);Western blot结果显示上调miR-205表达能增加PTEN蛋白表达,减低磷酸化AKT蛋白水平,但对非AKT蛋白表达无影响。结论 miR-205可能通过调控PTEN/AKT通路抑制黑色素瘤细胞的增殖、黏附和迁移能力。
- 孙慧娟胡纯婷吴共发
- 关键词：黑色素瘤细胞系微小RNA
- MicroRNA-200c通过TGF-β/Smad通路抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和胶原合成被引量：9
- 2012年
- 目的:探讨mi croRNA-200c(miR-200c)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原合成的影响,并阐明其涉及的TGF-β/Smad通路机制。方法:将mi R-200c mi mics用oligofectami脂质体转染经TGF-β1诱导的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测细胞增殖变化;3H-脯氨酸掺入法测胶原蛋白水平的变化。相关蛋白表达变化和TGF-β1分泌表达变化分别用Western blot和ELISA法检测。结果:mi R-200c明显抑制经TGF-β1诱导的人瘢痕疙瘩纤维细胞的增殖和胶原合成;mi R-200c能明显减低磷酸化Smad2和Smad3的蛋白表达水平及抑制博莱霉素诱导的TGF-β1分泌。结论:miR-200c能明显抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原合成,其机制可能与抑制TGF-β/Smad通路相关。
- 孙慧娟蒙喜永胡纯婷
- 关键词：MIR-200C转化生长因子-Β1
- miR-205抑制人黑素瘤细胞A375侵袭和对MMP2/9蛋白表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究miR-205对人皮肤黑素瘤细胞系A375的侵袭能力和MMP2,MMP9的影响,探讨miR-205影响黑色素细胞侵袭的机制。方法将miR-205 mimics用阳离子脂质体LipofectamineTM2000转染A375细胞,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力变化,Western blot和ELISA检测MMP2和MMP9蛋白表达变化。结果 Transwell侵袭实验显示转染miR-205 mimics后细胞的穿膜数(75.21±11.32)明显低于空白对照组(133.20±8.69)及阴性对照组(128.90±7.03),Western blot和ELISA结果均证实miR-205 mimics能明显减低MMP2/9蛋白表达,以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 miR-205可能通过减低MMP2和MMP9表达抑制黑素瘤细胞的侵袭能力。
- 廖家胡纯婷吴共发吴昌辉
- 关键词：黑素瘤基质金属蛋白酶
- 裸鼠肝窦内皮细胞的分离、培养及鉴定被引量：4
- 2012年
- 背景:建立裸鼠肝窦内皮细胞的原代分离培养方法,进一步研究其生长特点及生物学特性。目的:建立裸鼠肝窦内皮细胞的原代分离、培养方法,并鉴定其纯度及观察其生物学特性。方法:无菌下摘除裸鼠肝脏,剪成1mm3大小,Ⅳ型胶原酶在37℃恒温下消化,应用CD146免疫磁珠分选肝窦内皮细胞,在倒置显微镜观察内皮细胞形态及生长特性,用von-Willebrand因子免疫细胞化学验证分选细胞的表面蛋白表达,鉴定肝窦内皮细胞的纯度,Hochest33342测定凋亡。结果与结论:分离的肝窦内皮细胞纯度达95%以上,活力好,光镜下可以看到典型的铺路石样形态,von-Willebrand因子免疫细胞化学染色阳性。肝窦内皮细胞在体外培养3周后凋亡。提示Ⅳ型胶原酶消化加CD146免疫磁珠分选肝窦内皮细胞纯度高,方法可靠。
- 王红霞邓永键蒋强唐娜胡纯婷张江宇丁彦青
- 关键词：肝窦内皮细胞裸鼠CD146免疫磁珠
- miR-200c抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和胶原合成的研究被引量：4
- 2013年
- 目的：探讨miR-200c对人瘢痕疙瘩成纤维细胞human keloid fibroblasts，HKFs）增殖和胶原合成的影响及阐明其机制。方法：将miR-200c mimics用oligofectami脂质体转染经转化生长因子（TGF）-β1诱导的HKFs，CCK-8法测细胞增殖变化；3H-脯氨酸掺入法测胶原蛋白水平的变化。Western blot检测细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）及磷酸化ERK1／2蛋白表达变化。结果：在有或无TGF-β1刺激下，miR一200c均能明显抑制HKFs的增殖能力及胶原合成，并且能明显减低磷酸化ERK1／2蛋白表达水平，但对非磷酸化ERK表达无影响。结论：miR-200c能抑制HKFs增殖和胶原合成．并起拮抗TGF-B1的作用。其机制可能是通过降低ERK通路活性介导实现的。
- 孙慧娟胡纯婷
- 关键词：MIR-200C细胞外信号调节激酶
