董晓敏 作品数:22 被引量:102 H指数:6 供职机构: 北京大学基础医学院细胞生物学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 面向21世纪教育振兴行动计划 国家教育部“985工程” 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 政治法律 更多>>
层粘连蛋白对晚G_1期人胃癌BGC-823细胞生长的促进作用 被引量:6 2007年 为研究层粘连蛋白(laminin,LN)促进肿瘤细胞生长作用,采用脉冲标记计数有丝分裂百分率(percentage labeling mitosis,PLM)法测得体外培养人胃癌(BGC-823)细胞周期时间为41h,其中G1期时间为24.5h.分裂细胞脱离法获取分裂期细胞,继续培养23h,在细胞运行进入G1晚期时,将其置于LN0、0.11、0.55、1.10μmol/L基质上孵育4h;细胞荧光光度计检测晚G1期细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白、DNA含量.结果显示,LN与其膜上受体结合后引起细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白、DNA含量增加,尤以在0.55μmol/LLN作用显著(P<0.001).蛋白质免疫印迹分析证明,cPKC-α呈现表达,提示LN与其受体结合可增强其细胞cPKC-α的活性;分析G1期细胞周期蛋白E(cyclinE)、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2表达水平,呈现逐渐增强的趋势;LN可诱导c-Myc蛋白呈现高表达,提示LN与其受体结合增强与细胞增殖密切相关的基因表达;在LN作用前后的BGC-823细胞均未检测到Bax蛋白表达.结果提示,在人胃癌(BGC-823)细胞G1/S期交界处,层粘连蛋白与其膜上受体结合引起细胞内Ca2+浓度升高,诱导钙调蛋白的释放,其含量增加,增强蛋白激酶C的活化,导致细胞内DNA含量增加、G1/S期细胞周期蛋白与CDK表达增强、诱导原癌基因c-Myc呈持续表达状态,而凋亡基因Bax不表达. 孟书聪 董晓敏 张莎 林明 黄应申 肖军军关键词:层粘连蛋白 脂蟾毒配基对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长的抑制作用 被引量:12 2006年 目的观察脂蟾毒配基对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法于给药前、给药期间(15d)及停药期间(6d)每3d测量肿瘤的长径及短径,并计算近似瘤体积,停药第6天取瘤称重并进行病理学观察。结果①高剂量脂蟾毒配基(15mg/kg)有较强的急性神经毒性。②脂蟾毒配基对荷瘤鼠体重无明显影响。③高剂量脂蟾毒配基(15mg/kg)对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长有明显的抑制作用,停药后没有明显的后续抑制作用,15mg/kg的脂蟾毒配基与5mg/kg平阳霉素对肿瘤增长的抑瘤强度相当。④脂蟾毒配基未发现明显的近期毒性。结论脂蟾毒配基对裸鼠的Hela宫颈癌移植瘤有明显的抑瘤作用,脂蟾毒配基是中药蟾酥抗癌的重要成分,但也发现该化合物有明显的急性神经毒性,进一步开发需要慎重。 王传社 李燕燕 陈娜 李寅增 肖军军 孟书聪 董晓敏 果德安 黄启福关键词:脂蟾毒配基 肿瘤 宫颈癌HELA 裸鼠 脂蟾毒配基对HL-60细胞分化的影响 目的:探讨脂蟾毒配基诱导HL-60细胞分化与细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化。方法:体外培养人白血病HL-60细胞系,Rhodamine 123染色标记活细胞线粒体,荧光显微镜下观察脂蟾毒配基(RG)对线粒体形态的变化;酶... 董晓敏 孟书聪 肖军军 王传社 果德安关键词:脂蟾毒配基 细胞分化 免疫印迹法 白血病 HL-60细胞 文献传递 胰岛素对PC12细胞神经型一氧化氮合酶表达及活性的影响 被引量:1 2003年 为探讨胰岛素对神经细胞中神经型一氧化氮合酶 (nNOS)的表达及活性的影响 ,应用流式细胞术、原位杂交、电子自旋共振等技术方法研究胰岛素对PC12细胞中神经型一氧化氮合酶的影响 .胰岛素作用PC12细胞9h后 ,神经型一氧化氮合酶的免疫荧光强度显著升高 ,且呈浓度依赖关系 ,其最大效应为对照的 (155± 13 ) %(P <0 0 1,n =3 ,t test) .加入胰岛素 (16mU /L ,6h)也能够显著上调nNOSmRNA的表达 ,为对照的 (182± 13 ) % (P <0 0 1,n =3 ,t test) .另外加入胰岛素 (16mU /L)作用 9h后 ,神经型一氧化氮合酶的活性也显著升高 ,为对照的 (167± 15) % (P <0 0 1,n =4,t test) .