贾原 作品数:22 被引量:32 H指数:4 供职机构: 山西医科大学 更多>> 发文基金: 山西省自然科学基金 国家自然科学基金 山西省软科学研究计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 电子电信 更多>>
流式检测技术与LDH法检测NK细胞活性的比较 研究背景:自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)又称天然杀伤细胞,其抗病毒感染、抗肿瘤无MHC限制性,已作为临床细胞免疫治疗肿瘤的一个重要治疗手段。目前常用的检测NK细胞的细胞毒效应的方法有MTT法... 郭继强 韩亚萍 贾原 李芳 赵晴 张俊萍关键词:NK细胞 活性检测 文献传递 曲妥珠单抗增强肺癌患者外周血来源CIK细胞活性 研究背景:目前,在临床治疗肿瘤的过程中,细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkillercells,CIK)已被认为是一种有效的治疗手段。其具有增殖速度快、杀伤活性高、杀瘤谱广以及副作用小等特点,广泛... 郭继强 韩亚萍 贾原 李芳 赵晴 张俊萍关键词:曲妥珠单抗 肺癌 CIK 活性 文献传递 穿膜肽介导的NY-ESO-1_(155-163)诱导CTL对黑素瘤A-375细胞的杀伤活性 2015年 目的:探讨穿膜肽(cell penetrating peptide,CPP)Tat_(49-57)携带NY-ESO-1_(155-163)抗原肽致敏DC后诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL),并体外检测其对黑素瘤细胞株A-375的杀伤效果。方法:采集健康志愿者外周血50 ml,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,经细胞因子诱导,获得DC和T淋巴细胞。实验组用Tat_(49-57)-NYESO-1155-163致敏DC,待DC成熟后与T淋巴细胞混合诱导产生CTL,并设PBS组和NY-ESO-1_(155-163)组作为对照。流式细胞术检测致敏前后DC的表型,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测抗原肽疫苗致敏DC后诱导的CTL对黑素瘤细胞株A-375的体外杀伤活性,同时与对人肺癌A549细胞株、人白血病K562细胞的杀伤作用进行比较。结果:Tat显著提升NY-ESO-1_(155-163)进入DC的穿膜能力。与NY-ESO-1_(155-163)致敏的DC相比,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)致敏后DC的CD80/CD86[(54.9±3.3)%vs(43.8±5.7)%,P<0.05]和CD40[(42.1±1.9)%vs(23.7±2.8)%,P<0.05]的表达率显著升高。Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)刺激DC后诱导培养的T细胞亚群主要以MHC-Ⅰ类分子介导的CD3+CD8+细胞为主。Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)组CTL对A-375细胞的杀伤能力显著高于NY-ESO-1_(155-163)组,且随着效靶比的增加,杀伤活性逐渐增强(P<0.05)。A-375细胞高表达NY-ESO-1,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)组CTL对A-375细胞具有特异性杀伤作用,杀伤作用显著强于A549和K562细胞(均P<0.05)。结论:Tat_(49-57)可以增强NY-ESO-1_(155-163)抗原多肽的免疫原性,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)多肽致敏DC能有效诱导CTL抗黑素瘤细胞A-375的特异性免疫应答。 李文丽 贾原 赵晴 李芳 靳保利 张俊萍关键词:黑素瘤 肿瘤免疫治疗 靶向KIF20A阳性胰腺癌双特异性抗体介导CTL抗肿瘤效应研究 研究背景:胰腺癌,是一种高致死率的恶性肿瘤,五年生存期仅为5%左右,且预后效果极差。手术是目前可以延长生存期的有效方法,但胰腺癌患者可手术人群比例仅为9-22%。因此,迫切需要探索一种疗效更优的治疗方法。研究目的 :目前... 贾原 张俊萍 杨晓玲 冯慧晶 刘鹏敏关键词:胰腺癌 ADCC效应 文献传递 穿膜肽介导的NY-ESO-1抗原多肽CTL抗肿瘤效应研究 背景:细胞穿膜肽(Cell penetrating peptides, cpps)是一种由30个或者更少氨基酸组成的能够穿透细胞膜的多肽,能够运载包括药物在内的许多物质。目的:探讨细胞穿膜肽携带NY-ESO-1抗原多肽致... 贾原 李文丽 赵睛 李芳 张俊萍关键词:黑色素瘤 NY-ESO-1 肿瘤免疫治疗 PICK1中N端酸性区域对其PDZ结构域脂质结合能力的调节 被引量:1 2012年 蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(protein interacting with Cαkinase 1,PICK1)是衔接膜上受体和蛋白激酶Cα的重要蛋白.