陆惠萍
- 作品数：9 被引量：97H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 褪黑素对溴氰菊酯致大鼠海马神经细胞Bcl-2和细胞色素C表达及细胞凋亡率的影响被引量：2
- 2008年
- 目的观察褪黑素（MT）对溴氰菊酯（DM）引起的大鼠大脑海马脑神经细胞凋亡率、Bcl-2蛋白表达水平及细胞色素C表达的影响。方法40只Wistar雌性大鼠随机分为5组：橄榄油对照组（1ml／kg橄榄油）、单纯DM组（12．5mg／kg DM）、DM±MT25组（25．0mg／kgMT＋12．5mg／kg DM）、DM＋MT50组（50mg／kg MT＋12．5mg／kgDM）、DM＋MT100组（100mg／kgMT＋12．5mg／kgDM），每组8只，一次性给药24h后，每组大鼠分别断头处死。应用流式细胞术测大鼠海马细胞凋亡率；应用免疫组化和计算机显微图像分析技术测大鼠海马神经细胞中Bcl-2蛋白表达水平和细胞色素C的表达。结果DM＋MT25、DM＋MT50、DM＋MT100各组Bcl-2蛋白表达水平分别为（45．26±3．84）、（39．40±4．04）、（34．40±4．52），明显低于对照组（59．33±4．03），但明显高于单纯DM组（20．73±3．34），差异均有统计学意义（P〈0．05）；DM＋MT25、DM＋MT50、DM＋MT100组的细胞色素C表达水平分别为（20．53±3．17）、（28．73±2．61）、（28．66±4．82），DM＋MT50、DM＋MT100组细胞色素C表达水平明显高于对照组，3个MT剂量组均明显低于对单纯DM组，且差异均有统计学意义（P〈0．05）。3个MT剂量组神经细胞凋亡率分别为（15．00±1．77）％、（14．88±1．84）％、（11．75±1．93）％，明显低于单纯DM组（23．06±3．63）％，但高于对照组（5．69±1．37）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MT能够抑制DM引起的大鼠海马神经细胞中Bcl-2蛋白水平的降低和细胞色素C的升高，抑制细胞凋亡率，MT可能通过改变蛋白的表达水平和抗凋亡能力发挥脑保护作用。
- 郭丽孙敏徐蓓蓓徐以平陆惠萍司红玉严红
- 关键词：褪黑激素除虫菊酯类BCL-2细胞色素C
- 人促红细胞生成素在大肠杆菌中融合高表达：稀有密码子对外源蛋白翻译速率的影响被引量：1
- 1995年
- 本实验分别用两种融合表达载体（ｐＧＥＸ－２Ｔ及ｐＤＳ－６Ｈ）在大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ中表达人促红细胞生成素（ｈ－ＥＰＯ）。结果发现，虽然ｈ－ＥＰＯ基因中大肠杆菌使用频率为０％或１％的密码子占密码子总量的１４．３％，但实验中却取得了较高的蛋白表达量。ｐＧＥＸ－２Ｔ和ｐＤＳ－６Ｈ中表达的融合蛋白（分子量：４４４００和２３８００）分别占细菌总蛋白的２９．７％和１７．５％。从而提示，一个基因中的密码子使用频率与翻译延长速率之间可能不是一种简单的对应关系。表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ中５＇融合基因长度达１３００ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ中仅为３６ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ但两者表达水平却无显著差异，因此作为翻译起始限制因素的翻译起始区的ＡＴＧ下游顺序仅需长约３６个核苷酸。
- 郭瀛军王易伦陆惠萍陆德如
- 关键词：促红细胞生成素密码子基因表达大肠杆菌
- 绿色荧光蛋白在大肠杆菌中的克隆及高效表达被引量：3
- 1997年
- 目的：在大肠杆菌中克隆及高效表达绿色荧光蛋白基因（ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ）。方法：ＰＣＲ法克隆ＧＦＰ－Ｓ６５ＴｃＤＮＡ并改造其两端的限制性内切酶位点，构建重组原核表达载体ｐＲＳＥＴ－ＧＦＰＳ６５Ｔ。结果：在ＩＰＴＧ诱导条件下，ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ的表达量占细菌总蛋白量的１５％以上。细菌培养物及其超声上清在长波紫外线的照射下，发出明亮的绿色荧光。结论：ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ可以作为原核细胞中的报告基因，用标准的长波紫外线即可检测其表达。
