蔡少华
- 作品数:19 被引量:139H指数:7
- 供职机构:中国农业科学院蔬菜花卉研究所更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 甘薯病毒及类似病毒病害被引量:13
- 1992年
- 近十年来,发现甘薯种性退化比较严重,导致块根产量降低。退化的原因除去无性变异等外,病毒及类似病毒病的危害也是重要因素之。病毒引起马铃薯退化已是众所周知,而引起甘薯退化尚未引起足够的重视。 甘薯是我国四大主要的粮食作物之一,也是食品工业、轻工业和饲料工业的重要原料。我国甘薯种植面积达8000万亩。
- 李汝刚蔡少华宋伯符
- 关键词:甘薯病毒病毒病病害
- 应用单克隆抗体免疫荧光技术检测马铃薯青枯病潜伏侵染的初步研究被引量:4
- 1992年
- 应用单克隆抗体免疫荧光技术(MIF)检测了青枯病在马铃薯种薯上的潜伏侵染。测试结果表明,MIF检测青枯病茵的灵敏度为2×10~3~2×10~4细菌/毫升。787.5倍荧光显微镜,每视野平坶有5个以上典型荧光细菌,即可判别为带菌(阳性),而1~4个荧光细菌则视为可疑,需作生物测定。从种薯脐部取样,经组织匀浆后采用低、高速离心收集细菌体,可提高样品青枯菌的检出率。
- 谢云陆高德香何礼远王远程蔡少华
- 关键词:马铃薯青枯病侵染单克隆抗体
- 分泌抗马铃薯Y病毒单克隆抗体的大鼠杂交瘤细胞系的建立及抗体稳定性测定被引量:2
- 1990年
- 用大鼠的骨髓瘤细胞系(IR983)与经马铃薯Y病毒(PVY)免疫的大鼠(LOU/c)脾细胞融合,建立了3类分泌抗该病毒株系特异性单克隆抗体(McAB)的杂交瘤细胞系。其一对PVY^n具有特异性反虚;其二对PVY°具有特异性反应;其三对PVY^n和PVY°均产生反应。经用ELIAA双抗体夹心法和ELISA间接法检测,上述(McAb)同TMV、CMV、TEV、AMV、TuMV、PLRV、PVX七种植物病毒均不产生交叉反应。对上述杂交瘤细胞系和McAb的生物学特性及理化特性进行了鉴定。
- 郭军肖小文蔡少华路文长刘诩平徐惠迪
- 关键词:马铃薯Y病毒
- 甘薯羽状斑驳病毒cDNA探针的克隆及其应用被引量:6
- 1992年
- 从表现病毒症状的甘薯叶片中直接提取甘薯羽状斑驳病毒(sweet Potato Feathery Mo-ttle Virus,SPFMV),用酚-SDS-蛋白酶 K 法提取 SPFMV RNA,以 Oligo(dT)作引物合成cDNA。以质粒 pUC19为载体,转化 E.coli DH5α,筛选出插入片段长度为1.9kb 的阳性克隆,以此制备探针,与 SPFMV(RC 株)感染的巴西牵牛(Ipomoca setosa)和牵牛(I.nil)叶片总核酸抽提液进行斑点杂交呈阳性反应。^(32)P 和生物素标记的 cDNA 探针杂交试验均得到理想结果。
- 邱并生赵丰王小风田波李汝刚蔡少华
- 关键词:CDNA克隆甘薯羽状斑驳病毒
- 分泌抗马铃薯X病毒株系特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及抗体理化性质测定被引量:3
- 1989年
- 用马铃薯X病毒(PVX)免疫的BALB/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经3次克隆化后,筛选出3类分泌抗PVX株系特异性的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,该细胞株经传代20代以上,并经液氮冻存一年以后仍表现稳定。3个杂交瘤细胞株染色体数目集中在92—102条之间,其免疫球蛋白亚类均为IgG3,用ELISA间接法测定细胞培养上清滴度为1∶320—1∶640,小鼠腹水抗体滴度为1∶102400—1∶204800,后者比兔抗血清滴度(1∶320)高300倍以上。McAb对抗原具有中和作用,中和滴度为1∶10~2。经反复冻融、硫铵沉淀和冻干后,抗体活性无明显变化。