由上述结果可知 。 袁中瑞 鲁丹丹 董晓敏 古力努尔 程晟 卢景雰关键词:胰岛素 神经型一氧化氮合酶 电子自旋共振 PC12细胞 连续植块培养原代成骨细胞及其特性的比较 被引量:19 2004年 目的 :探讨简便、经济、高效的原代成骨细胞培养方法 ,并比较其特性。方法 :收集 1~ 4次连续植块培养获得的SD乳鼠颅盖骨原代成骨细胞 ,观察第 1~ 4次连续植块培养获得的成骨细胞在细胞形态、分裂增殖、碱性磷酸酶 (ALP)活性及骨钙素和BMP 2免疫组织化学表达的变化。结果 :连续植块培养收集的 1~ 4次原代成骨细胞 ,在细胞贴壁、变形、铺展、汇合时间 ,Gomori改良钙 -钴法ALP活性 ,骨钙素及BMP 2免疫组织化学染色表达上 ,均没有明显的区别。结论 :连续植块培养可获得与植块培养性状相同的SD乳鼠原代成骨细胞 ,且细胞数量多 ,节约经费、时间 ,操作简便。 王稚英 王兴 肖军军 董晓敏 孟书聪 赵曼关键词:成骨细胞 细胞培养 免疫组织化学 骨钙素 碱性磷酸酶 改良的Timm染色法显示大鼠海马苔藓纤维末梢出芽的变化 被引量:2 2001年 宋青 孟书聪 董晓敏 肖军军关键词:染色法 苔藓纤维 从原代细胞培养的教学中体会教书育人意义 细胞培养是医学细胞生物学实验最要基本的技术之一,我们在提高细胞培养实验课教学质量的同时,注重教书育人,取得了很好的教学效果,我们的体会是:一、通过《细胞原代培养》树立学生动物实验的规范观念 肖军军 张莎 赵翔 董晓敏 宋青 孟书聪 林明文献传递 外源性层粘连蛋白对G1晚期人胃癌细胞生物学特性的研究 层粘连蛋白与癌细胞表面其受体结合介导肿瘤细胞粘附、侵袭和转移,可引起多种生物学行为。本文探讨层粘连蛋白G1晚期人胃结合介导细胞内Ca2+浓度、钙调蛋自、核DNA含量、蛋白激酶C 变化和c-fos基因的表达。体外培养以人胃... 孟书聪 董晓敏 肖军军 黄应申 张莎 林明关键词:层粘连蛋白 人胃癌 G1 细胞生物学特性 外源性 文献传递 新型有机硒化合物双硒唑烷-1的动物体内免疫调节作用 被引量:4 2006年 目的:检测新型有机硒化合物双硒唑烷-1(Ethaselen-1,Eb1)的动物体内免疫调节作用。方法:建立Lew-is肺癌(Lew is lung cancer,LLC)皮下移植瘤C57/BL鼠动物模型,选取25.0 mg/kg和12.5 mg/kg两个剂量的Eb1作为实验药物,以左旋咪唑(levam isole,LMS)2.0 mg/kg作为阳性对照,以溶剂5 g/L羧甲基纤维素钠溶液为阴性对照,于接种肿瘤后第2天开始向C57/BL鼠腹腔连续注射7 d药物,探讨Eb1对正常及肿瘤鼠的相对脾重、脾淋巴细胞转化活性、自然杀伤(natural k iller,NK)细胞活性、淋巴因子-激活杀伤(lymphok ine-activated k iller,LAK)细胞活性及淋巴细胞CD4+,CD8+亚群阳性细胞百分数的影响。结果:高剂量Eb1能够使正常鼠和肿瘤鼠的相对脾重增加150.59%和122.55%,脾淋巴细胞转化活性增加162.25%和561.98%,NK细胞活性增加78.60%和219.42%,脾淋巴细胞CD4-CD8+亚群阳性细胞百分含量增加104.72%和105.87%,高剂量Eb1亦能使肿瘤鼠的LAK细胞活性增加195.11%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:新型有机硒化合物Eb1在C57/BL小鼠体内具有明显的免疫调节作用。 王怡瑞 肖军军 董晓敏 孟书聪 邓声菊 况斌 严俊 赵芳 曾慧慧关键词:有机硒化合物 抗体生成 免疫活性 小鼠 脂蟾毒配基通过线粒体途径诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的研究 被引量:24 2006年 目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位(△ψm)变化;WesternBlot检测与细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果:RG显著抑制细胞增殖,其作用24、48、72h的IC50分别为3.8、1.8、1.2"mol/L;经10"mol/LRG处理24h后,癌细胞出现凋亡的形态变化,其凋亡率明显高于对照组细胞;RG引起△ψm下降,释放入胞质中的细胞色素c(cytochromec,CytC)增多,促进Caspase-3蛋白活化,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导细胞凋亡。结论:RG诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡,其诱导凋亡作用可能通过线粒体通路实现。 黄应申 肖军军 孟书聪 董晓敏 王传社 果德安关键词:脂蟾毒配基 细胞凋亡