袁阳
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肺鳞癌细胞系CHLH-1建立
- 2007年
- 目的:建立人肺鳞癌细胞系,探讨其生物学特性。方法:取人肺鳞癌新鲜手术标本,经组织块体外培养并克隆建系,命名为CHLH-1。采用光镜、电镜、染色体核型分析及异种移植瘤实验对细胞系生物学特性进行观察。结果:原位肿瘤、细胞系及移植瘤标本经光镜、电镜证实该细胞系具有鳞状上皮性恶性细胞特征,并观察了其体外生长曲线、倍增时间和分裂指数;染色体核型分析众数为60～68,为亚三倍体;裸鼠皮下异种移植形成移植瘤。结论:根据细胞系特征显示该细胞系是一新建的肺鳞癌细胞系。
- 刘鸿程黄盛东龚德军刘晓红袁阳徐志云
- 关键词：鳞癌细胞系
- 靶向EGFR基因siRNA腺病毒载体构建及其对EL-4影响
- 2008年
- 目的构建含EGFR基因siRNA腺病毒载体,并研究其对EL-4细胞株中EGFR基因表达的影响。方法合成双链寡核苷酸并克隆入pShuttleH1载体,pShuttleH1-siEGFR线性化后电转化到含pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中获取重组质粒,脂质体转染293细胞获取重组腺病毒Ad-siEGFR;TCID50法测定病毒效价;利用得到的重组腺病毒感染鼠EL-4细胞株,采用Western-blot检测感染前后EGFR蛋白表达水平的变化,观察AdH1/siEGFR对EL-4细胞EGFR表达的影响。结果成功构建EGFRsiRNA腺病毒载体,该载体可明显抑制EL-4细胞中EGFR蛋白的表达。结论构建的AdH1/siEGFR腺病毒能有效抑制EGFR基因在EL-4细胞株中的表达,为胸腺瘤基因治疗提供了新的方法和材料。
- 刘鸿程黄盛东龚德军刘晓红袁阳徐志云
- 关键词：SIRNAEGFR基因
- 层层静电自组装多聚电解质共混膜与组织工程心脏瓣膜细胞的黏附
- 2009年
- 背景:组织工程心脏瓣膜研究中的核心和难点是种子细胞在支架材料上的黏附。层层静电自组装技术能够将多聚阴阳离子组装成多层膜状结构增加材料表面的生物相容性。目的:拟对猪去细胞瓣膜在体外进行层层静电自组装成多聚电解质共混膜,并且检测共混膜对种子细胞黏附的效果。设计时间及地点:细胞学体外观察性实验,于2008-09/2009-02在解放军第二军医大学长海医院胸心外科实验室和复旦大学高分子科学系实验室完成。材料:新鲜猪心脏瓣膜取自上海五丰上食肉联厂,采用酶消化法将猪主动脉瓣叶行脱细胞处理。密度梯度离心法从骨髓中获取骨髓单个核细胞,体外扩增培养后鉴定。方法:通过层层静电自组装技术构建20,10,5,0层的壳聚糖/透明质酸共混膜履盖在猪去细胞瓣膜支架上。将骨髓基质干细胞在涂膜支架上种植培养并检测支架对种子细胞的黏附效果。主要观察指标:扫描电镜观察、细胞计数、MTT检测组织工程心脏瓣膜上种子细胞的形态和细胞黏附效果。结果:扫描电镜观察20层壳聚糖/透明质酸多层膜样品上细胞生长情况比较好,样品上可以铺满细胞。而在组装层数为5层和10层的样品上,细胞生长的比较少。构建层数为20层的瓣叶,其细胞计数及吸光值高于10层和5层构建的瓣叶(P<0.01)。构建层数为10层和5层的瓣叶与0层比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:通过层层静电自组装技术构建的共混膜能够促进种子细胞的黏附,而且有一定的量效关系。
- 李秋泽吴凌翔杨立信龚德军袁阳钟伟黄盛东徐志云
- 关键词：组织工程心脏瓣膜细胞黏附