- 肖小文郭军蔡少华刘佳冯兰香徐惠迪
- 关键词:马铃薯X病毒杂交瘤单克隆抗体
- 用于检测马铃薯X病毒HB株系的单克隆抗体的研制被引量:1
- 1993年
- 经诱导耐受性免疫、细胞融合及克隆化培养,建立了2类6株稳定分泌抗马铃薯X病毒(PVX)株系特异性高滴度的单克隆抗体(McAb)小鼠杂交瘤细胞系。间接DAS—ELISA测定表明:Ⅰ类细胞系(1—6G8,1-7E8,2—5G9)分泌的抗体只与PVX—HB和PVX—c反应,Ⅱ类细胞系(1-6F1,1-9C11,1—9C8)分泌的抗体与测试的5个株系均有反应,但当用病毒直接包被ELISA板时,Ⅲ类抗体同PVX—C不产生反应。因此将两类单克隆抗体配合使用可鉴别诊断PVX—HB株系。用辣根过氧化物酶(HRP)对McAb1—7E8进行了标记并成功地以DAS—ELISA法检测。这两类能鉴别诊断PVX—HB株系的抗体对马铃薯抗病品种的选育、无病毒种薯的生产及进口种苗的检测都是相当有用的试剂。
- 李汝刚蔡少华刘佳冯兰香徐惠迪
- 关键词:马铃薯X病毒单克隆抗体
- 在中空纤维细胞培养系统内用无血清培养基生产单克隆抗体
- 1992年
- 用1640SFM无血清培养基在VF-2中空纤维细胞培养系统内培养7E8杂交瘤细胞,最大活细胞密度为2.34×10~6/ml,该活细胞密度分别是转瓶培养和静态瓶培养结果的3.7倍和2.2倍。培养42天共收获7E8细胞培养液10000ml,其单克隆抗体(简称单抗)的ELISA效价为1:20000左右,该效价是转瓶培养和静态瓶培养结果的25倍。1000ml培养液经50%饱和硫酸铵盐析和Sephadex G-200柱层析提纯,获纯化单抗IgG 51.82mg。该系统平均每天生产单抗12.3mg。研究结果表明:在中空纤维培养系统内用无血清培养基培养杂交瘤细胞的方法可望用于体外大规模生产单抗。
- 周维松蔡少华
- 关键词:单克隆抗体杂交瘤
- 甘蓝新品种中甘11号和中甘8号的育成
- 方智远孙培田刘玉梅杨丽梅刘佳冯兰香侯安福蔡少华
- 甘蓝是中国重要蔬菜。为提高甘蓝生产水平,国外采用自交不亲和系的途径培育新品种,由于几乎所有品种均为一代杂种,且亲本保密,不能直接为中国利用。20世纪70年代国内育成的早熟春甘蓝品种“报春”因两亲花期相差过大,采种困难,加...
- 关键词:
- 关键词:甘蓝中甘11号抗病品种
- 用ELISA和Dot-ELISA方法检测植物病原的比较研究被引量:7
- 1992年
- 比较了ELISA和Dot-ELISA方法检测番茄巨芽类菌原体(Tomato Big Bud Mycoplatma-Like Organism,TBB-MLO)、番茄斑萎病毒(Tomato Spotted Wilt Virus,TSWV)和青枯假单胞菌(Pseudomonas solanacearum)的差异,结果表明,两种方法对番茄斑萎病毒无明显差异,对番茄巨芽类菌原体,用Dot-ELISA比用ELISA的检测灵敏度高50—100倍,对青桔假单胞菌,用Dot-ELISA比用ELISA检泓抗原的灵敏度高20倍,而检测抗体的灵敏度高100倍。
- 王远程蔡少华谢云陆何礼远徐惠迪
- 关键词:植物病原ELISA
- 应用单克隆抗体免疫学技术检测种姜姜瘟病的初步研究被引量:9
- 1991年
- 姜瘟病是由青枯病菌(PsedomonasSolanacearum)引起的一种细菌病害,俗称姜腐烂病。70年代以来,我国山东、浙江、福建和四川等生姜集产区均遭到其不同程度的危害。病地一般减产1至2成。
- 谢云陆高德香何礼远王远程蔡少华
- 关键词:姜瘟病单克隆抗体