- 陆惠萍周凤娟孙树汉
- 关键词：基因表达大肠杆菌绿色荧光蛋白克隆
- 褪黑素对溴氰菊酯致大鼠血清氧化损伤的保护作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨褪黑素(Melatonin,MT)对溴氰菊酯(Deltamethrin,DM)诱发大鼠血清氧化性损伤的保护作用。方法35只Wistar雄性大鼠按体重随机分为5组(每组7只),分别为橄榄油对照组、DM、MT1、MT2、MT3组。每组连续10d,腹腔注射相应剂量药物。并在第1、4、7和10天给药后4 h,对各组大鼠尾间采血。酶标仪比色测定大鼠血清上清中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果给药10 d后,与对照组相比,DM组血清中MDA含量从第4天到第10天,随给药时间的延长MDA明显升高(P<0.05)。与DM组相比,MT1、MT2组和MT3组血清MDA含量在第7天和第10天明显降低(P<0.05),与对照组比较,DM组血清中GSH和GSH-Px活力第4天到第10天明显降低(P<0.05),CAT和SOD活力在第7天和第10天明显降低(P<0.05)。与DM组相比,MT1组血清CAT、GSH和GSH-Px活力从第4天到第10天逐渐升高(P<0.05),SOD活力在第7天和第10天明显升高(P<0.05)。与DM组相比,MT2组和MT3组血清CAT、GSH、SOD GSH-Px活力在第7天和第10天明显升高(P<0.05)。结论DM能诱发大鼠血清氧化损伤,MT对DM引起的大鼠血清的氧化损伤有抑制作用。
- 郭丽孙敏陆惠萍严红
- 关键词：褪黑素溴氰菊酯血清
- 热休克后表达受抑基因的差别显示及克隆
- 1997年
- 热休克反应是生物体对高于其正常生长温度环境而作出的一系列分子应答反应。热休克基因及其表达的正调控机制现已得到广泛而深入的研究。
- 戴建新王易伦刘宇健陆惠萍孙树汉
- 关键词：热休克基因分子遗传学热休克反应计算机辅助分析全长CDNA克隆
- 绿色荧光蛋白作报告基因的研究
- 1997年
- 海洋无脊椎动物的生物发光现象源于一类绿色荧光蛋白(green fluorescent proteins,GFPs)。自1992年Aequorea GFP cDNA被克隆后,GFP作为一个新的报告基因已取得了广泛的应用。 GFP-S65T是野生型GFP的Ser65→Thr的一个突变体。
- 陆惠萍周凤娟孙树汉
- 关键词：绿色荧光蛋白报告基因分子遗传学海洋无脊椎动物真核表达载体长波紫外线照射
- 囊虫病诊断用抗原编码cDNA的分子克隆被引量：84
- 1997年
- 目的 :克隆与分析囊虫病诊断用抗原及其编码基因。方法 :采用基因重组技术 ,构建来源于猪囊尾蚴 m RNA的 c DNA文库。以囊虫病患者、囊虫病病猪的血清为探针从 c DNA文库中筛选出目的克隆。结果 :获得人、猪共同抗原 2个 (分子量分别为 2 8k Da和 18k Da) ,人特异性抗原和猪特异性抗原各 1个 (分子量为 34 k Da、 14k Da)。这些抗原的编码克隆分别命名为λc C1、λc C2、λc H1及 λc P1。c C1c DNA含有编码 2 8k Da的人、猪共同抗原的完整基因 ,全长 10 70 bp,起始密码 ( ATG)从自 2 2 bp,终止密码 ( TGA)结于 74 7bp,长为 74 7bp的开放阅读框架编码由 2 4 9个氨基酸组成的多肽 ,其理论推导分子量为 2 7.36k Da。结论 :以 c C1等融合蛋白为诊断用抗原 ,具有高度的特异性和较理想的敏感性。
- 孙树汉王俊霞陈蕊雯陆惠萍彭郁葱王朝霞
- 关键词：囊尾蚴病猪囊尾蚴抗原多肽分子克隆
- 绿色荧光蛋白及其在分子寄生虫学研究中的应用被引量：6
- 1997年
- 陆惠萍孙树汉
- 关键词：寄生虫学绿色荧光蛋白
- 基因突变的检测
- 1996年
- 1985年以前对基因中显著的缺失、插入、重排,可以用Southern杂交法来鉴定。一些小的变异,包括单碱基改变,只有当它们位于限制性内切酶的切点上时,方可被检出(如RFLP,限制性片段长度多态性)。如果这些小的变异不是位于限制性内切酶的切点上,那么只有对整个的基因进行顺序测定,当然,这是费时费力的。
- 陆惠萍
- 关键词：基因突变检出率DNA片段限制性内切酶变性梯度凝胶电泳多态性