利用荧光光谱结合定点突变技术、蛋白与脂质覆盖法等方法,分析了PICK1蛋白N末端区域几个酸性氨基酸残基对PDZ结构域与膜脂结合的影响,以及钙离子结合N末端酸性区域对PDZ脂结合能力的调节.结果显示,带有上游酸性区域的PDZ结构域(NPDZ)的脂质结合能力仅相当PDZ结构域的15%,相比单独的PDZ结构域与脂质的解离常数Kd(PDZ)为1.58×103μg.L-1,NPDZ与脂质解离常数Kd(NPDZ)为3.3×104μg.L-1,其中在N末端酸性残基中D8与D12两个天冬氨酸是影响脂质结合能力减弱的关键残基,若将二者分别突变为丙氨酸后,NPDZ与脂质的解离常数分别为:Kd(D8/A)=4.42×103μg.L-1;Kd(D12/A)=1.73×103μg.L-1接近于PDZ结构域与脂质结合能力;钙离子会增强NPDZ脂结合能力,当钙离子浓度达到30μmol/L时,NPDZ的脂结合能力提高2.3倍,但只相当于PDZ的50%的结合能力. 杨廷 贾原 肖虹 石亚伟关键词:PDZ结构域 脂质体 荧光光谱 CA2+ 肿瘤微环境中CXC型趋化因子及其受体的研究进展 被引量:12 2020年 趋化因子是一种可以由肿瘤细胞和基质细胞产生的小分子分泌蛋白,趋化因子受体在肿瘤细胞和基质细胞表面也均有表达,趋化因子和其相配对的同源受体结合通过直接和间接方式调控肿瘤生长,包括激活信号通路直接调控肿瘤细胞的增殖与转移、作用于血管内皮细胞间接调控肿瘤及协调免疫细胞在组织内的迁移和定位后影响免疫反应调控肿瘤。趋化因子分为CXC、CC、CX3C及C四大类,研究较多的亚型为CXC和CC。鉴于CXC趋化因子及其受体在恶性肿瘤中作用广泛,且与免疫系统关系密切,有望成为一个有潜力的治疗靶标,其与免疫检查点抑制剂联合作用于肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME),改善肿瘤免疫反应。本文对CXC亚型的趋化因子/趋化因子受体轴研究进展进行综述,包括促肿瘤轴CXCR2/CXCLs、CXCR4/CXCL12和抑肿瘤轴CXCR3/CXCL9~11的基本生物学特性、对肿瘤的直接作用、对TME的间接作用、靶向治疗以及这3个轴所包含的受体及配体的预测预后意义。 薛昭君 贾原 张俊萍关键词:CXC趋化因子 趋化因子受体 肿瘤微环境 肿瘤 免疫治疗 靶向KIF20A多肽的疫苗在晚期胰腺癌免疫治疗中的研究进展 内容:胰腺癌是常见的恶性程度较高的消化系统肿瘤之一,转移早、手术切除率低、放化疗效果差、死亡率极高,其总体5年生存率仅约为5%。近年来,免疫治疗的兴起,在各种肿瘤的治疗中所占位置越来越重,应用于胰腺癌治疗的报道也屡见不鲜... 韩亚萍 贾原 郭继强 李芳 张俊萍关键词:晚期胰腺癌 免疫治疗 文献传递 胃癌患者外周血CD8~+CD28~+和CD8~+CD28-T淋巴细胞亚群的分析 背景:细胞免疫在抗肿瘤免疫应答中发挥着重要作用,它通过功能各异的T淋巴细胞亚群来完成复杂的免疫调控,共刺激分子CD28主要表达于T淋巴细胞上,与存在于活化B淋巴细胞上的B7相互作用后产生的'第二信号'才能使T细胞活化,形... 李芳 赵晴 贾原 韩亚萍 郭继强 张俊萍关键词:胃癌 CD8 CD28 流式细胞术 文献传递 流式细胞术三种染色方法检测体外纯化扩增的NK细胞的细胞毒作用比较 被引量:5 2016年 目的:比较流式细胞术3种不同染色方法检测体外诱导扩增后NK细胞的细胞毒活性效果。方法:收集健康志愿者外周血,体外诱导扩增NK细胞,在培养第17天后分为3组,每组按10∶1、20∶1、40∶1 3个效靶比混合,共同培养4 h,并分组用3种不同方法染色后经流式细胞术检测。A组:CFSE/Annectin-V/7-AAD三色荧光染色法;B组:Annectin-V/PI双色荧光染色法;C组:CFSE/PI双色荧光染色法。结果:培养17 d后,NK细胞(CD3-CD56+)由培养第0天(16.34±10.51)%增加到(83.63±10.63)%(P<0.05)。3种染色方法检测结果均显示,扩增后NK细胞对K562细胞具有显著细胞毒活性:A组NK细胞对K562细胞的细胞毒活性均明显高于B和C组(P<0.05),当效靶比为10∶1时,A、B和C 3个组细胞毒活性分别为(36.56±3.69)%、(22.35±2.71)%和(10.85±2.09)%;当效靶比为20∶1时细胞毒活性分别为(47.83±5.52)%、(39.07±5.55)%和(29.61±4.81)%;当效靶比为40∶1时细胞毒活性则分别为(67.7±4.77)%、(51.51±4.43)%和(44.12±5.62)%,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。结论:健康者外周血经体外分离培养,可得到高纯度NK细胞;流式细胞检测技术CFSE/Annectin-V/7-AAD三色荧光染色法能特异性地和灵敏地检测NK细胞的细胞毒活性。 郭继强 韩亚萍 李芳 赵晴 贾原 靳保利 张俊萍关键词:流式细胞技术 细胞毒作用 NK细胞 CFSE